麝香酮对胰腺癌中NLRP3炎症体通路介导的上皮间质转化的影响

目的探讨麝香酮(MUS)对胰腺癌(PC)的抗癌作用及其对核苷酸结合寡化结构域样受体3(NLRP3)炎症体通路和上皮间质转化(EMT)的影响。方法根据MUS处理浓度不同将人胰腺癌细胞(PANC1)细胞分为0μM组、0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组,各组细胞使用相应浓度的MUS孵育48 h。使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定生长抑制率和半抑制浓度(IC50)值,使用Annexin V-FITC/PI染色法测定细胞凋亡,使用Transwell测定细胞迁移和侵袭。使用Western blot测定Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、基质金属蛋白酶(MMP2)、MMP9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)和血清人细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白表达水平。通过对BALB/c雄性裸鼠皮下注射PANC1细胞构建移植瘤模型,然后将裸鼠随机分为对照组和MUS组,每组6只。对照组裸鼠给予腹腔注射100μL的1%二甲基亚砜(DMSO),MUS组裸鼠给予腹腔注射100μL的MUS溶液(20 mg/kg)。给药21 d后测量裸鼠肿瘤体积和重量。结果与0μM组相比,0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组的PANC1细胞的生长抑制率逐渐升高,凋亡率逐渐升高(均P<0.05),Bax蛋白表达水平逐渐升高,Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。与0μM组相比,0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组的迁移和侵袭细胞数逐渐降低(P<0.05),MMP2和MMP9蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。与0μM组相比,0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组的E-cadherin蛋白表达水平逐渐升高,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),NLRP3、caspase-1和ASC蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。与对照组比较,MUS组裸鼠的肿瘤体积和重量均降低(P<0.05),肿瘤组织中的NLRP3、caspase-1和ASC蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论MUS具有良好的抗PC作用,可能通过抑制NLRP3炎症体通路介导的EMT发挥抗癌作用。

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠NLRP3炎症体调控作用的实验研究

目的:观察解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠NLRP3炎症体的调控作用,探索解毒化瘀颗粒治疗急性肝衰竭的作用机制。方法:SPF级SD大鼠36只,随机分为解毒化瘀颗粒组12只、模型组12只和空白对照组12只。解毒化瘀颗粒组和模型组大鼠给予腹腔注射D-GalN 600mg/kg和LPS 20μg/kg制备急性肝衰竭大鼠模型,空白对照组给予腹腔注射等体积生理盐水。造模前1周开始灌胃给药,解毒化瘀颗粒组给予解毒化瘀颗粒灌胃,模型组与空白对照组给予等体积生理盐水灌胃。于造模成功后第3天取材,采集血液标本及大鼠肝组织,HE染色观察,运用Western Blot、qPCR检测肝组织中NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白和mRNA表达情况;运用ELISA检测血清IL-1β、IL-18表达情况。结果:解毒化瘀颗粒组大鼠血清IL-1B、IL-18水平低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组对比,解毒化瘀颗粒组大鼠肝组织中NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白及mRNA表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:解毒化瘀颗粒能够下调NLRP3炎症体NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β和IL-18等相关因子的表达,对急性肝衰竭具有一定的治疗作用。

小胶质细胞NLRP3炎症体激活在锰诱导神经功能损伤中的作用

目的揭示亚急性锰染毒诱导的小胶质细胞对小鼠中枢神经的损伤效应,阐明核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在其中的关键作用及机制。方法将C57BL/6小鼠和NLRP3^(-/-)小鼠各随机分为2组,每组12只,共4组,即对照组、锰组(Mn组)、NLRP3^(-/-)组和NLRP3^(-/-)+Mn组。Mn组和NLRP3^(-/-)+Mn组在第1、4、7、10、13日时,采用皮下注射(100 mg/kg)的方式进行锰暴露,对照组和NLRP3^(-/-)组给予相同体积生理盐水。运用行为学检测法观察小鼠运动能力改变情况;运用免疫组织化学TH染色法观察小鼠脑组织神经元形态学的改变;运用原子吸收法对各组小鼠血锰含量进行检测;通过qRT-PCR法检测小胶质细胞活化相关标志物IL-18、IL-1β的mRNA表达水平;通过免疫荧光染色实验检测纹状体区内小胶质细胞的激活情况。使用Western blotting检测NLRP3相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达情况。结果与对照组相比,Mn组小鼠运动协调能力明显损伤(P<0.05),黑质区神经元细胞数量明显降低(P<0.05),小胶质细胞明显发生活化(P<0.05),NLRP3及其相关分子NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β蛋白表达水平增高(P<0.05)。NLRP3敲除后,锰暴露所诱导小鼠运动协调能力下降显著回升(P<0.05),且可以逆转锰暴露所诱导的神经元损伤、小胶质细胞活化和NLRP3相关分子蛋白水平表达增加(P<0.05)。结论锰暴露可能通过诱导小鼠纹状体区小胶质细胞活化,促神经功能损伤;特异性敲除NLRP3基因后,可以抑制锰暴露引起的小胶质细胞活化和神经功能的损伤,起到显著的神经功能保护作用。

