D-丝氨酸对大鼠小脑NMDA受体/NO/cGMP神经通路的调节作用

目的 :研究 D-丝氨酸对大鼠小脑 NMDA受体 /NO/c GMP神经通路的调节作用。方法 :采用清醒大鼠脑微透析技术 ,应用放免方法测定小脑透析液中 c GMP含量。结果 :小脑内局部灌流 NMDA可明显提高细胞外 c GMP水平。NMDA受体通道阻断剂 MK-80 1可明显对抗 NMDA引起的 c GMP反应。单独应用 NMDA对基础的 c GMP水平没有影响。D-丝氨酸可剂量依赖性加强NMDA2 0 0 μmol.L- 1 引起的 c GMP增加作用。单独应用 D-丝氨酸对基础的c GMP水平没有影响。结论 :说明内源性兴奋氨基酸对 NMDA受体激活作用很弱。也说明在小脑 NMDA受体的甘氨酸部位并没有完全饱和 ,应用选择性的甘氨酸部位的激活剂 D-丝氨酸可以调解 NMDA受体复合物的功能。

氟中毒大鼠脑组织中NMDA受体及内质网应激相关通路蛋白的表达

背景:前期研究发现N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDA)受体与氟相关,但其在氟诱导的内质网应激中的作用尚不明确。目的:观察实验性氟中毒大鼠脑组织中兴奋性神经递质NMDA受体及内质网应激IRE1α-ASK1-JNK通路蛋白表达变化,并应用NMDA受体抑制剂干预SH-SY5Y细胞,探讨氟中毒神经系统损伤的发病机制。方法:(1)动物模型:18只1月龄SD大鼠随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L),每组6只,雌雄各半。饮水摄氟饲养6个月后,观察大鼠氟斑牙发生情况,测定24 h尿氟含量;大鼠麻醉处死后取脑组织观察组织病理变化,蛋白印迹法检测脑组织中NMDA受体及IRE1α、ASK1、JNK蛋白表达。(2)细胞模型:体外培养SH-SY5Y细胞,选择终浓度为0.3 mmol/L和3 mmol/L的氟化钠染氟处理,并用10μmol/L的NMDA受体拮抗剂Ifenprodil、MK-801对染氟细胞进行干预,观察相关蛋白改变。结果与结论:(1)高氟组大鼠氟斑牙发生率、尿氟水平显著高于对照组和低氟组(P<0.05);(2)与对照组相比,低氟组大鼠海马CA3区神经细胞胞质嗜碱性略增加,高氟组CA3区神经细胞排列紊乱,嗜碱性增加,部分细胞核固缩;(3)大鼠脑组织内,高氟组NR2A与低氟组NR2B的蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟组NR2B、IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组和低氟组(P<0.05);(4)SH-SY5Y细胞内,高氟组NR1、NR2A、NR2B蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组NR1、NR2A蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组NR2B蛋白表达也明显低于高氟组(P<0.05);(5)SH-SY5Y细胞内,高氟组IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组ASK1、p-JNK蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组IRE1蛋白水平也明显低于高氟组(P<0.05);(6)提示:过量氟摄入可激活中枢神经系统NMDA受体,引起内质网应激IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白表达增加,使用NMDA受体抑制剂对氟中毒所致内质网应激具有一定缓解作用。

NMDA受体与α_(2)肾上腺素受体参与神经精神疾病的分子机制研究进展

谷氨酸与去甲肾上腺素及其对应受体分别构成谷氨酸能系统和去甲肾上腺素能系统,二者在多种神经精神疾病过程中发挥重要作用,并且存在密切对话。该文回顾了高级中枢神经系统中谷氨酸受体——N-甲基-D-天冬氨酸受体(Nmethyl-D-aspartate receptor,NMDA-R)和肾上腺素受体——α_(2)肾上腺素受体(alpha 2 adrenergic receptor,α_(2)-AR)参与神经精神疾病的具体分子机制,以及二者可能的对话机制,对深入认识两种受体相关神经精神疾病的神经生物学机制、药物研发和优化临床治疗方案具有重要意义。

