小麦花生两熟制高产栽培研究 Ⅰ.NK-P在花生上的应用效果

NK-P植物营养素又名钛微肥,由南开大学在80年代初首先研制成功,在多种作物上试用,增产效果较好。1991年～1992年我所用济南教育学院生产的NK-P药液,在花生上进行了试验,肯定了NK-P对花生的增产效果。

NK-P植物营养素的应用

NK-P植物营养素属含钛微量元素肥料,自70年代初国外对各种植物营养素研究与应用有许多报导;匈牙利、西德、苏联等国家使用了这种植物营养素。1982年南开大学化学系首次合成。1987年笔者在粮食作物、油料作物、经济作物20多种农作物上进行了室内和田间应用试验,均取得不同程度的增产效果,同时对改善产品营养成份提高品质也有显著作用。现将试验结果介绍如下: 一。

甜菜喷施NK-P植物营养素效果分析

目前，在甜菜生产上使用的微肥很多，有的品种增产、增糖效果显著。黑龙江省垦区的甜菜生产近年来也处于徘徊不前的状态，如何提高其产质量，这除了有一合理的耕作制度外，高效微肥的使用，也不失为一有效措施。为确定适于垦区甜菜生产使用的高效微肥，１９９８年进行了筛...

人参皂甙-Rd对SNI大鼠痛敏异常及脊髓背角内P物质和NK-1受体表达的影响

目的:观察人参皂甙-Rd(Ginsenoside-Rd,G-Rd)对坐骨神经分支选择损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠痛敏异常及脊髓背角内P物质(substance P,SP)和NK-1受体表达的影响,进而探讨G-Rd镇痛的脊髓机制。方法:成年雄性SD大鼠(30只)随机分成五组:空白对照组(blank control)、假手术组(sham operation)、坐骨神经分支选择损伤组(spared nerve injury,SNI)、SNI+saline(腹腔注射,i.p.)组、SNI+G-Rd(i.p.)组。行为学采用von Frey法测定上述各组手术侧机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical thresholds,PWMT);用免疫荧光组织化学染色法检测对比上述各组大鼠脊髓L4-6节段背角内SP免疫荧光产物的荧光强度和NK-1阳性细胞的数量。结果:SNI术后10 d,大鼠手术侧PWMT值明显低于正常对照组和假手术组,术后20 d到达最低值;而在SNI+G-Rd组PWMT值则明显高于SNI组和SNI+sline组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示:术后20 d时,SNI组和SNI+saline组的脊髓手术侧L4-6背角内SP样免疫荧光的强度和NK-1样阳性细胞的数量明显有所增高,与对照组和假手术组相比较具有显著性意义(P<0.05);但SNI+G-Rd组与SNI组和SNI+saline组相比,其SP样免疫荧光的强度和NK-1样阳性细胞的数量则明显有所下降(P<0.05)。结论:人参皂甙-Rd抑制神经病理性疼痛的机制之一可能与有效减少脊髓背角内SP和NK-1受体的表达有关。

基于痛性相关神经肽CGRP、SP及其受体NK-1探讨腧穴电针防治急性发作期偏头痛机制

目的观察腧穴电针对发作期偏头痛大鼠中脑P物质(SP)、神经激肽(NK-1)的分布与表达,及血浆降钙素基因相关肽(CGRP)浓度的影响,探讨腧穴电针防治发作期偏头痛相关机制的可行性依据。方法(250±50)g健康Wistar雄性大鼠40只,按随机数字表法分4组:空白对照组(A),模型对照组(B),模型+腧穴电针组(C),模型+伪电针组(D),每组10只。A组皮下注射0.9%氯化钠注射液;B组皮下注射硝酸甘油制备偏头痛大鼠模型;C、D组电针干预7 d后,皮下注射硝酸甘油制备偏头痛大鼠模型,造模成功后30 min,对两组进行相应的电针干预治疗。采用酶联免疫法(ELISA)测定血浆中CGRP的含量及免疫组化检测中脑导水管周围灰质区SP、NK-1阳性细胞数。结果 CGRP、SP结果显示:B组、D组均明显高于A组、C组(P<0.05);且A组与C组,B组与D组组间差异无统计学意义(P>0.05)。NK-1结果显示:B、C、D组均明显高于A组(P<0.05),B、C、D组各组间有下降趋势,但均无明显变化(P>0.05)。结论腧穴电针通过下调发作期偏头痛大鼠痛性相关神经肽CGRP、SP表达量,发挥防治偏头痛的作用。

