白桦脂酸在Va24NKT细胞杀伤胰腺癌细胞中的作用机制研究

目的研究白桦脂酸对Va24NKT细胞杀伤胰腺癌细胞的作用机制。方法从外周血中扩增Va24NKT细胞,同时将不同浓度的白桦脂酸作用于Va24NKT细胞、SW-1990细胞,MTT法检测Va24NKT细胞、SW-1990细胞生长,流式细胞仪检测NKG2D表达,Western blot法检测不同浓度白桦脂酸作用后NKT细胞中P-ERK1/2、ERK1/2的表达。结果白桦脂酸浓度在0.125~2μg/mL时能促进Va24NKT细胞的生长(P<0.05),经白桦脂酸诱导后的Va24NKT细胞NKG2D的表达显著高于对照组(P<0.05),对SW-1990细胞的杀伤活性亦显著高于对照组(P<0.05)。结论白桦脂酸在一定浓度下增强Va24NKT细胞杀伤胰腺癌细胞作用,白桦脂酸促进Va24NKT细胞生长与ERK1/2通路有关。

T细胞亚群及NK细胞、NKT细胞与儿童紫癜性肾炎的相关性研究

目的探讨T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)、自然杀伤性T细胞(NKT)在儿童紫癜性肾炎(HSPN)患者中的临床意义。方法回顾性分析2017年7月至2022年7月在贵阳市妇幼保健院住院的HSPN患儿作为研究对象,作为HSPN组(n=116);同时以同期健康体检儿童为对照组(n=100),两组资料进行分析比较。HSPN患儿依据临床分型:孤立性血尿组(n=23),孤立性蛋白尿组(n=15),血尿与蛋白尿组(n=59),肾病综合征组(n=19);依据病理活检分型:轻度组(n=28),中度组(n=58),重度组(n=6)。比较各组患儿外周血中T淋巴细胞亚群、NK细胞、NKT细胞绝对值计数水平。结果与对照组相比,HSPN组外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞、NK细胞均降低、CD4^(+)/CD8^(+)、CD19^(+)B细胞、NKT细胞均增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。HSPN临床分型中,CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞、NK细胞随临床分型的加重而降低,肾病综合征型与各临床分型比较,CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞明显降低,血尿与蛋白尿型和肾病综合征型与孤立性血尿型比较,NK细胞明显降低,CD19^(+)B细胞、NKT细胞随临床分型的加重而增高,不同临床分型组间差异均有统计学意义(P<0.05)。随着病理分级加重,CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞绝对值呈下降趋势,其中轻度组与重度组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);随着病理分级加重,CD19^(+)B淋巴细胞、NKT细胞呈增高趋势,不同病理分级组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论HSPN患儿存在体液免疫及细胞免疫功能紊乱,通过检测外周血T细胞亚群、NK细胞、NKT细胞水平可协助HSPN临床及病理损害的评估。

食管鳞癌患者外周血NK细胞、NKT细胞中Ku70蛋白水平检测及临床意义

目的检测食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者外周血NK细胞、NKT细胞中Ku70蛋白表达水平,并探索其对ESCC的临床意义及预后价值。方法对前期ESCC患者和健康人的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)质谱结果进行生物信息学分析,筛选出差异蛋白Ku70,流式细胞学验证Ku70在NK细胞和NKT细胞中的表达,分析两者的联系及临床意义。结果蛋白质谱发现522个差异蛋白,其中310个蛋白上调,212个蛋白下调,通过生信分析筛选出Ku70蛋白。流式细胞术分析显示,肿瘤组的PBMCs中CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞和CD16^(+)CD56^(+)NK细胞的Ku70荧光强度和阳性表达率均低于健康对照组。结论我们获得了ESCC患者PBMCs的差异表达蛋白谱,其中Ku70在ESCC患者CD3^(+)CD56^(+)NKT细胞和CD16^(+)CD56^(+)NK细胞中表达降低显著,可能成为ESCC外周血检测的生物标志物。