1例抗NMDA受体脑炎合并自身免疫性多腺综合征病人的护理

总结1例抗NMDA(N-methyl-D aspartate)受体脑炎合并自身免疫性多腺综合征病人的护理。护理要点包括:重视两种疾病的相互影响,为病人实行个体化的血糖管理方案,加强低血糖的防范与处理;为病人提供充足的肠内营养支持并做好营养管道的维护;根据病人疾病的临床表现做好自主神经功能障碍的护理,安全规范地应用镇静药物;组建多学科团队早期开展康复治疗,促进病人功能恢复。经过83 d的治疗和护理,病人病情好转至下级医院继续行康复治疗,随访1年,病人生活自理能力评分60分。

小儿抗NMDA受体脑炎的临床护理干预效果分析

此次对小儿抗NMDA受体脑炎的临床护理方面进行深度探究。方法 根据调研内容为依据,从科室进行病例的选入,参与调研对象各指标达标者为80例,均在入院后临床诊断确定病症,对此次患儿实施分组后展开护理工作(随机法),对照组40例主要给予优质护理服务,观察组在此基础上,评估患儿精神症状,增加心理护理干预,该组例数与对照组同步,在干预后对此次护理满意度方面进行综合评估,对出现并发症的患儿实施记录与组间对比,查看此次各小组患儿住院所用时间。结果 以指定的问卷表形式对患儿和家属开展满意度调查,回收份数100%,对比各小组满意度,其中观察组满意度更为突出;两组均有部分患儿在治疗期间发生并发症,经统计对照组出现例数居多;对比住院天数,对照组时间延长(P<0.05)。结论 此次主要针对NMDA受体脑炎患儿实施临床护理服务,经过研究表明优质护理服务配合心理护理能够帮助患儿更有效地改善症状,提升患儿和家属满意度。

氯胺酮、丙泊酚和羟丁酸钠遗忘作用与NMDA受体的关系

目的观察氯胺酮、丙泊酚和羟丁酸钠的遗忘作用与NMDA受体的关系。方法小鼠分别腹腔注射(intraperito-neal injection,ip)氯胺酮(20 mg.kg-1)、丙泊酚(10 mg.kg-1)或羟丁酸钠(100 mg.kg-1)建立遗忘模型,在跳台实验和避暗实验中分别观察NMDA侧脑室注射(intracerebrov-entricular injection,icv)对遗忘小鼠错误次数(error times,ETs)、跳台潜伏期(step down latency,SDL)、步入潜伏期(step through latency,STL)的影响。结果侧脑室注射NM-DA可减少氯胺酮所致遗忘小鼠的ETs,延长SDL和STL;对丙泊酚或羟丁酸钠所致遗忘小鼠的ETs、SDL和STL无影响。结论 NMDA受体可能是氯胺酮所致遗忘作用的重要靶位,不是丙泊酚或羟丁酸钠所致遗忘作用的靶位。

微波辐照对大鼠海马脑区NMDA受体亚基基因表达的影响

目的从亚基基因表达方面探讨NMDA受体在微波辐照所致的学习记忆功能障碍中的作用。方法采用平均功率密度为65mW/cm2的微波全身一次辐照大鼠20min(SAR12.0W/kg),在辐照后0h、3h、12h、24h和3d时相点,大鼠腹腔麻醉断头,分离海马,用RT-PCR技术分别检测NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2B、NR2C、NR2D在基因表达水平上的变化。结果微波辐照后大鼠海马脑区NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2C、NR2D基因表达异常。表现为功能亚基NR1mRNA表达在辐照后3h、24h、3d时相分别比对照组下降21.1%(P<0.05)、14.2%(P<0.05)、30.3%(P<0.01);辐照后0h、3h、12h,NR2AmRNA表达较对照组分别降低37.0%(P<0.01)、35.9%(P<0.05)、35.3%(P<0.05);NR2BmRNA表达与对照组比无统计学差异;辐照后0h和24h,NR2CmRNA表达较对照组分别降低24.3%(P<0.05)和27.1%(P<0.05);辐照后0h、12h、24h、3d,NR2DmRNA表达较对照组分别升高67.9%(P<0.05)、45.7%(P<0.05)、49.7%(P<0.01)、75.4%(P<0.01)。结论微波辐照后大鼠海马脑区NMDA受体结构组成发生改变,NMDA受体自身的复杂调节功能下降,从而影响受体介导的LTP的产生。

