维生素D3通过抑制NLRP3炎性小体激活改善氮芥诱导角质形成细胞炎性损伤

目的探讨NLRP3炎性小体在维生素D3(vitamin D3,VD3)改善氮芥(nitrogen mustard, NM)诱导角质形成细胞炎性损伤中的作用和机制。方法用20μmol/L NM单独或联合用10μmol/L caspase-1特异抑制剂(Ac-YVAD-cmk, YVAD)、10μmol/L NLRP3炎性小体特异抑制剂(MCC950)、5 nmol/L VD3处理人角质形成细胞株(HaCaT细胞)4 h。应用CCK-8法检测细胞增殖活力,Western blot检测NLRP3、caspase-1 p20、IL-1β和COX-2的表达水平,ELISA检测IL-1β释放量。结果 20μmol/L NM对HaCaT细胞增殖活力无显著影响,NM处理后可显著上调HaCaT细胞NLRP3、caspase-1 p20、IL-1β和COX-2的蛋白表达水平,增加细胞IL-1β释放(P<0.05)。而加入MCC950或YVAD处理后能显著抑制NM诱导的上述效应(P<0.05);同时,VD3干预能够明显抑制NM对NLRP3和caspase-1 p20蛋白表达的上调作用,并显著减少NM诱导的IL-1β和COX-2的表达和释放(P<0.05)。结论 VD3通过抑制NLRP3炎性小体激活减少角质形成细胞炎性因子生成,改善NM诱导的细胞炎性损伤。