NKT细胞在MRSA感染性肺炎中作用的初步研究

目的:初步探讨NKT细胞在耐甲氧西林金葡菌(MRSA)感染性肺炎模型中的作用。方法:MRSA经鼻黏膜感染C57BL/6野生型(WT)小鼠和CD1d^(-/-)小鼠。观察小鼠生存率,检测肺组织中细菌载量,ELISA检测肺组织中细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-17、IL-6含量,流式细胞术检测肺组织中CD3^(+)CD8^(+)T细胞、NK细胞和NKT细胞百分比。结果:MRSA致死剂量感染5 d,WT小鼠生存率显著低于CD1d^(-/-)小鼠(46.2%vs 90.0%,P<0.05)。感染12~48 h,WT小鼠肺组织中细菌载量显著高于CD1d^(-/-)小鼠(P<0.01);WT小鼠肺组织中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-17含量较CD1d^(-/-)小鼠明显增高(P<0.01)。MRSA感染24 h,WT小鼠肺组织中NKT细胞、NK细胞百分比显著高于CD1d^(-/-)小鼠(P<0.01),而CD3^(+)CD8^(+)T细胞百分比低于CD1d^(-/-)小鼠(P<0.01)。结论:在MRSA肺炎中,NKT细胞被激活,从而加重肺部炎症反应,降低生存率,减缓细菌清除。

NKT细胞亚群及其功能研究进展

NKT细胞是一群兼具NK细胞和T细胞特征的免疫细胞。根据其表达的TCR类型及发育是否依赖于CD1d分子,可将其分为三类:I型NKT细胞、II型NKT细胞和NKT样细胞。NKT细胞活化后,能够迅速产生IFN-γ、IL-4等多种细胞因子,并正向或负向调节免疫应答。由于NKT细胞数量较少且功能复杂,对NKT细胞亚群及其功能认识的不足成为制约其临床应用的瓶颈。本文对NKT细胞亚群及其功能进行综述,阐明了NKT细胞在免疫应答和免疫调节中发挥的重要作用,并指出某些NKT细胞亚群研究的不足。随着人们对NKT细胞亚群及其功能的深入研究,以NKT细胞为主体的免疫治疗具有巨大的临床应用前景。

过继骨髓细胞通过分化为NKT细胞并增加自身脂质含量减轻小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝病肝损伤

目的 探讨骨髓细胞过继对于小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝病(MAFLD)的治疗作用,并探索起主要作用的细胞群体。方法 HE染色检测蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)诱导的C57BL/6小鼠MAFLD肝组织病变并通过检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平评估骨髓细胞过继对MAFLD的治疗作用。实时定量PCR检测T细胞、自然杀伤T(NKT)细胞、 Kupffer细胞等肝脏免疫细胞的低密度脂蛋白受体(LDLR)和白细胞介素4(IL-4) mRNA表达。羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的骨髓细胞经小鼠尾静脉注射,采用冰冻切片观察肝组织CFSE+细胞比例,流式细胞术追踪CFSE+细胞在肝、脾组织的比例。流式细胞术检测CFSE+的过继细胞CD3、 CD4、 CD8、 NK1.1、 CD11b、粒细胞受体1(Gr-1)的表达确定其分化情况。尼罗红脂质染色评估肝组织NKT细胞胞内脂质含量。结果 骨髓细胞过继输入的MAFLD小鼠肝组织损伤明显减轻、血清ALT、 AST水平降低。同时,肝脏免疫细胞上调其IL-4和LDLR的表达。LDLR敲除小鼠给予MCD饮食后引发更严重的MAFLD。骨髓细胞过继细胞治疗效果显著并分化出更多的NKT细胞定殖在肝脏,同时该群NKT细胞胞内脂质显著增多。结论骨髓细胞过继治疗通过分化更多的NKT细胞,同时通过提高该群细胞的胞内脂质含量从而减轻MAFLD小鼠肝损伤。

Ⅰ型和Ⅱ型NKT细胞与肿瘤免疫

NKT细胞是一类特殊的T细胞,根据T细胞受体(TCR)的恒定性,将NKT细胞分为Ⅰ型和Ⅱ型。近年来研究表明,NKT细胞在肿瘤免疫中具有重要作用,其中Ⅰ型NKT细胞主要发挥抗肿瘤作用,Ⅱ型NKT细胞可以促进肿瘤的发展。本文将从Ⅰ型和Ⅱ型NKT细胞在肿瘤免疫中的作用、机制以及相互调节等方面作一综述。