石菖蒲提取成分对大鼠脑皮质NMDA、M受体与其配体结合的影响

目的观察石菖蒲水提取成分对大鼠脑皮质NMDA、M受体与其配体结合的影响。方法提取脑皮质受体后,加入相应的石菖蒲提取成分,运用放射配基结合分析法检测NMDA、M受体与其相应配体的的结合。结果石菖蒲挥发油、去油水煎液、β-细辛醚均能拮抗NMDA受体与3H-MK 801的结合,但对M受体与3H-QNB的结合无影响。结论石菖蒲水提成分能拮抗大鼠脑皮质NMDA受体与其配体的结合,该作用可能是其醒脑开窍、治疗脑损伤的重要药理机制之一。

M受体对吗啡戒断大鼠脊髓和脑干NMDA受体基因表达及中脑导水管周围灰质中谷氨酸释放的调节

应用鞘内注射反义寡脱氧核苷酸技术和RT-PCR反应,观察毒蕈碱型乙酰胆碱受体(muscarinic acetylcholine receptor,M)对吗啡依赖大鼠脊髓和脑干NMDA受体NR1A和NR2A mRNA表达和中脑导水管周围灰质区(periaqueductal grey,PAG)中谷氨酸释放的影响。结果显示,吗啡依赖大鼠脊髓NR1A和NR2AmRNA表达明显升高,而脑干中NR1A和NR2AmRNA表达没有显著变化;注射纳洛酮后1 h,吗啡戒断大鼠脊髓和脑干中NR1A和NR2A表达显著高于依赖组,经NMDA受体拈抗剂MK801(0.125 mg/kg,i.p.)、M受体拮抗剂东莨菪碱(0.5 mg/kg,i.p.)、M.受体拮抗剂呱伦西平(10 mg/kg,i.p.)和NOS抑制剂L-NAME(10 mg/kg,i.p.)处理后,脊髓和脑干中NR1A和NR2A基因表达都较戒断组明显减少。在纳洛酮激发前24 h鞘内注射NR1A和M2受体的反义寡脱氧核苷酸(4 μg/只),戒断症状评分值及脊髓和脑干的NR1AmRNA的表达均较对照组明显减少。吗啡依赖大鼠在纳洛酮注射前24 h鞘内注射M2受体反义寡脱氧核苷酸(4μg/只),可以明显减少PAG内透析液中谷氨酸含量。上述结果提示:NMDA受体的基因表达和谷氨酸释放参与吗啡成断过程,而这种表达受到M受体的调节。

严重烫伤大鼠海马NMDA受体活性变化的机制研究

目的 研究严重创伤对海马NMDA受体 (NR)活性的影响及其相关机制 ,为设法调节NR的活性从而控制创伤后HPA轴的过度兴奋提供实验依据。方法 以大鼠背部 3 0 %TBSAⅢ度烫伤作为严重创伤过度应激模型 ,利用放射配基结合法检测烫伤后海马NR活性 (最大结合容量及亲和力 )的变化 ;Western blot +免疫共沉淀方法检测烫伤海马NR1、NR2A、NR2B酪氨酸磷酸化的改变 ;高效液相色谱方法检测烫伤海马谷氨酸含量的变化。结果 严重烫伤后 0 5、1、2、4、8、2 4、48h海马NR的亲和力显著增加 ,尤以烫伤后 2h最为明显 ,最大结合量从 1h起亦显著增加 ;各时相点海马酪氨酸磷酸化NR1、磷酸化NR2A及磷酸化NR2B蛋白水平皆显著增高 ;烫伤后 0 5、1、2、4h ,海马内谷氨酸释放量增加非常明显 ,伤后 2 4h及 48h无明显变化。结论 严重烫伤导致海马NR持续过度激活 ;NR酪氨酸磷酸化水平的增加是其过度激活的重要原因 ,谷氨酸释放量的变化可能不是其持续激活的主要因素。

