PDLIM5、SLC22A3和NKX3-1基因与前列腺癌患病风险的关联性研究

目的:探索PDLIM5基因(rs17021918,T)、SLC22A3基因(rs9364554,C)和NKX3-1基因(rs1512268,A)与中国人群前列腺癌(PCa)患病风险的关联。方法:采用病例-对照研究,包括124例PCa患者和138例正常对照者,对PDLIM5基因(rs17021918,T)﹑SLC22A3基因(rs9364554,C)和NKX3-1基因(rs1512268,A)进行两组间的等位基因及基因型差异分析,探讨各基因与患者的BMI、Gleason评分、PSA浓度、肿瘤分期、年龄等临床表型之间的关联。采用MDR方法进行基因-基因交互作用分析。结果:①PDLIM5﹑SLC22A3和NKX3-1基因的风险等位基因和基因型的频率在病例组和对照间组间的分布无显著性差异(P>0.05)。②3个位点与PCa的发病年龄、Gleason评分、PSA浓度以及病理分期等指标均无显著相关性(P>0.05)。③采用MDR方法分析PDLIM5基因、SLC22A3基因和NKX3-1基因的3个多态性位点的交互作用发现PDLIM5基因和NKX3-1基因之间,可能不存在有基因-基因交互作用,树状图分析说明PDLIM5基因与NKX3-1基因可能有协同作用。结论:PDLIM5、SLC22A3和NKX3-1基因可能与中国人群PCa患病风险无关联。而PDLIM5基因和NKX3-1基因之间对PCa患病风险的影响可能有协同作用。

HOXB7调控NKX3-1促进大肠癌转移机制分析

目的分析HOXB7基因的过表达表达谱数据,探索HOXB7基因在大肠癌发生和转移过程中可能参与的分子机制。方法通过对HOXB7基因过表达的大肠癌细胞株对比空载对照组中表达具有差异的基因,进行转录因子结合位点富集分析,富集的转录因子结合位点与差异基因取交集,得到表达具有差异的转录因子结合位点,对具有此转录因子结合位点的差异表达基因进行共表达分析,明确这些基因可能具有的共表达特性,并对这些共表达基因对应的蛋白进行蛋白相互作用网络调控分析,明确这些基因可能参与的细胞信号通路。结果转录因子NKX3-1结合位点在HOXB7过表达的上调差异基因中的转录调控区域富集程度较高,且其本身为上调的差异基因,推测其可能在部分上调基因中具有调控作用。而NKX3-1基因与具有其转录因子结合位点的14个基因存在着共表达关系,且这14个基因所主导的细胞信号子网络主要参与肿瘤相关通路、Wnt信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、细胞间连接、细胞与细胞外基质连接等与肿瘤发生及转移密切相关的信号通路。结论 HOXB7基因可能通过调控NKX3-1基因促进大肠癌的发生和转移。

NKX3-1基因表达对小鼠黑色素瘤生长和转移的影响

目的探讨NKX3-1基因表达对小鼠黑色素瘤生长和转移的影响。方法通过腺病毒介导的基因表达方法,采用CCK-8试剂盒检测了过表达NKX3-1对小鼠黑色素瘤B16BL6细胞增殖的影响;利用细胞划痕迁移实验和Transwell细胞浸润实验检测了过表达NKX3-1对B16BL6细胞迁移的影响,通过建立小鼠移植瘤模型和实验性肿瘤转移模型,研究了过表达NKX3-1对小鼠黑色素瘤的生长以及转移的影响。结果与对照组相比,过表达NKX3-1可以抑制B16BL6细胞的增殖,迁移。动物模型结果显示,过表达NKX3-1可以抑制小鼠黑色素瘤B16BL6细胞移植瘤的生长,抑制黑色素瘤B16BL6细胞实验性肺转移。结论 NKX3-1基因表达具有显著地抑制B16BL6细胞生长和转移的作用。

Lack of an Additive Effect between the Deletions of Klf5 and Nkx3-1 in Mouse Prostatic Tumorigenesis

Prostate cancer is one of the most common malignancies.The development and progression of prostate cancer are driven by a series of genetic and epigenetic events including gene amplification that activates oncogenes and chromosomal deletion that inactivates tumor suppressor genes.Whereas gene amplification occurs in human prostate cancer,gene deletion is more common,