NK细胞和NKT细胞在慢性乙型肝炎中的表型和功能特征

目的检测慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血自然杀伤(NK)细胞、自然杀伤T(NKT)细胞的比例、NKG2D/NKG2A水平和γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。方法采集并分离CHB患者外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测NK、NKT细胞占PBMC的比例,NKG2D、NKG2A水平,经佛波酯(PMA)、布雷菲德菌素A(BFA)、离子霉素(ionomycin)处理后,流式细包术检测IFN-γ、TNF-α的水平,分析各指标与乙肝病毒载量和血清丙氨酸氨基转移酶的关系,采用独立样本t检验与Pearson相关性分析。结果与正常对照者相比,CHB患者外周血NK细胞和NKT细胞比例明显降低;NKG2A阳性的NK细胞和NKT细胞明显升高;经PMA、BFA、ionomycin刺激后,IFN-γ阳性的NK细胞和NKT细胞明显降低。结论 CHB患者NK、NKT细胞存在不同程度的减少、受体表达失调和细胞因子分泌功能下降等功能紊乱。

超抗原SEB活化耐受性NKT细胞亚群的研究

目的:探讨超抗原SEB活化的效应细胞参与免疫耐受的NKT细胞亚群及分化特征。方法:采用C57BL/J小鼠脾细胞经SEB诱导,收集体外扩增10d的淋巴细胞为效应细胞,与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养3d,测定效应细胞对刺激剂的应答反应能力。在正常小鼠淋巴细胞与上述刺激剂反应的同时添加效应细胞,3d后测定效应细胞抑制正常淋巴细胞对刺激原的应答反应能力。用MTT染色方法记录细胞增殖的A值。以ConA活化的淋巴细胞做参照,用流式细胞术(FCM)解析了耐受性效应细胞中NKT细胞亚群并显示分化来源与功能的相关性。结果:与正常淋巴细胞对抗原应答反应能力相比,SEB活化的效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低,细胞生长的A值从正常组的0.80±0.04、0.60±0.03和0.55±0.07下降到0.60±0.05、0.30±0.05及0.27±0.04(P<0.01,n=3)。效应细胞抑制正常淋巴细胞对上述抗原的应答反应,尤其抑制ConA活化的T淋巴细胞的应答反应;A值分别由正常值降低到0.26±0.002、0.48±0.04及0.34±0.02(P<0.01,n=3)。效应细胞中CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+/NK1.1+NKT细胞亚群显著增加(P<0.05和P<0.01,n=4)。ConA活化的淋巴细胞是T淋巴细胞并包括CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。结论:超抗原SEB活化的耐受功能与CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+NKT细胞亚群有关,它们由T细胞分化而来。CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞没有参与耐受性调节。

NKT细胞与调节性T细胞在免疫调节中相互作用的研究进展

NKT细胞和调节性T细胞是2种有效的免疫调节细胞,能独立调节先天性和获得性免疫反应。近年来,大量研究表明NKT细胞和调节性T细胞之间存在复杂的双向调节:活化的NKT细胞通过影响抗原提呈细胞的功能、依赖IL-2信号机制等作用促进调节性T细胞的功能,调节性T细胞通过细胞接触、分泌抑制性细胞因子等方式抑制NKT细胞的增殖、细胞因子释放和细胞毒活性等,两者相互协同调控机体的免疫应答。本文就NKT细胞和调节性T细胞在免疫调节中的相互作用的研究进展做一综述。

NKT细胞发育及功能研究进展

自然杀伤T细胞(Natural killer T cells,NKT细胞)是一类天然存在的介导先天性免疫和获得性免疫的重要淋巴细胞,参与机体的抗感染、抗肿瘤、移植免疫和自身免疫调节作用。NKT细胞的来源、选择分化和成熟过程及其调控研究有了很大的进展,同时在这些过程中仍存在一些备受争议和值得深入研究的问题。清楚了解NKT细胞的分化发育过程和调控机制,结合NKT细胞的生物学功能特征,将对临床预防和治疗相关的免疫性疾病具有重要的指导意义。