当归多糖对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NLRP3炎症体信号通路的影响

目的探究当归多糖对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾组织NLRP3炎症体信号通路的影响。方法采用5/6肾切除法构建CRF模型,随机分为模型组、尿毒清(2.25 g·kg^(-1))组和当归多糖低(100 mg·kg^(-1))、中(200 mg·kg^(-1))、高(400 mg·kg^(-1))剂量组,另设置假手术组(大鼠开腹后不切除肾脏),观察大鼠肾功能变化,HE染色观察肾组织病理形态,比较各组大鼠肾功能、肾组织氧化应激指标和血清促炎因子水平变化,蛋白免疫印迹法检测大鼠肾组织NLRP3炎症体信号通路蛋白表达。结果模型组大鼠肾小管管壁薄厚不匀,呈萎缩或空泡样变性,肾小球囊腔扩张变大,系膜细胞明显增生,肾间质出现纤维化变性并伴有大量炎症细胞浸润;归多糖低、中、高剂量组及尿毒清组大鼠肾组织病理损伤均有改善,且当归多糖高剂量组与尿毒清组大鼠肾组织病理损伤改善程度最强。当归多糖可降低CRF大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白含量,降低肾组织丙二醛(MDA)水平和血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β、IL-6水平,降低肾组织Nod样受体家族含有pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、IL-1β蛋白表达,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论当归多糖可减轻CRF大鼠肾组织炎症、氧化应激水平,缓解肾组织损伤,改善肾功能,可能与抑制NLRP3炎症体信号激活有关。

NLRP3炎症体参与末端糖基化产物诱导的人主动脉内皮细胞损伤

目的观察NLRP3炎症体在末端糖基化产物(AGEs)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞损伤中的作用。方法制备AGEs并以不同浓度AGEs处理体外培养的HAECs,再以抗氧化剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)处理细胞。MTT法评估细胞活性;流式细胞术测定细胞内活性氧簇(ROS)生成水平;ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β水平;免疫印记法检测HAECs中NLRP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β蛋白表达水平。结果与正常对照相比,经不同浓度AGEs处理后的HAECs细胞活力显著下降(P<0.05);细胞内ROS生成水平显著增加(P<0.05);细胞内NLRP3、ASC、caspase-1 p20以及IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05);细胞培养上清液内IL-1β水平显著升高(P<0.05)。上述变化均具有AGEs浓度依赖性(P<0.05)。抗氧化剂NAC处理能够显著改善AGEs对细胞活力的抑制(P<0.05),抑制ROS产生(P<0.05),下调NLRP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β蛋白表达(P<0.05),并减少培养上清液内IL-1β水平(P<0.05)。结论 AGEs可能通过诱导HAECs内ROS产生激活NLRP3炎症体导致细胞损伤。