腧穴针刺对急性期偏头痛大鼠中脑组织SP及其受体NK-1的影响

目的观察腧穴针刺对偏头痛大鼠中脑P物质(SP)及其受体NK-1 m RNA表达的影响,为探讨针刺治疗急性偏头痛机制提供依据。方法 40只健康Wistar雄性大鼠按随机数字表法分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、腧穴电针组(C组)、伪电针组(D组)4组,每组10只。各组按设计方案进行造模,和针刺预防治疗后,断头取中脑,应用实时定量PCR技术,测定各组大鼠中脑P物质及其受体NK-1 m RNA的表达量。结果与A组比较,B、C、D组SP m RNA、NK-1 m RNA表达量明显增高(P<0.05)。与B组比较,C、D组SP m RNA、NK-1 m RNA表达量明显降低(P<0.05)。与D组比较,C组SP m RNA、NK-1 m RNA表达量明显降低(P<0.05)。结论针刺能通过下调急性期偏头痛大鼠中脑SP及NK-1基因表达水平,发挥预防治疗偏头痛的作用,且腧穴针刺疗效更佳。

神经肽P物质通过诱导RUNX2表达对小鼠成骨细胞增殖能力的影响

目的·探讨神经肽P物质(SP)对转录因子RUNX2表达的调控及其对成骨细胞增殖能力的影响。方法·体外分离C57BL/6J小鼠颅骨来源的原代成骨细胞,通过转染si RNA沉默成骨细胞RUNX2基因的表达。将SP、Spantide(SP抑制剂)、L703606(NK-1受体抑制剂)以及RUNX2 si RNA进行配伍作用于成骨细胞,观察SP对成骨细胞RUNX2表达的调控及对成骨细胞增殖能力的影响。成骨细胞增殖活性的检测采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8法)。通过real-time PCR和Western blotting技术检测SP对RUNX2在m RNA和蛋白表达水平的调控。结果·CCK-8法检测结果显示,浓度为10^(-12)~10^(-6) mol/L的SP促进小鼠成骨细胞增殖,10^(-8) mol/L为其最佳浓度。10^(-8) mol/L SP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2的m RNA和蛋白表达水平较对照组明显升高,Spantide和L703606抑制SP对RUNX2表达的诱导。RUNX2 si RNA降低成骨细胞基础增殖水平,同时也抑制了SP对成骨细胞的促增殖作用。结论·SP通过与NK-1受体结合诱导转录因子RUNX2的表达,进而增强成骨细胞增殖能力。

表皮生长因子受体抑制剂致相关皮肤瘙痒的机制研究

目的通过表皮生长因子受体抑制剂(epidermal growth factor receptor inhibitors,EGFRIs)——厄洛替尼干预小鼠,与P物质(substance P,SP)致瘙痒小鼠进行对比性研究,探索瘙痒的发生机制。方法两组小鼠分别予厄洛替尼和SP致痒,观察小鼠的行为学表现和皮肤表观状态;取小鼠皮肤,比较二者的皮肤病理形态,免疫组化法检测小鼠皮肤中NK-1R的表达;ELISA检测小鼠外周血中白介素(interleukin,IL)-31、IL-33、组胺、白三烯B4、SP的浓度,比色法检测一氧化氮(NO)的浓度。结果厄洛替尼致痒表现在给药2~5 d一过性瘙痒,而SP致痒表现在给药后1 h瘙痒明显,逐渐缓解,二者的搔抓表现一致;两种致痒各组间IL-31、IL-33、组胺、白三烯、SP差异有显著性(P<0.05),且部分神经递质的表达趋势表现出一定的相似性。厄洛替尼致痒小鼠和SP致痒小鼠皮肤NK-1R免疫组化呈阳性,分布情况一致。结论厄洛替尼所致皮肤瘙痒可能与SP/NK-1R的结合有关,通过下游的信号因子致痒。