肺结核患者外周血NKT细胞、NK细胞、T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的了解肺结核患者外周血NKT细胞、NK细胞和T淋巴细胞亚群的变化及其意义。方法采用流式细胞仪抗体双标法检测472例肺结核和非结核患者外周血NKT细胞(CD3+CD16+CD56+)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+)及T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8及CD4/CD8)的表达率,并进行分析。结果肺结核患者的NK细胞和NKT细胞的表达水平显著低于非结核患者,T细胞亚群CD4在肺结核患者中的表达显著高于非结核患者。肺结核患者不耐药组NK细胞和NKT细胞的表达率明显高于耐药组(F值分别为7.926、5.689,P<0.001)。初治病例CD4、CD4/CD8显著高于复治病例(t值为-2.179、-2.402;P值为0.030、0.017),初治病例CD8低于复治病例(t=3.257,P=0.001)。NKT细胞、NK细胞在初治和复治病例中的分布差异无统计学意义。NKT细胞、NK细胞和T淋巴细胞亚群在不同病灶范围分组之间分布差异无统计学意义。NK细胞、NKT细胞、CD4、CD8以及CD4/CD8在肺部有无空洞及空洞数量分组之间分布差异有统计学意义,即NK细胞、NKT细胞数、CD4/CD8、CD8随着空洞累及范围的增加而降低,CD4则随空洞累及范围的增加而升高。结论肺结核患者NKT细胞和NK细胞的表达受到了抑制,且NK细胞和NKT细胞的表达率随着耐药及耐药程度的加重而降低,随着肺结核空洞累及范围的增加机体免疫进一步失衡,提示结核病尤其是耐药结核病采用免疫调节剂辅助治疗的必要性。

CD_3^+CD_(56)^+NKT细胞及CD_3^-CD_(56)^+NK细胞在恶性肿瘤患者的临床意义研究

背景与目的细胞毒性淋巴细胞在抗肿瘤免疫效应中发挥着重要作用,CD3+CD56+NKT细胞作为一类新的具有细胞毒性的效应细胞,目前关于其抗肿瘤意义的探讨主要集中于血液系统恶性疾病,而在实体肿瘤中的应用和临床价值研究尚少。本研究旨在初步探讨抗肿瘤细胞CD3+CD56+NKT细胞及CD3-CD56+NK细胞在恶性肿瘤患者外周血的表达状态及其临床意义。方法采用流式细胞术分析118例恶性肿瘤患者(55例肺癌患者和63例乳腺癌患者)及46例健康对照组外周血中的T细胞亚群及CD3+CD56+NKT细胞、CD3-CD56+NK细胞表达。结果恶性肿瘤患者组CD3+CD8+T细胞、CD3+CD56+NKT细胞以及CD3-CD56+NK细胞表达率均明显高于健康对照组(P<0.01)。肺癌患者中以CD3+CD8+T细胞和CD3+CD56+NKT细胞明显增加为主;乳腺癌患者中以CD3+CD56+NKT细胞和CD3-CD56+NK细胞明显增加为主。结论CD3+CD56+NKT细胞在肺癌和乳腺癌患者的抗肿瘤效应中占据重要地位,而CD3+CD8+CTL和CD3-CD56+NK细胞在不同类型肿瘤患者中具有不同的重要性。