柴胡皂苷-d对H_(2)O_(2)诱导的HL-7702细胞ROS产生及NLRP3炎症体的影响

目的:探讨柴胡皂-d(SSd)对H_(2)O_(2)诱导HL-7702细胞ROS产生及NLRP3炎症体表达的影响。方法:体外培养HL-7702细胞,采用H_(2)O_(2)诱导HL-7702细胞造模,并分为空白对照组,H_(2)O_(2)模型组,MitoTEMPOL+H_(2)O_(2)组,SSd+H_(2)O_(2)组,使用荧光检测线粒体膜电位(JC-1)、MitoSox Red线粒体超氧化物阴离子表达,化学发光法检测ATP水平,Western blot、RT-PCR法检测NLRP3炎症体的表达。结果:与对照组比较,H_(2)O_(2)对HL-7702细胞的氧化应激损伤使线粒体膜电位有下降趋势(P<0.05),ATP生成减少(P<0.05),MitoSOX Red荧光强度增强(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase1蛋白及基因表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,使用MitoTEMPOL、SSd干预后线粒体膜电位明显上升(P<0.05),ATP明显上升(P<0.05),MitoSOX Red荧光强度下降(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase1蛋白及基因表达明显下调(P<0.05)。结论:H_(2)O_(2)诱导的HL-7702细胞中线粒体来源的ROS可以诱导NLRP3炎症体的活化,SSd可以通过抑制H_(2)O_(2)诱导的HL-7702细胞ROS的产生及NLRP3炎症体的表达,发挥保护肝细胞作用。

大黄素通过调控ROS和NLRP3炎症体通路改善草酸钙结晶诱导的肾小管上皮细胞损伤

目的研究大黄素是否能通过调控活性氧(ROS)及NLRP3炎症体通路抑制草酸钙结晶引起的肾小管上皮细胞氧化应激及炎症损伤。方法人肾皮质近曲小管上皮细胞培养后分别给予草酸钙结晶及大黄素干预。用细胞增殖与毒性试验检测细胞活性;蛋白印迹(Western blot)分析检测相关炎症蛋白的表达;流式细胞术检测ROS的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞分泌炎症因子水平。结果细胞增殖与毒性试验显示大黄素可以缓解草酸钙晶体造成的细胞活性损伤。10μmol/L大黄素预处理后,流式细胞术显示大黄素显著降低草酸钙晶体引起的ROS升高,Western blot及ELISA试验表明大黄素可以显著抑制草酸钙晶体引起的相关炎症因子(NLRP3、ASC、Pro-caspase-1、Cleaved-caspase-1、IL-18、IL-1β)的表达与分泌。结论大黄素通过调控ROS及NLRP3炎症体通路抑制草酸钙结晶引起的肾小管上皮细胞损伤。

肝细胞内NLRP3炎症体的表达与炎症应答初步研究

目的探讨炎症体(inflammasome)在肝细胞内的表达,明确肝细胞内炎症体是否具有正常的炎症应答功能。方法以肝细胞株L02、HepG2为研究模型,RT-PCR、Real-time PCR检测LPS刺激及未刺激组caspase-1、IL-1β的mRNA的表达水平;Western blot检测NLRP3的表达和各刺激组胞内caspase-1活化;ELISA检测各刺激组上清中IL-1β和IL-18的分泌。结果 L02、HepG2细胞均表达NLRP3炎症体,LPS刺激促进肝细胞内caspase-1、IL-1β表达上调;内源性危险信号ATP能有效活化肝细胞内caspase-1酶原,促进IL-1β和IL-18分泌增加,caspase-1特异性抑制剂能特异性的抑制IL-1β、IL-18的分泌。结论肝实质细胞的NLRP3炎症体对内源性危险信号具有炎症应答功能,在肝内无菌性炎症的启动和维持中可能具有重要促进作用。

NLRP3炎症体在血管疾病中的作用

NLRP3炎症小体是核苷酸结合和寡聚化结构域样受体(nucleotide-binding and oligomerization domain-like receptors,NLRs)家族中的一种蛋白复合体,在固有免疫中发挥重要作用。当机体遭遇有害因子刺激时,NLRP3炎症体诱导pro-caspase 1裂解成具有活性的caspase 1,促进IL-1β,IL-18的成熟和释放,从而参与宿主抗感染和无菌性炎症反应。近年来大量研究表明NLRP3炎症体与血管疾病的发生发展密切相关,NLRP3炎症体参与的血管壁无菌性炎症反应在大、中、小及微血管的病理生理过程中起重要作用。

