清肠温中方对溃疡性结肠炎小鼠NLRP6/IL-18/MUC2轴及肠道黏液屏障的影响

目的研究清肠温中方对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠NLRP6/IL-18/MUC2轴及肠道黏液屏障的影响及作用机制。方法24只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、清肠温中方组和美沙拉嗪组,每组6只。空白组自由饮用去离子水,模型组、清肠温中方组和美沙拉嗪组自由饮用3%DSS溶液制备UC模型。造模7 d后,清肠温中方组、美沙拉嗪组予相应药液灌胃,空白组、模型组予去离子水灌胃,连续7 d。每日称量小鼠体质量,记录小鼠疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理变化,AB-PAS染色观察结肠组织杯状细胞情况,Western blot检测结肠组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白6(NLRP6)、白细胞介素(IL)-18蛋白表达,免疫荧光染色检测结肠组织黏蛋白2(MUC2)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量下降,DAI评分显著升高(P<0.01),结肠长度显著缩短(P<0.01),结肠组织黏膜屏障破坏,杯状细胞数量减少,黏液分泌减少;结肠组织NLRP6、MUC2蛋白表达显著降低(P<0.01),IL-18蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,清肠温中方组小鼠体质量增加,DAI评分显著降低(P<0.01),结肠长度显著增加(P<0.05);结肠黏膜损伤减轻,炎性细胞浸润减少,杯状细胞数量增多;结肠组织NLRP6、MUC2蛋白表达显著升高(P<0.01),IL-18蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论清肠温中方能明显缓解UC小鼠疾病活动度,降低DAI评分,修复结肠组织病理损伤,增加杯状细胞数量,促进黏液分泌,其作用机制可能与调节NLRP6/IL-18/MUC2轴,修复肠道黏液屏障有关。

夏季和冬季大气PM2.5水溶性颗粒物与总颗粒物对BEAS-2B细胞活性与炎症的影响

目的探讨夏季与冬季的大气颗粒物PM2.5水溶性成分与总颗粒物对BEAS-2B细胞的细胞活性与炎症的影响。方法将夏季和冬季采集的PM2.5分别提取水溶性成分与总颗粒物,得到4种PM2.5组分,使用CCK-8法检测25、50、100、200、400μg/ml PM2.5暴露细胞后的细胞活性;以100μg/ml PM2.5处理细胞12、24、48 h后提取RNA,用qRT-PCR技术检测IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8炎症因子与炎症小体NLRP3及caspase-1、IL-18的水平。结果夏季和冬季PM2.5的水溶性成分与总颗粒物分别处理细胞12 h后,部分剂量组细胞活性升高,随着PM2.5暴露时间的增加,细胞活性逐渐得到抑制,差异具有统计学意义(P<0.05)。100μg/ml的PM2.5处理细胞后,IL-1α和IL-1β表达水平高于IL-6和IL-8;炎症小体NLRP3、caspase-1和IL-18在100μg/ml的PM2.5处理24、48 h后也呈现升高趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论夏季和冬季PM2.5水溶性成分与总颗粒物可以抑制细胞活性,并且促使细胞炎症发生,冬季总颗粒物对细胞活性与炎症的影响更明显。