前列腺特异的转录因子NKX3.1上调Dicer1基因的表达

目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对Dicer1基因表达的影响。方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3细胞,通过G418筛选,有限稀释法克隆培养获得NKX3.1稳定转染的PC3细胞-PC3(+);采用基因芯片检测NKX3.1对前列腺癌PC3细胞基因组表达谱的影响。进一步应用RT-PCR、Western blot-ting进行验证。为进一步检测Dicer1表达增高、促进microRNA的成熟作用,构建了microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞,通过报道基因检测成熟microRNA let-7a-1对其靶序列的作用。结果:基因组芯片显示,NKX3.1稳定表达的PC3(+)细胞中,Dicer1表达明显高于PC3细胞。RT-PCR、Western blotting结果验证PC3(+)细胞中Dicer1mRNA和蛋白质的表达水平均高于PC3细胞。microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞后,报告基因检测,PC3(+)细胞中荧光素酶活性明显低于PC3细胞。结论:NKX3.1可上调前列腺癌PC3细胞中Dicer1的表达,促进microRNA的成熟及作用。

壮药莪术油对卵巢癌miR-223-3p的调控机制研究

目的探讨壮药莪术油对卵巢癌miRNA-223-3p的调控机制;方法生物信息学技术确定miRNA-223-3p在卵巢癌中调控的关键靶点;利用PCR、WB等实验检测技术验证壮药莪术油通过miR-223-3p对该关键靶点影响卵巢癌的生长发展。结果生物信息学显示:miRNA-223-3p在卵巢癌中调控的关键靶点确定为癌症通路上的Wnt2B、NKX3-1。实验显示:壮药莪术油、紫杉醇、莪术醇能够降低瘤体组织miRNA-223-3p、Wnt2B mRNA的表达,并上调NKX3-1 mRNA的表达;壮药莪术油、紫杉醇、莪术醇能上调瘤体组织中NKX3-1蛋白的表达,并下调瘤体组织中Wnt2B蛋白的表达。结论壮药莪术油能够抑制卵巢癌的增长,提高模型裸鼠生存质量,并可能是通过miRNA-223-3p调控Wnt2B、NKX3-1的表达实现的。

下颌骨间叶性软骨肉瘤1例

间叶性软骨肉瘤(mesenchymal chondrosarcoma,MC)是一种发生于骨和骨外软组织,由未分化小细胞和肿瘤性软骨构成的具有独特双相结构的罕见恶性肿瘤^([1]),青年人多见,具有恶性度高、易局部复发和转移、预后差等特点。现报道1例下颌骨MC的诊治体会。1病例报告1.1一般资料患者,男,31岁,2020-12-01至浙江大学医学院附属第二医院就诊,主诉4个月前发现右下后牙齿松动,影响进食。

人同源盒基因NKX3.1内含子及5'上游10kb调控区功能的初步分析

目的检测人同源盒NKX3.1基因内含子及5'上游10 kb调控区对启动子活性的影响,分析其雄激素反应性和组织特异性,为进一步研究该基因表达调控机制奠定基础。方法利用基因重组技术分别构建5'上游10 kb调控区/内含子-NKX3.1基本启动子-荧光素酶报告基因质粒。转染雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCaP后,检测荧光素酶表达活性,观察内含子及5'上游调控区对NKX3.1启动子活性的影响;加入雄激素类似物R1881刺激,进一步检测其雄激素反应性;通过转染不同细胞分析其组织特异性。结果荧光素酶报告基因分析表明,NKX3.1基因5'上游-7 681～-6 483 bp可以增强其启动子活性2.6倍,但该增强作用并不具有组织特异性。内含子及5'上游10 kb其他区域对NKX3.1启动子活性未见明显的增强作用。R1881刺激并不能使内含子及5'上游10 kb调控区活性明显增强。结论 NKX3.1基因内含子及5'上游10 kb调控区不具备雄激素反应性,5'上游-7 681～-6 483 bp可以增强NKX3.1启动子活性,但其组织特异性增强元件并不存在于该片段。