乳腺癌中bcl-2与nm23-h1基因表达情况及其临床意义

目的:探讨bcl-2与nm23-h1基因在乳腺癌中的表达情况及其相关性,并探讨其潜在临床意义。方法:采用免疫组化SP法观察85例乳腺癌手术切除标本及正常乳腺组织石蜡切片中bcl-2和nm23-h1的表达,并进行分析。结果:63.53%(54/85)肿瘤呈bcl-2阳性表达,bcl-2表达与肿瘤淋巴结转移及TNM分期有关(P值均<0.05)。40.00%(34/85)肿瘤呈nm23-h1阴性表达,nm23-h1阴性表达与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期有关(P值分别为0.032、0.001和0.001)。单因素分析显示:bcl-2与nm23-h1表达为影响癌细胞淋巴转移的主要因素(OR值分别为6.985、0.014,P<0.001)。结论:bcl-2基因高表达与nm23-h1基因的低表达可能与乳腺癌的发生、转移密切相关,其联合检测可作为判断乳癌患者预后及指导制定治疗方案的手段之一。

子宫内膜异位症中nm23-H1基因表达的意义

目的:探讨nm23-H1基因在子宫内膜异位症发生中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测25例子宫内膜异位症和22例正常子宫内膜组织中nm23-H1的蛋白表达情况;采用RT-PCR检测研究33例子宫内膜异位症的异位子宫内膜组织和30例正常子宫内膜组织中nm23-H1基因的mRNA表达情况。结果:25例子宫内膜异位症组中,nm23-H1的蛋白表达缺失为3例、弱阳性12例、强阳性10例,对照组中nm23-H1的蛋白表达缺失为0例、弱阳性3例、强阳性19例,两组差异显著(P<0.01)。33例子宫内膜异位症组中nm23-H1mRNA表达缺失为4例、弱表达15例、强表达14例,30例对照组中,nm23-H1的mRNA表达缺失为1例、弱表达6例、强表达23例,子宫内膜异位症组明显低于正常对照组(P<0.05)。结论:nm23-H1在子宫内膜异位症的发病过程中可能起重要的作用,进一步明确nm23-H1基因在子宫内膜异位症发生中的作用及其作用机制,对了解子宫内膜异位症的发病机制、临床诊断和治疗可能有一定意义。

nm23-H1基因表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及与临床病理关系的研究

目的:探讨nm23-H1基因稳定表达对人宫颈细胞增殖能力的影响,及其表达与临床特点的关系。方法:用免疫组织化学法检测nm23-H1基因在宫颈癌组织的表达。将真核表达载体pcDNA3.1-nm23-H1转染入宫颈癌细胞系HeLa、SiHa,G418稳定筛选,用Western印迹法、免疫组化法鉴定转染前后细胞中nm23-H1基因的蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测转染前后细胞体外增殖能力的变化。结果:在宫颈鳞癌组织中,nm23-H1基因阳性表达率随FIGO临床分期的升高有下降趋势,Ⅲ期nm23-H1阳性表达率明显低于Ⅱ期,Ⅱ期阳性表达率明显低于I期(P<0.01);分化程度高的组织阳性表达率显著高于分化程度低的组织(P<0.01);有淋巴结转移者其原发灶阳性表达率明显低于无淋巴结转移者(P<0.01)。宫颈腺癌组织中nm23-H1基因阳性表达率与FIGO临床分期,分化程度,淋巴结转移均无明显的相关性(P>0.05)。在pcDNA3.1-nm23-H1转染组中,Si-Ha、HeLa细胞nm23-H1蛋白表达水平明显增加,未转染组和空载体对照组未见nm23-H1高表达。MTT法所绘生长曲线显示,SiHa-nm23(转染组)细胞与SiHa-3.1(空载体组)、SiHa(空白组)细胞比较,生长速度明显抑制,差异均有统计学意义(P<0.01),而HeLa(空白组)、HeLa-nm23(转染组)、HeLa-3.1(空载体组)三组细胞生长速度均无明显变化(P>0.05)。结论:nm23-H1参与了宫颈鳞癌的发生、发展过程,是判断宫颈鳞癌淋巴结转移和预后的重要标志物,而nm23-H1基因对不同宫颈癌细胞体外增殖能力的影响有明显差异。