人外周血NKT细胞亚群表型及生物学特征

目的:观察正常人周围血NKT细胞的频率、表型特征及功能,进一步了解NKT细胞在免疫应答中的作用。方法:分离正常成年人PBMCs,利用流式细胞术(FCM)检测TCRvβ11、CD4、CD8、CD45RA、CD62L、CCR7等表面分子的表达;PMA+Ionomycin刺激PBMCs后,检测细胞因子的产生。结果:正常成年人周围血CD3+TCRvβ11+NKT细胞的平均频率为0.35%,其范围为0.11%～1.20%。根据CD4和CD8分子的表达,可将CD3+TCRvβ11+NKT细胞分为CD4+、CD8+、CD4-CD8-三个亚群,分别为56.24%、25.82%、16.47%。此外多数CD3+TCRvβ11+NKT细胞表达CD45RA,近半数细胞表达CD62L,少数细胞表达CCR7。细胞因子表达的结果显示,经PMA和Ionomycin刺激后,近30%的CD3+TCRvβ11+NKT细胞分泌IFN-γ,6.9%的细胞分泌IL-4。CD4+NKT细胞产生IL-4的量要明显高于CD8+NKT细胞,但IFN-γ的表达二者没有明显差别。重要的是初始和记忆性NKT细胞都能产生细胞因子,以记忆性NKT细胞为主。结论:正常人周围血中CD3+TCRvβ11+NKT细胞的频率很小,但其表型复杂,产生细胞因子IFN-γ和IL-4的频率高,参与免疫调节及免疫应答的过程。

C57BL/6小鼠不同组织器官中NKT细胞的比较

目的比较C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞的含量、亚型和功能的特点。方法分离正常C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的淋巴细胞,利用细胞表面分子染色的方法,观察不同组织器官中CD3+NK1.1+NKT细胞及其亚型的含量;淋巴细胞经过PMA和离子霉素刺激后,应用细胞内细胞因子染色的方法,通过流式细胞仪观察NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17的产生情况。结果肝脏中NKT细胞的含量为(25.2±12)%,显著高于肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结。肝脏、脾脏和肠系膜淋巴结中NKT细胞以CD4+细胞亚群为主,而肺脏中NKT细胞以CD4-CD8-亚群为主,同时肠系膜淋巴结的NKT细胞中存在CD4+CD8+亚群。不同组织器官中NKT细胞IFN-γ、IL-4、IL-9和IL-17产生的能力有差别。结论 C57BL/6小鼠肝脏、肺脏、脾脏和肠系膜淋巴结的NKT细胞在含量、表型和功能方面可能存在明显的差异。

他克莫司对肾移植受者外周血NK和NKT细胞比例的影响及临床意义

他克莫司（Tacrolimus）是一种强效免疫抑制剂,现已广泛应用于肾脏、肝脏及心脏移植,有效减低了排异反应的发生,提高了移植受者的存活率。但是他克莫司个体药代动力学差异大,不同个体对其血药浓度的敏感性及耐受性有差异,故单纯依靠血药浓度监测不能有效反映移植受者的免疫状态。因此如何了解移植受者的免疫状态,指导免疫抑制剂的个体化应用,在免疫抑制不足及免疫过度之间寻找平衡,成为困扰移植医生的问题。NK细胞（natruralkiller cell）是天然免疫系统的主要效应细胞。近年研究表明,NK细胞在移植免疫中起重要作用,可促使移植物排斥反应的发生[1]。NKT细胞（natrural killerT cell）是一类表达NK细胞表面特有标志的特殊T细胞亚群,参与机体免疫调节,是连接固有免疫和适应性免疫应答的桥梁[2],研究发现它对于器官移植免疫耐受的产生和维持具有重要作用[3]。本研究通过测定肾移植受者术后外周血NK细胞及NKT细胞的动态变化,研究他克莫司对NK细胞及NKT细胞表达的影响,探讨外周血NK、NKT细胞的表达能否作为体现肾移植受者免疫状态的一个指标,可否作为免疫抑制药物调整的依据之一。