生后早期大鼠海马NMDA受体亚单位NR1、NR2A和NR2B的表达变化

运用免疫组织化学反应和图象分析处理技术研究生后 1d、4d、1周、2周、3周、4周、5周、6周的 SD大鼠海马结构中NMDA受体亚单位 NR1、NR2 A、NR2 B三种蛋白质的表达变化规律。结果表明 ,生后各时间点海马结构各区锥体细胞及颗粒细胞胞体中均有 NR1、NR2 A、NR2 B的表达 ,NR2 B还在锥体细胞的顶树突中有较强表达。 NR1与 NR2 B的生后表达变化模式相似 ,在生后 1d和 4d,两者在 CA3区的表达均高于 CA1 区 ;生后 1周后两者在 CA1 区的表达则高于 CA3区 ;到生后 2～ 3周其表达达到峰值。而 NR2 A却与此不同 ,生后 1d、4d时其在海马结构各区的表达较高 ,随发育时间延长表达逐渐下降 ,大约在生后 4周降至谷底。整个发育过程中 ,NR1在海马结构各区的表达始终高于 NR2 A和 NR2 B的表达。这些结果提示 ,生后早期大鼠海马结构 NR1、NR2 A、NR2 B的表达具有发育性时空差异和亚单位差异 ,这种差异可能与发育早期海马学习功能的特异性以及海马各区对缺血敏感性不同有关。

低压低氧对大鼠海马神经元NMDA受体发育影响的研究

目的 观察低压低氧环境对海马发育过程中学习记忆、NMDA受体 1和生长抑素mRNA表达的影响。方法 采用模拟高原低氧模型 ,运用原位杂交及行为学技术。结果 低压低氧环境使NMDA受体 1和生长抑素mRNA的表达发生改变 ,大鼠的主动回避反应和空间学习记忆能力下降。结论 低压低氧环境可以通过改变NMDA受体和生长抑素的表达而对学习记忆产生一定的影响。

不同训练方式建立大鼠空间记忆后海马结构NMDA受体表达的变化

短期强化训练能否建立可靠的空间长时记忆?用不同训练方式建立空间记忆后,大鼠海马结构NMDA受体的表达发生怎样的变化?目前尚未见明确报道。本研究应用Morris水迷宫方法分别采用以下模式对大鼠进行训练:空间长时记忆训练模式(LT组)、空间短时记忆训练模式(ST组)以及短期强化训练模式(SRT组),对不同训练模式建立的空间记忆进行了比较,应用免疫荧光组织化学方法检测各组大鼠海马结构NMDA/NR1受体表达的变化。结果表明,Morris水迷宫训练过程中,LT和SRT组大鼠寻找站台的平均潜伏期和策略均无显著性差异;记忆检测发现,除LT组大鼠在站台所在象限的停留时间明显长于SRT组大鼠外,两组大鼠寻找站台的潜伏期和策略以及穿越站台的次数均无显著性差异。ST组大鼠海马结构NMDA/NR1的免疫反应强度与对照组相比,无显著差异。但是,LT和SRT组大鼠海马CA1区锥体细胞层及齿状回的颗粒细胞层NMDA/NR1免疫荧光反应都明显增强,两组之间比较无显著差异,但是两组分别与对照组和ST组相比均有显著性差异。上述结果提示,短期强化训练可建立与长期训练基本相同的空间长时记忆。大鼠海马结构CA1区和齿状回NMDA受体表达的增加,可能是空间长时记忆形成的机制之一。