nm23-H1基因表达与乳腺癌侵袭转移的关系

目的 :探讨肿瘤抑制基因 (nm2 3- H1)的表达与乳腺癌浸润转移的关系。方法 :采用免疫组织化学及反转录 -多聚酶链反应 (RT- PCR)方法对 30例乳腺癌及 10例乳腺良性肿瘤中 nm2 3- H1基因产物的表达进行研究。结果 :nm2 3- H1在乳腺癌组织中的表达明显高于良性组织 ;早期乳腺癌 (I～ II期 ) nm2 3- H1阳性表达率明显高于中晚期乳腺癌 ( ～ ) ,有淋巴结转移的乳腺癌组织中 nm2 3- H1阳性表达率显著低于无淋巴结转移者 ;nm2 3- H1的表达与乳腺癌的病理类型无关。结论 :nm2 3- H1异常表达可能是乳腺癌浸润转移的重要分子学标志 ;检测乳腺癌组织中 nm2 3- H1的表达 。

食管鳞癌中bcl-2与nm23-h1基因表达情况与纵隔淋巴结转移的相关研究

目的:研究与探讨bcl-2基因与nm23-h1基因在食管鳞状细胞癌中的表达情况及其与纵隔淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组化SP法观察了85例食管鳞癌手术切除标本切片中bcl-2和nm23-h1的表达。结果:63.53%(54/85)肿瘤呈bcl-2阳性表达,bcl-2表达与肿瘤淋巴结转移及TNM分期有关(P均<0.05)。40%(34/85)肿瘤呈nm23阴性表达,nm23-h1阴性表达与肿瘤侵润深度、淋巴结转移、TNM分期有关(P分别为0.032、0.001、0.001)。单因素分析显示:bcl-2基因与nm23-h1基因表达为影响淋巴结转移的主要因素(OR值分别为6.985、0.014,P<0.001)。而其他临床病理学参数与淋巴结转移之间未见明显相关(P均>0.05)。bcl-2基因与nm23-h1基因表达之间呈负相关(rs=-0.3849,P<0.05),在促进肿瘤的进展和转移过程中起联合作用。结论:bcl-2基因与nm23-h1基因联合测定是判断食管鳞癌患者淋巴结转移倾向及预后的一个重要手段。

P53,C-erbB2,rasP21,nm23-H1基因表达与大肠癌淋巴结转移的关系

目的探讨大肠癌组织中癌基因和抑癌基因在大肠癌淋巴转移中的作用。方法利用免疫组化方法(SP法)检测大肠癌组织中癌基因和抑癌基因。结果224例大肠癌患者中,淋巴结的转移率随分化程度降低而增高;随癌组织浸润深度增加,淋巴结的转移率明显提高;淋巴结转移的阳性率还随癌基因及其产物P53、C-erbB2、rasP21的出现而增加,而随nm23-H1的表达而降低。结论癌基因、抑癌基因的检测将有助于研究肿瘤淋巴转移的原因和机制,并对淋巴转移进行预测。

电离辐射对人肺非小细胞癌细胞株H446 nm23-H1基因表达的影响

目的：探讨电离辐射对人肺非小细胞癌细胞株H446 nm23-H1基因表达的影响。方法：取对数生长期的H446细胞置^60Co放射治疗机上单次照射，照射剂量分别为0、1、2．3、4和5Gy，继续培养至0、6、24和48h后收集细胞，提取细胞总RNA和总蛋白。分别用RT-PCR和Western Not检测nm23-H1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果：照射后各剂量组nm23-H1 mRNA和蛋白的表达量均明显降低（P〈0．01），与剂量之间呈负相关（P〈0．05），相关系数r分别≥0．785和≥0．66；mRNA的表达水平在0～24h内随培养时间延长逐渐增加，48h时有所降低。蛋白表达在0～6h内没有明显变化，24h达到高点，48h有所降低。结论：电离辐射对H446细胞nm23-H1基因表达有一定的影响，随着辐射剂量的增大该基因mRNA和蛋白表达水平逐渐降低，并且在所有观察时间点均显示出一定的剂量效应关系。