周围血中CD3^+ TCRvα24^+与CD3^+ TCRvβ11^+ NKT细胞之间的差异

目的:比较正常人周围血中CD3+TCRvβ11+NKT细胞和CD3+TCRvα24+NKT细胞在频率、亚群、表型特征及功能方面的异同,以进一步了解NKT细胞在免疫应答中的作用。方法:分离正常成年人PBMCs,利用流式细胞术(FCM)检测TCRvα24、TCRvβ11、CD4、CD8、CD45RA、CD62L和CCR7表面分子的表达;PMA+Ionomyc in刺激PBMCs后,检测CD3+TCRvα24+、CD3+TCRvβ11+NKT细胞产生细胞因子IL-4和IFN-γ的情况。结果:PBMCs中CD3+TCRvα24+和CD3+TCRvβ11+NKT细胞的平均频率分别为0.63%和0.43%,NKT细胞频率的个体差异较大,少数细胞同时表达TCRvα24和TCRvβ11;根据CD4和CD8分子的表达,PBMCs中CD3+TCRvα24+NKT细胞可分为CD4+、CD8+、CD4-CD8-3个亚群,平均频率分别为64.35%、19.04%、17.18%,CD3+TCRvβ11+NKT细胞同样可分为CD4+、CD8+、CD4-CD8-3个亚群,其平均频率分别为53.69%、18.99%、29.74%,相应各亚群之间无显著差异;CD45RA+CD3+TCRvβ11+NKT细胞的频率(71.14%)要高于CD45RA+CD3+TCRvα24+NKT细胞的频率(46.55%),二者之间差异有显著性,CD62L+CD3+TCRvα24+NKT(46.26%)对CD62L+CD3+TCRvβ11+NKT(42.36%)以及CCR7+CD3+TCRvα24+NKT(9.24%)对CCR7+CD3+TCRvβ11+NKT(8.22%)之间的差异均无统计学意义;细胞因子检测的结果表明CD3+TCRvα24+NKT细胞和CD3+TCRvβ11+NKT细胞产生的IL-4(13.01%对6.62%)和IFN-γ(38.12%对26.95%)的总体水平间无显著性差异,但是IFN-γ+IL-4+CD3+TCRvα24+NKT细胞的平均频率(12.65%)要高于IFN-γ+IL-4+CD3+TCRvβ11+NKT细胞的平均频率(3.02%),且二者之间的差异有统计学意义。结论:正常人周围血中CD3+TCRvα24+NKT细胞和CD3+TCRvβ11+NKT细胞在频率、表型及产生细胞因子方面均有一定差异,总体来看,二者频率虽小但表型复杂,产生细胞因子IFN-γ和IL-4的水平高,参与免疫调节及免疫应答的过程。

食管鳞癌患者手术前后外周血T细胞亚群与NK、NKT细胞检测的临床意义

目的:分析食管鳞癌患者手术前后外周血中T淋巴细胞亚群与NK、NKT细胞变化规律及其临床意义。方法:应用流式细胞术检测78例食管鳞癌患者外周血中T淋巴细胞亚群及NK、NKT细胞的水平。结果:肿瘤切除术前NKT细胞水平在中低分化组较高分化组显著下降(P<0.05);术后外周血中CD8+T细胞含量明显降低(P<0.01),CD4+/CD8+比值显著升高(P<0.01),同时NK与NKT细胞水平较术前显著下降(P<0.01)。结论:手术可一定程度改善患者机体免疫功能,检查手术前后外周血T淋巴细胞亚群及NK、NKT细胞水平有助于患者的细胞免疫功能监测,为食管鳞癌临床治疗提供依据。

人外周血Vα24 NKT细胞和CD3^+CD56^+CIK细胞生物学特性的比较研究

目的进一步认识Vα24 NKT细胞和CIK细胞在生物学特性的差异。方法从人外周血单个核细胞扩增NKT细胞和CIK细胞;经免疫磁珠纯化获得高纯度的TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞。运用流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的表型、细胞因子和细胞坏死相关因子的表达情况,并用DIOC18染色及流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的细胞杀伤活性。结果经纯化TCRVα24+Vβ11+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞的纯度均达到>90%;纯化后的Vα24 NKT细胞多数为CD4+和DN NKT细胞,高表达TCRVα24、Vβ11、CD3、CD161,低表达CD56;而纯化后的CIK细胞则以CD8+T细胞为主,高表达CD3、CD56,低表达CD161,几乎不表达TCRVα24和Vβ11。在抗原刺激下,CD3+CD56+CIK细胞的IFN-γ、TNF-α、Perforin、FasL、TRAIL表达水平均高于NKT细胞,但CD3+CD56+CIK细胞几乎不分泌IL-4,而NKT细胞则分泌高水平的IL-4;CD3+CD56+CIK细胞对肿瘤细胞株K562、U937、Jurkat的杀伤率均远远高于NKT细胞。结论TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞是两类完全不同的细胞群,在抗肿瘤免疫和免疫调节中可能起着不同的作用。