NLRX1基因变异对肝细胞抗乙型肝炎病毒感染能力影响的研究

目的本研究旨在研究NLRX1基因变异(NLRX1 p.Arg 707 Cys)对肝细胞抗乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染能力的影响.方法选用LV003慢病毒构建稳定过表达NTCP的Huh7细胞株.采用质粒转染的方法,构建NLRX1野生型(wild type,WT)及突变型(mutant type,MT)过表达的Huh7-NTCP细胞株.对感染HBV的Huh7-NTCP细胞进行检测,验证WT和MT对HBV感染性的影响,通过免疫组化和western blot检测HBsAg和HBcAg,并通过qPCR检测HBV DNA和HBV cccDNA水平,通过qPCR检测细胞内IFN-α、IFN-β、IL-6的表达水平.结果细胞实验证实,NLRX1 WT组和MT组的HBsAg、HBcAg、HBV cccDNA和HBV DNA水平高于对照组;而NLRX1 MT组的上述指标低于NLRX1 WT组.MAVS-RLRs信号通路介导的最终产物IFN-α、IFN-β、IL-6的表达水平也与以上结果呈一致性.结论NLRX1是一种抑制肝细胞抗HBV能力的调控因子,其编码的基因变异NLRX1 p.Arg707Cys会消弱该调控作用.