P物质在变应性接触性皮炎小鼠模型瘙痒中的作用

目的探讨P物质(SP)在变应性接触性皮炎(ACD)小鼠瘙痒中的作用。方法外用2,4-二硝基氟苯(DNFB)建立昆明小鼠ACD模型,观察激发后73h内小鼠的搔抓行为及神经激肽1(NK1)受体拮抗剂spantide和阿片受体拮抗剂纳洛酮对小鼠搔抓行为的影响,并用ELISA、免疫组化分别检测激发后48h小鼠颈背部皮损中SP含量、NK1受体表达。结果ACD小鼠模型在DNFB激发后48h出现搔抓高峰;搔抓高峰时,皮损中SP含量[(3873.40±291.58)pg/g]明显低于阴性对照组[(4349.90±502.83)pg/g](P<0.05),但NK1受体表达(6.13±1.25)明显高于阴性对照组(2.87±0.86)(P<0.05)。Spantide和纳洛酮均可抑制小鼠搔抓行为(P<0.01)。结论DNFB诱发的ACD小鼠模型搔抓行为是瘙痒相关反应;SP通过激活皮肤内NK1受体参与ACD小鼠模型瘙痒的发生。

P物质受体和非肽类拮抗剂

Ｐ物质被认为是传递痛信息的重要神经递质或调质。Ｐ物质（ＮＫ－１）受体非肽类拮抗剂的发展，使研究Ｐ物质（ＳＰ）及其受体的功能进入了一个崭新的阶段。分子生物学方法应用于ＳＰ（ＮＫ－１）受体和非肽类拮抗剂之间相互作用的研究表明，哺乳动物ＮＫ－１受体的种族差异（ｓｐｅｃｉｅｓｖａｒｉａｔｉｏｎ）属于同一受体的两个不同变种（ｔｗｏｓｐｅｉｅｓｖａｒｉａｎｔｓ），而不是两个不同的ＮＫ－１受体亚型。该发现有一定的药理学意义，对临床工作者也有参考价值。

长期单施NK肥条件下几种典型土壤磷的演化

为探讨我国典型土壤长期单施氮钾肥对土壤全磷和Olsen-P磷的影响,研究了不同气候条件、不同耕作制度下,7种典型土壤类型长期定位试验单施氮钾肥下土壤全磷和Olsen-P变化及其影响因素。结果表明,在长期单施氮钾肥条件下,除杭州水稻土全磷含量稳定在1.0g·kg-1左右外,其余6种耕作土壤全磷含量和土壤Olsen-P均呈显著下降趋势,全磷含量下降幅度在13.6%～44.9%之间;土壤Olsen-P下降速率比全磷高几倍,Olsen-P下降有一定阈值,这一阈值大约为5mg·kg-1。土壤全磷含量与土壤Olsen-P含量呈极显著直线相关关系。因此,长期单施氮钾肥在很大程度上减少了土壤磷素养分库。

建立改良型人NK细胞体外扩增技术

目的建立一种改良型的NK细胞扩增技术。方法分离4名健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),采用工程细胞p APC-mb IL-21和IL-2对NK细胞进行体外扩增,应用细胞计数法和流式细胞术分别比较NK细胞的扩增倍数和NK细胞纯度,并采用CFSE/7-AAD法对肿瘤细胞K562和RPMI-8226进行细胞毒性实验检测杀伤效率。结果经过21 d的刺激培养,NK细胞平均扩增至409.4倍,细胞纯度最高可达95.86%。杀伤实验结果显示,扩增的NK细胞对K562细胞杀伤率高达85.2%。结论 p APC-mb IL-21工程细胞联合IL-2能够在体外高效的扩增出具有较高杀伤活性的NK细胞,可以为NK细胞免疫治疗奠定基础。