RTQ-PCR检测鼻咽癌组织中nm23-H1基因表达研究

目的:建立实时荧光定量RTQ-PCR方法检测鼻咽癌患者组织中nm23-H1 mRNA的表达,探讨nm23-H 1mRNA的表达与鼻咽癌发生发展关系。方法:用TRIZOL方法提取鼻咽癌组织总RNA后,将其反转录为cDNA,以实时荧光定量RTQ-PCR方法检测人鼻咽癌nm23-H 1mRNA。结果:nm23-H1 mRNA在鼻咽癌组织中表达低于慢性鼻咽炎患者,在转移性鼻咽癌组织中nm23-H1 mRNA表达也低于非转移的鼻咽癌患者,二组结果比较均具有显著性差异。结论:实时荧光定量RTQ-PCR法用于检测人鼻咽癌nm23-H1 mRNA的表达是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测方法,nm23-H1mRNA基因表达水平可能与鼻咽癌发生发展和肿瘤转移有关。

p16和nm23-H1基因表达与胃癌及淋巴结转移的关系

目的:进一步评估p16和nm23鄄H1基因表达在胃癌中的作用,尤其是与肿瘤淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测p16和nm23鄄H1基因蛋白在46例原发性胃癌及69枚转移淋巴结中的表达,探索二者表达与胃癌临床病理特征的关系,评估二者作为预测肿瘤转移和临床预后的生物学指标的可能性。结果:p16和nm23鄄H1基因蛋白表达在原发性胃癌中的阳性率分别为17.4%和28.3%,在转移淋巴结中的阳性率分别为15.9%和14.5%。p16表达在伴和不伴淋巴结转移的原发性胃癌中差异显著(P<0.05)。nm23鄄H1在乳头状腺癌中呈明显高表达。p16和nm23鄄H1蛋白表达在原发性胃癌及转移淋巴结中无相关关系。结论:胃癌组织和转移淋巴结中存在p16和nm23鄄H1基因蛋白频繁缺失;p16阳性表达的病人淋巴结转移机会降低;nm23鄄H1基因蛋白表达率在乳头状腺癌中明显高于其他组织学类型;nm23鄄H1表达与胃癌淋巴结转移无关;p16和nm23鄄H1表达调节似无关联,同时检测p16和nm23鄄H1表达不比单纯检测p16表达具有更高预测胃癌淋巴结转移的价值。

食管癌中P53与nm23-H1基因表达的临床意义

目的探讨P53与nm23-H1基因表达产物与食管癌临床病理及预后的关系。方法应用免疫组化S-P法测定39例食管癌标本P53与nm23-H1基因的表达产物,并对全部病例术后随访3年。结果食管癌中P53的高表达和nm23-H1的低表达与食管癌的浸润深度、临床TNM分期及预后相关(P<0.05),nm23-H1的低表达与食管癌的淋巴结转移相关(P<0.05)。P53与nm23-H1低表达者预后不良(P<0.05)。结论P53与nm23-H1在食管癌中的不同表达与食管癌的浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及预后相关,可为临床评估预后提供重要的参考指标。

siRNA抑制nm23-H1基因表达对鼻咽癌6-10B细胞生物学行为的影响

目的:采用RNA干扰技术下调nm23-H1基因在鼻咽癌6-10B细胞中的表达,探讨nm23-H1表达下调对6-10B细胞生物学行为的影响。方法:采用脂质体法将nm23-H1基因siRNA(nm23-H1 siRNA)瞬间转染6-10B细胞,Western印迹检测转染细胞中nm23-H1蛋白的表达水平,然后利用MTT法、流式细胞术和Transwell小室实验分别检测转染6-10B细胞的增殖、细胞周期和体外迁移侵袭等生物学行为的变化;测序检测6-10B细胞nm23-H1基因有无S120G点突变。结果:nm23-H1 siRNA有效地下调nm23-H1基因的表达,nm23-H1 siRNA转染6-10B细胞的增殖能力增强,S期细胞增多,体外迁移和侵袭能力增强(P<0.05)。6-10B细胞nm23-H1基因无S120G点突变。结论:nm23-H1基因具有抑制人鼻咽癌细胞6-10B增殖和体外迁移侵袭的作用。