NLRP3炎症体调控肺部炎症疾病的机制及其中药干预的研究进展

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nod-like receptor pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症体是目前关注度较高且研究较为广泛和深入的炎症体之一,与多种肺部炎症疾病的发生和发展有着密切的联系。通过阐述NLRP3炎症体的组成及生理作用、与其激活途径,及NLRP3炎症体及其相关蛋白和下游炎症因子在哮喘、慢性阻塞性肺炎(COPD)、肺炎支原体肺炎及肺损伤中的作用表达,以及中药干预NLRP3炎症体的相关研究进行综述。

NLRP3炎症体与胰岛素抵抗、胰岛β细胞功能损伤的相关性研究

目的探讨不同糖代谢人群中血清NLRP3炎症体(NACHT,LRP及PYD结构域蛋白)的表达及与胰岛素抵抗的相关性。方法糖尿病组(DM) 27例,糖尿病前期组(PD) 30例,正常糖耐量组(NGT) 30例,测定血清中NLRP3、IL-1β、IL-18的水平,观察其在不同糖代谢人群中的变化规律及其相关性。结果 3组间NLRP3、IL-1β、IL-18水平,DM组> PD组> NGT组(P <0. 05)。NLRP3与FBG、FINS、HOMA-IR、IL-1β、IL-18呈正相关,与HOMA-β呈负相关。结论 NLRP3在PD人群中即有表达增加,并且随着血糖逐步增高,慢性炎症损伤及胰岛素抵抗也逐渐加重。NLRP3炎症体可能是影响FBG、HOMA-IR及HOMA-β的重要因素。

NLRP3炎症体活化及与心血管疾病的研究进展

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding domain and leucine-rich rep protein 3,NLRP3)炎症小体作为当前热点,其致动脉硬化作用已被众多实验证实。当机体遭遇有害因子刺激时,NLRP3炎症体可被激活并诱导半胱天冬酶前体(pro-caspase)裂解成有活性的caspase形式,促进炎症因子的成熟释放,参与体内的无菌炎症反应。NLRP3炎症体可被多种途径激活,通过促炎因子释放诱导心血管相关疾病。本综述拟对近年来有关NLRP3炎症体的活化机制及其与心血管疾病关系研究进展作一总结。

NLRP3炎症体与肠道疾病

Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症体是机体先天免疫的重要感受器,通过诱导炎症反应和细胞焦亡参与宿主免疫防御,并在维持肠道稳态方面发挥重要作用。近年来,NLRP3炎症体在放射性肠炎、炎症性肠病、结直肠癌和其他肠道疾病中的作用引起临床医生与科研人员的广泛关注。本文就NLRP3炎症体的激活机制和其在肠道疾病中的作用机制进行综述,旨在为临床治疗提供新的靶点与思路。

CUL1基因对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活和NLRP3炎症体通路的影响

目的:探究Cullin1(CUL1)基因对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞存活和核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎症体通路的影响。方法:(1)将SH-SY5Y细胞分为NC组、NC-sh组、CUL1-sh组、NC-OE组和CUL1-OE组。使用Lipofectamine 2000试剂对细胞转染相应的慢病毒。(2)将SH-SY5Y细胞分为Control组、MPP+组和MPP++CUL1-OE组。MPP+组和MPP++CUL1-OE组细胞使用1 mmol/L的MPP+处理48 h,Control组细胞正常培养。通过MTT法检测细胞增殖,通过Annexin V-FITC/PI双染色法和TUNEL染色法检测细胞凋亡,通过qRT-PCR检测CUL1的mRNA水平,通过Western blot检测CUL1、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、cleaved caspase-1、白细胞介素(IL)-1β和IL-18蛋白水平。通过ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平。结果:(1)与NC组和NC-sh组比较,CUL1-sh组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量降低,相对细胞活力降低,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率升高,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平升高(P<0.05)。与NC组和NC-OE组比较,CUL1-OE组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量升高,相对细胞活力升高,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率降低,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平降低(P<0.05)。(2)与Control组比较,MPP+组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量降低,相对细胞活力降低,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率升高,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平升高(P<0.05)。与MPP+组比较,MPP++CUL1-OE组CUL1的mRNA和蛋白相对表达量升高,相对细胞活力升高,Annexin V-FITC/PI阳性率和TUNEL阳性率降低,NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白相对表达量以及细胞培养上清液中IL-1β和IL-18水平降低(P<0.05)。结论:CUL1可能通过抑制NLRP3炎症体激活促进MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活。