音乐对大鼠海马NMDA受体表达的作用

目的:研究音乐刺激对大鼠海马组织NMDA受体及其受体蛋白mRNA表达的影响。方法:用免疫组织化学和PCR技术,定量检测了:NMDA受体蛋白和编码该受体的mRNA表达。结果:音乐刺激后,NMDA受体蛋白及其mRNA表达,在持续音乐刺激组分别高出对照组40％和58％,生后音乐组高出33％和42％,而胎期音乐组与对照组相比不显著(4％和6％)。结论:音乐刺激能显著增强大鼠海马组织NMDA受体和mRNA表达,而且其增强效应具有音乐刺激时间依赖性,且生后的作用较为明显。

NMDA受体对烫伤应激大鼠海马糖皮质激素受体基因表达的影响

目的 观察烫伤应激后海马糖皮质激素受体 (GR)基因表达的变化 ,探讨N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D as partate ,NMDA)受体在这种变化中的作用。方法 利用RT PCR技术 ,检测烫伤前腹腔注射NMDA受体拮抗剂MK 80 1及激动剂NMDA对烫伤应激后 2hGRmRNA水平的影响。结果 烫伤应激后 2h海马GRmRNA水平明显降低 (P <0 0 1) ;应激前腹腔注射MK 80 1使烫伤后降低的GRmRNA水平明显恢复 (P <0 0 1) ,注射NMDA使其进一步降低 (P <0 0 5 ) ,注射生理盐水无明显变化。

海马NMDA受体在大鼠严重烫伤后HPA轴兴奋性变化中的作用

目的 研究海马N 甲基 D 天冬氨酸受体 (NMDA受体 ,NR)在创伤导致的HPA轴过度兴奋中的作用。方法 以大鼠背部 3 0 %TBSAⅢ度烫伤作为严重创伤过度应激模型 ,分别观察海马内微量注射NR的拮抗剂MK 80 1或NR的功能受体NR1的反义寡核酸 (Oligodeoxynucleotide ,ODN)对烫伤后 2h血清ACTH及皮质醇浓度的影响。结果 严重烫伤后2h ,血清ACTH及皮质醇浓度明显升高 ;与烫伤组相比 ,海马内微量注射生理盐水 ,没有明显改变烫伤后血清ACTH及皮质醇浓度 ;海马内微量注射MK 80 16μg可明显降低烫伤后血清ACTH及皮质醇浓度 ;注射MK 80 112 μg可进一步降低血清ACTH及皮质醇浓度 ;注射NR1反义ODN 10nmol L可明显降低烫伤后血ACTH及皮质醇浓度 ;注射 2 0nmol L可进一步降低血清ACTH及皮质醇浓度。结论 海马NR参与了烫伤HPA轴的过度激活。

慢性复合应激对大鼠学习与记忆及海马NMDA受体亚基NR2A和NR2B表达的影响

为了观察慢性复合应激对大鼠学习与记忆的影响和海马内 NMDA受体亚基 NR2 A、NR2 B表达的变化。本研究将成年雄性 Wistar大鼠分为实验组和对照组 ,实验组动物每天交替暴露于复合应激原环境中达 6周 ,用 Morris水迷宫和 Y迷宫作业测试其空间学习与记忆成绩 ,再采用免疫组织化学和图像处理方法分析海马 CA1 、CA3、齿状回区的 NR2 A和 NR2 B的表达。结果显示 :( 1) Morris水迷宫测试 :慢性复合应激组大鼠寻找平台的潜伏期较对照组明显缩短 ,Y迷宫测试 :慢性复合应激组大鼠学会躲避电击的正确次数较对照组明显增多 ;( 2 )慢性复合应激组海马内 NMDA受体亚基 NR2 B表达水平较对照组明显上调 ,NR2 A表达水平无显著变化。结论 :慢性复合应激可增强学习与记忆能力 。