Nm23-H1基因表达与非小细胞肺癌转移的关系

目的 探讨nm2 3 H1基因表达与非小细胞肺癌 (NSCLC)转移的关系。方法 应用免疫组织化学SABC方法对 90例NSCLC组织标本进行nm2 3 H1表达的检测。结果 NSCLC的nm2 3 H1阳性表达率 5 1 1% (46 / 90 ) ,和NSCLC不同组织学类型、病理分级、PTNM分期、性别、年龄及远处转移无关 (P >0 0 5 ) ;nm2 3 H1的阳性表达与淋巴结转移呈负相关 (P <0 0 1) ,与NSCLC患者术后生存期呈正相关 (P <0 0 5 )。结论 nm2 3

垂体腺瘤nm23-H1基因表达与侵袭性关系探讨

目的探讨垂体腺瘤ｎｍ２３Ｈ１基因表达与侵袭性的关系。方法采用免疫组织化学染色（ＳＰ法）对６２例垂体腺瘤和１１例正常垂体腺组织ｎｍ２３Ｈ１基因表达进行回顾性研究。结果侵袭型垂体腺瘤ｎｍ２３Ｈ１基因表达水平显著低于非侵袭型垂体腺瘤和正常垂体腺组织（Ｐ＞００１）；而后两者间则无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；Ⅲ、Ⅳ级垂体腺瘤ｎｍ２３Ｈ１基因表达水平显著低于Ⅰ、Ⅱ级（Ｐ＜００５）；ｎｍ２３Ｈ１基因表达水平与垂体腺瘤患者的性别、年龄及肿瘤分泌功能无显著相关性（Ｐ＞００５）。结论ｎｍ２３Ｈ１基因可能在垂体腺瘤的侵袭过程中起重要作用。

nm23-H1基因表达与胃癌生物学行为的关系

目的 :探讨nm2 3 H1基因表达与胃癌生物学行为的关系。方法 :应用原位杂交 (ISH)及免疫组织化学技术 ,检测nm2 3 H1在 2 7例胃癌及相应的胃正常粘膜组织中mRNA和蛋白的表达。结果 :nm2 3 H1mRNA及蛋白在胃癌及相应的正常组织中的表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。在有淋巴结转移的胃癌中nm2 3 H1mRNA表达显著低于无淋巴结转移组(P <0 .0 1) ;nm2 3 H1蛋白在有淋巴结转移的胃癌中表达阳性率为 2 6 .8% ,显著低于在无淋巴结转移的胃癌中表达阳性率83 % (P <0 .0 5 )。nm2 3 H1mRNA及蛋白在有浆膜浸润 (T3、T4 )胃癌中的表达显著低于无浆膜浸润 (T1、T2 )的胃癌 (P <0 .0 5 )。结论 :nm2 3

nm23-H1基因表达及突变与肝癌转移的关系

目的研究nm23-H1基因的表达及突变和原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）发展和转移的关系。方法应用逆转录PCR（RT—PCR）和逆转录PCR-单链构象多态法（RT-PCRSSCP）对30例肝癌组织、30例癌旁组织和8例良性病变肝组织中nm23-H1基因表达和基因突变情况进行检测。结果nm23-H1基因在肝癌组织、癌旁组织、良性病变组织中的表达水平分别为1．62±0．41、1．30±0．30和1．25±0．36。肝癌组织中nm23-H1基因的表达水平明显高于癌旁组织（P〈0．05）和良性病变肝组织（P〈0．01）；低分化肝癌组织中nm23-H1基因表达水平低于高、中分化肝癌组织中nm23-H1基因表达水平（P〈0．05）；有卫星转移灶和无卫星灶的肝癌组织中nm23-H1基因表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）；30例肝癌组织及相应的癌旁组织中未发现nm23-H1 cDNA基因突变。结论nm23-H1基因表达水平增高与肝癌的转移有密切关系，nm23-H1基因的异常表达是HCC转移中的频发事件而与基因突变无关。