破壁灵芝孢子粉调控NLRP3炎症体介导的焦亡对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

目的:探究破壁灵芝孢子粉(BSG)对阿尔茨海默病(AD)大鼠神经保护的作用及其机制。方法:腹腔注射D-半乳糖联合脑内注射Aβ25-25建立AD模型。40只SPF级SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、破壁灵芝孢子粉组(BSG组)、多奈哌齐组(DP组),每组10只。用药组连续灌胃给药28 d。新事物实验检测大鼠学习记忆能力;HE、电镜检测海马组织损伤情况;Western blot及RT-PCR分别检测相关蛋白及mRNA的表达。结果:与Model组比较,BSG组和DP组大鼠新事物实验RI值显著升高(P<0.05);海马神经元损伤显著减少(P<0.05);p-tau蛋白表达水平显著降低(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N蛋白和mRNA的表达水平显著降低(P<0.05)。结论:破壁灵芝孢子粉可能通过调控NLRP3炎症体的激活介导的细胞焦亡,降低相关炎症因子的表达,抑制tau蛋白过度磷酸化,发挥神经保护作用的。

龟甲提取物干扰NF-κB-NLRP3炎症体正反馈回路改善老年性骨质疏松的研究

目的:探讨龟甲提取物对NF-κB-NLRP3炎症体正反馈回路的调节作用及改善老年性骨质疏松的起效机制。方法:超高效液相联用质谱技术完成龟甲水提液中有效成分的鉴定。体外实验中,TRAP染色法检测龟甲提取物对骨髓源性巨噬细胞破骨分化的影响,使用NF-κB信号通路激动剂与抑制剂验证龟甲提取物对NF-κB信号通路的影响,使用NLRP3炎症体激动剂与抑制剂验证龟甲提取物对NLRP3炎症体活性的影响,RT-qPCR检测Nfatc1、Ctsk基因的表达量,Western Blot法检测p50、p-p50、NLRP3、IL-1β、pro-IL-1β的表达量。体内实验中,将6只3月龄C57BL/6小鼠作为对照组,12只22月龄自然衰老小鼠随机分为老年性骨质疏松模型组、龟甲提取物干预组,每组6只,连续干预8周。结果:筛选出龟甲水提液有效成分肉豆蔻酸。体外实验:与对照组比较,肉豆蔻酸显著抑制破骨分化(P<0.01),Nfatc1、Ctsk基因的表达量被显著抑制(P<0.05,P<0.01),p-p50、NLRP3、IL-1β、pro-IL-1β的表达量显著下调(P<0.01)。体内实验:与模型组比较,肉豆蔻酸有效提高骨体积分数(P<0.05),抑制骨髓腔中炎症体的表达量(P<0.01)。结论:龟甲提取物肉豆蔻酸改善老年性骨质疏松可能与干扰NF-κB-NLRP3炎症体正反馈回路,抑制破骨细胞形成相关。

对比剂激活NLRP3炎症体通路诱导肾小管上皮细胞凋亡

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）炎症体在对比剂所致肾小管上皮细胞凋亡过程中的作用及其相关机制。方法将传代培养的人肾小管上皮细胞（HK-2）随机分为5组：对照组（Con组）；碘海醇组（O组）；NLRP3基因沉默＋碘海醇组（si—NLRP3＋O组）；凋亡相关斑点样蛋白（ASC）基因沉默＋碘海醇组（si-ASC＋O组）；甘露醇组（M组）。将不同浓度的低渗对比剂碘海醇加入HK．2细胞培养皿中分别孵育24、48、72h。流式AnnexinV-FITC／PI双染法检测细胞凋亡；RT-PCR法检测细胞内NLRP3、ASCmRNA相对表达量；Western印迹法检测HK一2细胞内NLRP3、ASC、凋亡相关调控蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8（caspase-8）／活化型caspase-8（cleavedcaspase-8）、B细胞淋巴瘤2蛋白（Bcl-2）／Bcl-2相关X蛋白（Bax）、caspase-1／cleavedcaspase，1、caspase-3／cleavedcaspase-3蛋白相对表达量；ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素（IL）1β、IL-18水平。结果与对照组相比，碘海醇组HK-2细胞凋亡率升高；细胞内NLRP3、ASCmRNA相对表达量增多；NLRP3、ASC、cleavedcaspase-1蛋白相对表达量增多；细胞上清中IL-1β、IL-18含量升高（均P〈0．05）。提示碘海醇组HK-2细胞NLRP3炎症体被激活。与对照组相比，碘海醇组促凋亡蛋白cleavedcaspase-8、Bax、cleavedcaspase-3表达量增多；抗凋亡蛋白Bcl-2表达量降低（均P〈0．05）。与碘海醇组相比，si-NLRP3＋碘海醇组、si．ASC＋碘海醇组HK-2细胞凋亡率显著降低；cleavedcaspase-1表达量减少；促凋亡蛋白Bax、cleavedcaspase-3表达减少；抗凋亡蛋白Bcl-2表达量增多；细胞上清中IL-1β、IL-18含量降低（均P〈0．05）。结论对比剂可激活HK-2细胞中NLRP3通路，诱导细胞凋亡，阻断NLRP3通路可减轻细胞凋亡。