白细胞介素1与大鼠神经细胞NMDA受体关系的研究

观察了ＩＬ－１β对ＮＭＤＡ（Ｎ－甲基天冬氨酸）受体活性及其ｍＲＮＡ表达的影响。结果表明，ＩＬ－１β在１～２５Ｕ／ｍｌ浓度范围内可剂量依赖地提高ＮＭＤＡ受体的活性和明显促进培养胚胎大鼠大脑皮层神经元ＮＭＤＡ１型受体（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ的表达，并存在一定的剂量、时间效应关系。ＩＬ－１受体拮抗剂（ＩＬ－１Ｒａ）可抑制ＩＬ－１β的上述生物学效应。提示ＩＬ－１β具有兴奋性神经调质作用，在癫痫等惊厥性疾病的发病过程中可能起一定作用，ＩＬ－１Ｒα对某些神经系统兴奋性疾病具有潜在的治疗价值。

异氟烷催眠、镇痛作用与NMDA受体甘氨酸位点的关系

目的分析异氟烷催眠、镇痛作用与NMDA受体甘氨酸位点的关系。方法建立小鼠异氟烷注射催眠、镇痛模型后,在小鼠催醒、甩尾、福尔马林实验中,观察侧脑室或鞘内注射NMDA受体甘氨酸位点的激动剂D-丝氨酸(D-Serine,D-Ser)后小鼠睡眠时间、甩尾潜伏期或累计舔足时间的变化;用免疫组化方法观察异氟烷及鞘内用药对福尔马林小鼠脊髓Fos蛋白表达的影响。结果侧脑室注射D-Ser对异氟烷的催眠时间无影响(P>0.05)。鞘内注射D-Ser(0.025、0.05、0.1ng)可拮抗甩尾实验、福尔马林实验Ⅰ相中异氟烷的镇痛作用(P<0.05,P<0.01),而对福尔马林实验Ⅱ相异氟烷的镇痛作用无影响(P>0.05)。鞘内注射D-Ser0.05ng可拮抗异氟烷对福尔马林小鼠脊髓Fos蛋白表达的抑制作用(P<0.01)。结论异氟烷催眠作用与脑内NMDA受体甘氨酸位点关系不大;脊髓NMDA受体甘氨酸位点介导异氟烷对热、化学刺激的镇痛作用,而与异氟烷对慢性炎性疼痛的镇痛作用无明显关系。

电针对脑缺血再灌注模型大鼠纹状体NMDA受体NR2亚基蛋白表达的影响

目的观察脑缺血再灌注模型大鼠受损侧纹状体组织中NMDA受体调节亚单位NR2A和NR2B蛋白表达及其电针干预后的变化,探讨电针对缺血再灌注兴奋性氨基酸毒性的拮抗作用,进一步阐明电针治疗缺血性脑血管疾病的机制。方法用数字随机表将15只SD大鼠随机分成3组:假手术组、模型组、电针组,每组各5只。采用改良Longa线栓法制作大脑中动脉短暂性缺血再灌注模型,电针组大鼠在再灌同时电针"百会"、"大椎"两穴(连续波,频率3 Hz,电流强度1～3 mA),30 min,深度均为10 mm。免疫组织化学法及图像处理系统检测分析大鼠受损侧纹状体NR2A、NR2B蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠纹状体组织中NR2A的表达量明显下降,而NR2B的表达量明显升高,给予电针"百会"、"大椎"穴后的大鼠纹状体组织NR2A表达细胞数及含量均明显高于模型组,表达NR2B的细胞数及含量均明显降低。结论电针可能通过激活NR2A受体蛋白表达,抑制NR2B受体蛋白的过量表达,从而调节NMDA受体复合物的整体功能活性,减少NMDA受体介导的兴奋性氨基酸毒性反应,减轻脑缺血再灌注引起的局灶性脑损伤,发挥一定的脑神经保护作用。