NK-1R在胰腺癌中的表达、组织学定位和临床意义

目的探讨胰腺癌中P物质(SP)受体NK-1R的表达、组织学定位,并将结果结合临床资料分析,以期找出其中相关性。方法33个胰腺癌标本取自胰头癌根治术,男性19例,女性14例,正常胰腺组织取自20个器官捐献者,男性11例,女性9例。应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)技术,检测正常胰腺、胰腺癌组织和7株胰腺癌细胞中NK-1R的mRNA水平,应用Western blot技术检测NK-1R的蛋白水平,应用免疫组织化学方法进行NK-1R的组织学定位。结果与正常胰腺相比,胰腺癌组织中NK-1R mRNA和蛋白都过度表达,免疫组织化学结果提示:正常胰腺的腺泡和导管中有微弱的NK-1R表达,胰腺癌组织中有较强的NK-1R表达,主要位于胰腺癌细胞、神经纤维和炎性细胞。结论胰腺癌组织中NK-1R mRNA和蛋白表达水平都明显上调,扰乱了神经激肽的作用环节,促进胰腺癌细胞的发生和发展。

钛微肥在农业生产上的应用与前景

钛微肥在农业生产上的应用与前景石宗江，许明义（广西国营桃城华侨农场５３２２００）钛微肥、（ＮＫ—Ｐ植物营养素）是天津南开大学化学系专家在国内首先研究成功的。１９８８年通过天津市一级鉴定，技术属于“国内首创，国际领先”。１９８９年７月获国家教委科学技术...

P物质对急性心肌缺血大鼠心功能的影响

目的观察P物质对急性心肌缺血后大鼠心功能的影响。方法健康成年雄性SD大鼠48只,体重250-300 g,分在体实验和离体实验两部分,每部分随机分为3组(n=8):手术对照组(sham组)、急性结扎冠脉(coronary artery occlusion,CAO)组和药物干预组。药物干预在体实验干预组(D-SP组)使用神经激肽-1(NK-1)受体拮抗剂(D-SP),离体实验干预组(SP组)使用P物质(substance P,SP)。CAO组和药物干预组在体和离体模型均采用结扎冠状动脉左前降支,手术对照组除不结扎冠状动脉外,其余操作同CAO组。CAO前按照不同分组分别给予生理盐水、SP(离体,10-6mol/L)或D-SP(在体,10-7mol/L)。观察记录药物干预前5 min到CAO后60 min内的左心室心功能参数,包括:左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室最大收缩速率(LV+dP/dtmax)、左心室最大舒张速率(LV-dP/dtmax)和HR。计算左心室发展压(LVDP=LVSP-LVEDP),同时记录心电图。结果与sham组及CAO组相比,CAO前SP和D-SP干预对左室心功能各项参数的影响无统计学意义(P>0.05)。在体实验中,与CAO组相比,NK-1受体拮抗剂(D-SP)组CAO后LV+dP/dtmax显著升高(P<0.05),降低LV-dP/dtmax(P<0.05)。离体研究中,与CAO组相比,SP组CAO后LVEDP明显升高(P<0.05)。SP和D-SP对CAO后心率变化无显著影响(P>0.05)。结论 P物质通过激活NK-1受体减弱急性心肌缺血后大鼠左心室收缩和舒张功能。

自然杀伤细胞及其抑制受体在妊娠中的作用

自然杀伤细胞通过其表达的不同类型的受体选择性识别细胞表面的相应配体,提供自然杀伤细胞反应的自我调节信号。正常妊娠时,蜕膜自然杀伤细胞的杀伤细胞抑制受体介导的抑制作用占主导地位,表现为自然杀伤细胞失活,对半同种异体胎儿耐受;而在某些病理情况下,杀伤细胞抑制受体的效应机制发生障碍,可能导致妊娠丢失。