新疆哈萨克族高血压患者外周血单个核细胞炎症激活与NLRP3炎症体通路相关性研究

目的:探讨新疆哈萨克族高血压患者外周血单个核细胞激活与NLRP3炎症体通路的相关性。方法:随机选取2013-09-2014-02新疆医科大学第一附属医院高血压科门诊首次就诊且未经降压药物治疗的新疆哈萨克族高血压患者30例,年龄(54.2±5.7)岁,选取同期同民族健康体检者30例,年龄(53.7±5.4)岁,两组男女比例均为1∶1。采集两组受试者外周血并分别提取血浆和单个核细胞,采用ELISA法检测血浆白细胞介素(IL)-1β和IL-18含量;使用荧光定量RT-PCR检测单个核细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18mRNA相对表达水平;运用Western blot法检测单个核细胞中NLRP3和Caspase-1蛋白的相对表达量。结果:两组受试者基线资料差异无统计学意义(P>0.05);与健康对照组相比,高血压组血浆IL-1β和IL-18水平明显升高(P<0.05);外周血单个核细胞层NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA相对表达量均高于对照组(P<0.05);NLRP3和Caspase-1蛋白的表达量也较对照组增高(P<0.05)。结论:新疆哈萨克族高血压患者外周血单个核细胞处于一定程度的炎症激活状态,且该炎症反应可能与NLRP3炎症体及其下游相关细胞因子的表达增多有关。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症体在眼科疾病中的研究进展

多种疾病的发生发展均与慢性低度炎症反应有关,其中免疫异常起重要作用。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症体作为固有免疫系统的重要组成成分,已被证实在糖尿病、冠状动脉粥样硬化性心脏病、风湿免疫疾病及肿瘤等多种疾病中发挥重要作用。NLRP3炎症体可被多种代谢信号激活,进而引起caspase-1的活化,最终导致细胞释放IL^(-1)β和IL^(-1)8,诱发炎症级联反应,引发组织损伤。近来多项研究表明,NLRP3炎症体可能成为多种疾病新的治疗靶点。本文将对NLRP3炎症体的活化与调控机制及其在年龄相关性黄斑变性、角膜炎、葡萄膜炎、青光眼、干眼症、糖尿病视网膜病变及缺血再灌注损伤等眼科疾病中的研究进展及相关治疗前景进行综述。

NLRP3炎症体激活参与庆大霉素所致大鼠急性肾损伤

目的探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症体在庆大霉素所致急性肾损伤中的作用。方法 SD大鼠分为对照组、模型组和抑制剂组,模型组大鼠皮下注射庆大霉素400 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续注射2 d,建立庆大霉素中毒性急性肾损伤动物模型,抑制剂组在注射庆大霉素之前30 min给予NLRP3抑制剂格列本脲500 mg/kg。相关试剂盒检测3组大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的水平,Western印迹检测NLRP3炎症体相关蛋白NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)的表达。结果模型组的大鼠血清BUN、Cr水平较对照组显著增高,NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达水平也显著增强,NLRP3抑制剂能显著减弱模型组的大鼠血清BUN、Cr水平的上升以及NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达。结论庆大霉素所致大鼠急性肾损伤的机制与NLRP3炎症体的激活有关。