胃癌细胞周期和nm23-H1基因表达与淋巴结转移的关系

目的:探讨胃癌组织nm23- H1 基因表达与细胞周期及其淋巴转移的关系。方法:收集手术切除正常胃黏膜及胃癌组织标本各28 例,采用流式细胞技术进行细胞周期分析及nm23 -H1蛋白半定量检测。结果:细胞周期分析显示正常胃黏膜组织均为二倍体;28例胃癌组织中有18 例为异倍体,14/18例(77.78%)异倍体瘤中有发生淋巴结转移,10 例非异倍体瘤中仅有3 例出现淋巴结转移(30%),两者比较有显著性差异(P<0.05)。正常胃粘膜组织增殖指数(PI)为2.04%,胃癌组织PI为12.69%±6.78%。其中淋巴结转移阳性组胃癌组织PI为14.86%±8.41%,显著高于淋巴结转移阴性组胃癌组织(PI为10.51%±4.89%)(P<0.05)。正常胃粘膜组织nm23 基因表达为阴性,胃癌组织nm23 基因表达(FI)为0.73±0.36,其中淋巴结转移阳性组FI 为0.42±0.24,淋巴结转移阴性FI 为1.04±0.17,两者比较有显著性差异(P< 0.05)。非异倍体组胃癌nm23基因表达(FI)为1.01±0.21,显著高于异倍体组胃癌(FI为0.45±0.29)(P<0.05)。结论:胃癌淋巴转移与胃癌组织的异倍性、高增殖活性及nm23 H1基因表达缺失有关。

乳腺癌组织中p53、nm23-H1基因表达及其与绝经状态、淋巴结转移的相关性

[目的]研究乳腺癌患者中p53和nm23-H1基因表达,及其与绝经状态及腋窝淋巴结转移的关系。[方法]采用免疫组织化学SP方法检测60例乳腺癌组织中p53和nm23-H1的表达。[结果]60例乳腺癌患者中,p53和nm23-H1的阳性表达率分别为73.3%(44/60)和66.7%(40/60);在绝经前患者中p53和nm23-H1的阳性表达率分别为66.7%(16/24)和50.0%(12/24),而在绝经后患者中两者的阳性表达率分别为77.8%(28/36)和77.8%(28/36)。在绝经后患者中p53和nm23-H1基因的阳性表达与腋窝淋巴转移呈显著性相关(P=0.019和P=0.019)。[结论]p53可能参与绝经前妇女乳腺癌的发生,可能促进绝经后乳腺癌的转移;而nm23-H1可能参与绝经后乳腺癌的转移。

癌组织nm23-H1基因表达对胃肠道癌浸润与转移的影响及意义

目的通过检测、分析癌组织中nm23-H1基因表达,探讨nm23-Ht对胃肠道癌浸润、转移的影响及临床意义.方法应用免疫组化技术检测62例胃肠道癌术后标本nm23-H1基因的蛋白表达,采用x2检验进行统计学分析.结果nm23-H1在胃肠道癌组织中的阳性表达率为62.9%(39/62),Ⅰ+Ⅱ与Ⅲ+Ⅳ患者之间nm23-H1的阳性表达有显著性差异(P＜0.05).nm23-H1的表达与局部淋巴结转移呈负相关(P＜0.01).在高分化组nm23-H1的表达明显降低(P＜0.05),与癌栓的形成无关(P＞0.05).结论癌组织中nm23-H1基因的蛋白表达增强或减弱可能与胃肠道肿瘤转移有内在联系;可通过调控癌细胞的转移潜能,影响胃肠道癌浸润和淋巴结转移;可作为胃肠道肿瘤判断预后的指标,指导临床正确综合治疗.

Nm23-H1/NDPK-A基因在大肠杆菌中的高效表达及产物纯化的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增人二磷酸核苷激酶Ａ亚基（ＮＤＰＫ－Ａ）基因，即ｎｍ２３－Ｈ１／ＮＤＰＫ－Ｋ基因的编码序列，经序列分析后，定向克隆于表达质粒载体ｐＢＶ２２０，在大肠杆菌ＤＨ５α中高效表达出重组人ＮＤＰＫ－Ａ．表达产物为可溶性的非融合蛋白，占菌体总蛋白４２％．斑点ＥＬＩＳＡ法鉴定表明表达产物与ＮＤＰＫ－Ａ标准抗血清呈阳性反应．以ＤＥＡＥ纤维素弱阴离子交换层析、ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅ染料亲和层析结合高效液相排阻色谱技术纯化ｒＮＤＰＫ－Ａ，得纯度为９６．７％的目标蛋白．以反相高效液相色谱法进行酶活性分析，表明纯化的ｒＮＤＰＫ－Ａ能催化ＡＴＰ＋ＵＤＰ＝ＡＤＰ＋ＵＴＰ的反应，比活性为８００Ｕ／ｍｇ蛋白．