PDCD4沉默通过调控NLRP3/NLRP6炎症小体的平衡来减轻视网膜缺血再灌注损伤后的神经炎症反应

目的探究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)通过含NOD样受体家族Pyrin域蛋白(NLRP)3/NLRP6信号通路活性对视网膜缺血再灌注(RIR)损伤后神经炎症反应的抑制作用及机制。方法选取50只SD大鼠作为研究对象,根据不同处理方式,分为Sham组(空白对照组)、RIR模型组、MCC950组(NLRP3/NLRP6抑制组)、si-PDCD4组(PDCD4沉默组)、si-PDCD4+MCC950组(PDCD4沉默+NLRP3/NLRP6抑制组),每组10只大鼠。除去空白对照组大鼠外,剩余大鼠均构建RIR损伤模型,并进行相应处理;Western-blot检测视网膜组织内PDCD4、NLRP3、NLRP6、天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、抗坏血酸过氧化物酶(ASC)表达水平;苏木精-伊红(HE)染色分析视网膜组织病理变化;终端尿苷酸核苷酸末端标记法检测视网膜组织细胞凋亡能力;酶联免疫吸附试验检测大鼠眼球血、视网膜组织内炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-18、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;Western-blot检测视网膜组织内细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3表达水平。结果与Sham组比较,RIR模型组PDCD4、NLRP3、NLRP6、Caspase-1、ASC、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平及细胞凋亡指数(AI)均升高,Bcl-2表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与RIR模型组比较,MCC950组、si-PDCD4组大鼠NLRP3、NLRP6、Caspase-1、ASC、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平及AI均降低,Bcl-2表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与si-PDCD4组及MCC950组比较,si-PDCD4+MCC950组PDCD4、NLRP3、NLRP6、Caspase-1、ASC、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平及AI进一步降低,Bcl-2表达水平进一步升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PDCD4沉默具有减轻RIR病理损伤,抑制视网膜细胞凋亡的作用,其分子机制可能与抑制NLRP3/NLRP6炎症小体诱导神经炎症反应有关。

NLRP6炎症小体与肠道微生态研究进展

NLRP6炎症小体作为炎症反应的核心识别环节,由PRRs、ASC、Caspase三部分组成,可激活下游IL-1β、IL-18等炎症分子。肠道微生态主要由肠道内结构复杂的微生物、种类繁多的代谢物和肠道黏膜屏障组成,参与机体多种重要生命功能,与多种疾病发生发展密切相关。NLRP6炎症小体广泛分布于肠道组织中,可识别肠道内多种危险信号,进而与众多下游信号通路关联,调控肠道内微生物组成和肠道黏膜屏障,从而调控疾病进展。此外,肠道微生物菌群或其代谢产物可直接激活NLRP6炎症小体,也可通过肠-肝循环刺激肝脏内NLRP6炎症小体,对维持肠道微生态平衡及宿主-微生物相互作用至关重要。基于NLRP6炎症小体与肠道微生态之间的相互调控机制,靶向NLRP6炎症小体调节肠道微生态失衡,成为与肠道微生态失衡相关疾病治疗的新思路。文章就NLRP6炎症小体的组成、分布与激活,NLRP6炎症小体与肠道微生物、代谢产物、肠道黏膜屏障相互调控机制进行综述,为临床治疗肠道微生态失衡相关疾病提供更多研究思路。

NLRP6炎症小体在肝脏疾病中作用研究进展

核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)是一类模式识别受体,其中NLRP6是NLR家族新成员。NLRP6炎症小体在炎性反应、维持肠道微生态、调控病毒感染中有重要作用,参与酒精性肝病、肝细胞癌及脓毒症肝损伤等肝脏疾病的发生、发展。本文就NLRP6炎症小体的结构、功能、激活机制及其在肝脏疾病中作用的研究进展作一综述。

长双歧杆菌抑制回肠NLRP6炎症小体调节感染后肠易激综合征内脏高敏感性

[目的]研究NLRP6炎症小体在长双歧杆菌调节感染后肠易激综合征(PI-IBS)内脏高敏感性中的作用。[方法]NIH小鼠40只分为5组(每组8只):2周正常对照组(NC-2W组),感染后2周组(PI-2W组),8周正常对照组(NC-8W组),感染后8周组(PI-8W组)及感染后8周长双歧杆菌干预组(PI-B组);腹壁回撤反射(AWR)检测各组内脏敏感性,Western-blot检测CD172a以评价肠道炎症程度,Western-blot检测各组小鼠末端回肠NLRP6及其配体ASC、caspase-1、CARD8以及下游细胞因子白细胞介素(IL)-18、IL-1β表达。[结果]1PI-2W组和PI-8W组内脏敏感性较NC-2W组和NC-8W组明显增加(P<0.05),PI-B组内脏敏感性较PI-8W组明显降低(P<0.05);2PI-2W组与NC-2W组比较,CD172a表达水平显著升高(P<0.01);PI-8W组与NC-8W组比较,CD172a表达水平差异无统计学意义(P>0.05);PI-B组与PI-8W组比较,CD172a表达水平差异无统计学意义(P>0.05);3 PI-2W组和PI-8W组NLRP6、CARD8、ASC和caspase-1及IL-18均较NC-2W组和NC-8W组明显增加(P<0.05),而PI-B组NLRP6、CARD8、ASC和caspase-1及IL-18较PI-8W组明显降低(P<0.05),PI-2W组IL-1β表达水平较NC-2W组显著升高(P<0.05),而NC-2W组、NC-8W组、PI-8W组、PI-B组间IL-1β表达水平比较均差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]长双歧杆菌可能通过抑制炎症小体NLRP6,下调IL-18,从而降低PI-IBS内脏高敏感性。