外周NK-1受体对甲醛致痛大鼠行为学的影响

目的探讨外周NK-1受体在甲醛致痛模型中的作用及可能的作用机制。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为4组(n=6)。包括一个对照组:DMSO组和3个不同剂量的RP67580实验组:5 nmol组;20nmol组;100 nmol组。观察注射甲醛后各组大鼠行为学的改变。结果在甲醛致痛的第一、二时相,各实验组累积舔咬爪时间均短于对照组(P<0.05)。且在第二时相,各实验组之间差异有统计学意义(P<0.05),随着给药剂量增加,大鼠累积舔咬爪时间下降明显(P<0.05)。结论外周注射NK-1受体拮抗剂RP67580,对甲醛致痛模型的2个时相均有抗伤害作用,此作用可能与阻断P物质参与的伤害性信息传导有关。

雷公藤红素下调P物质介导的肥大细胞NK-1R mRNA表达

目的研究雷公藤红素对P物质(susbstance p,SP)介导的肥大细胞活化的影响,方法应用CCK8检测雷公藤红素对小鼠P815肥大细胞的毒性作用,筛选出最佳的浓度和时间后将细胞分为细胞空白组,SP模型组,低、中、高浓度雷公藤红素组,雷公藤红素预处理细胞后,再采用SP刺激肥大细胞,致使其活化。采用ELISA检测组胺的释放量,RT-PCR检测NK-1R mRNA表达情况。结果雷公藤红素对细胞的毒性作用呈浓度时间依赖性,随着浓度和时间的增加毒性越大;与模型组相比,组胺的释放量随浓度的增加而减少,肥大细胞表面NK-1R mRNA表达下降(P<0.05),差异有统计学意义。结论雷公藤红素能抑制小鼠P815肥大细胞组胺的释放,可能跟NK-1R的表达有关。

成品与临用前配制氯化钾氯化钠注射液致痛作用比较及机制分析

目的比较成品与临用前配制氯化钾氯化钠注射液的致痛作用,并分析其可能的机制。方法将30只SPF级雄性昆明鼠随机均分为对照组、NK组及PK组各10只,分别给予腹腔注射生理盐水注射液、成品氯化钾氯化钠注射液(NK注射液)及临用前配制氯化钾氯化钠注射液(PK注射液)0.1 mL/10 g,观察15 min内出现扭体反应情况,ELISA法检测下丘脑组织中P物质(SP)、谷氨酸(Glu)含量;分组与用药同前,仅用药方法为足底皮下注射30μL/只,3 min内行疼痛行为学评分,免疫组化法检测脊髓L 4~L 6段组织中的SP、NK-1受体(NK1R)和Glu。结果PK组扭体反应发生率、疼痛评分,下丘脑组织中SP、Glu含量,以及脊髓组织中SP、NK1R、Glu表达量均高于对照组、NK组(P均<0.05);NK组与对照组各指标比较,差异均无统计学意义。结论NK注射液较PK注射液的致痛率和致痛程度降低,与其刺激所产生的中枢和外周疼痛神经递质减少有关。

神经肽P物质通过Ca^(2+)和CREB诱导自然杀伤细胞的活化作用

目的 体外研究神经肽P物质(SP)对自然杀伤(NK)细胞的活化作用,并探讨SP受体NK-1R在SP调控NK细胞活性中的作用及可能的信号分子机制。方法 采用MTT释放法检测SP对NK92-MI细胞增殖和杀伤活性的影响,荧光定量PCR和流式细胞术检测NK-1R的mRNA表达水平和膜表达,Fura-2/AM荧光探针法测定NK92-MI细胞胞质钙浓度,Western blotting测定环磷酸腺苷(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化水平。结果 10^(-12) mol/L SP可促进NK92-MI细胞的增殖和杀伤活性,NK-1R拮抗剂可完全或大部分阻断SP的促进作用。10^(-12) mol/L SP作用下,NK92-MI细胞的NK-1R表达上调,胞质钙浓度升高,提示SP通过增加NK-1R的表达及激活Ca^(2+)信号通路发挥对NK92-MI细胞活性的调节作用。10^(-12) mol/L SP使NK92-MI细胞CREB磷酸化水平明显增高,表明SP可诱导CREB在Ser133位点磷酸化而激活。结论 c AMP信号通路参与了NK-1R介导的SP对NK92-MI细胞的活化作用,且Ca^(2+)和CREB是关键信号分子。