NMN长期补充对老年小鼠心功能的影响及机制研究

目的探讨烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对老年小鼠心功能的影响及机制。方法采用随机分组对照研究方法,选择3月龄C57BL/6J雄性小鼠。设置年轻组:不做任何处理,适应性喂养至4月龄;老年组:继续饲养至12~16月龄;实验组:于代谢笼中继续饲养至12~16月龄,监测饮水量,饮水中添加NMN[300mg/(kg·d)]。监测小鼠体质量变化,行口服葡萄糖耐量实验(oral glucose tolerance test,OGTT)。检测心脏烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)含量。超声检测小鼠心功能。检测氧化应激相关指标,脂质过氧化终产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及蛋白过氧化水平。检测心肌腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)含量及线粒体DNA(mtDNA)数目。结果与年轻组比较,老年组小鼠体质量明显增长;葡萄糖耐量受损,心肌NAD+含量下降。反映心脏舒张功能的舒张早期和舒张晚期血流速度比值(early ventricular diastole/late ventricular diastole,E/A)以及反映收缩功能的左心室射血分数(left ventricular ejection fraction reflecting,LVEF)和左心室短轴缩短率(left ventricular fraction shortening,LVFS)均下降。同时发现心肌组织MDA含量明显增加、SOD活性降低,羰基化的蛋白增多。心肌ATP含量和mtDNA拷贝数均明显减少。与老年组比较,实验组小鼠体质量增长不显著,糖耐量受损减轻。心脏NAD+含量增高,E/A值,LVEF及FS均增高,氧化应激改善。心肌ATP含量和mtDNA拷贝数上升。结论长期使用NMN恢复心脏NAD+水平并减轻线粒体损伤,最终改善老年小鼠心功能。

响应面-满意度函数优化重组大肠杆菌产NMN转移酶发酵条件

重组大肠杆菌Escherichaia coli能高效表达NMN转移酶,以此为出发菌株,以菌体生长量OD600和NMN转移酶的活力为响应值,对重组大肠杆菌产NMN转移酶的发酵条件进行优化。首先以Plackett-Burman实验设计优化筛选出3个主要影响因子:胰蛋白胨、甘油、Mg SO4;随后以BoxBehnken中心组合设计建立上述3个因子对OD600和NMN转移酶活力水平的数学模型;最后通过满意度函数获得最佳发酵条件为:酵母粉30 g/L,胰蛋白胨10.5 g/L,甘油3.49 m L/L,Mg SO40.45g/L,K2HPO440.5 g/L,KH2PO46.0 g/L,NH4Cl 1.5 g/L,Na Cl 0.6 g/L,接种量1.5%,诱导时间12h。在该优化条件下,菌体生长和产酶水平均获得了显著的提升。重组NMN转移酶的活力水平从8.85 U/mg提高到15.48 U/mg,菌体生长量OD600从4.85提高到6.01,提高幅度分别为74.92%和23.92%。

来源于大肠杆菌的NMN转移酶的克隆表达与酶学性质研究

在生物体内,NMN(烟酰胺单核苷酸)转移酶能够催化NMN生成NAD。本研究通过构建重组表达质粒p ET30α(+)-Nmnat,成功实现来源于大肠杆菌的NMN转移酶基因(Nmnat)的原核表达。从大肠杆菌基因组中克隆得到的NMN转移酶基因长度为1 245 bp,所编码的重组酶分子量45 k Da。对重组酶的酶学性质进行分析,结果显示该酶最适反应温度和p H分别为37℃和7.5。4℃下,该酶的热失活半衰期可长达990.2 min。Mn2+、Fe2+对该酶的酶活的激活作用显著,而EDTA对酶活能造成明显的抑制作用。酶动力学分析结果显示,该酶对底物NMN催化的Km和Vmax分别为16.89 mmol/L和2.46μmol/(L·min)。该NMN转移酶基因在大肠杆菌宿主中的成功表达,为NAD生物合成应用研究奠定了基础。

保护剂对重组大肠杆菌NMN转移酶稳定性的影响

通过向NMN转移酶（Nmnat）中添加保护剂以提高其热稳定性及储存稳定性,扩大酶的使用范围。研究了固体醇类（山梨醇、甘露醇）、糖类（海藻酸钠、蔗糖、甘露糖）和有机溶剂（DMSO、丙二醇-单甲醚、乙醇、甘油）对Nmnat的稳定性的作用,通过正交实验得到一种复合保护剂,并研究复合保护剂对Nmnat最适反应温度、pH稳定性、储存稳定性的影响。结果表明,山梨醇、海藻酸钠和DMSO能够显著提高Nmnat的热稳定性。复合保护剂配方为山梨醇1.5 g/L,海藻酸钠1.0 g/L,DMSO 0.5%。复合保护剂的添加使Nmnat的最适反应温度从37℃提高到50℃;50℃保温2 h酶活提高了24.5%;pH使用范围由7.0~8.0扩大到6.0~8.0;4℃储存28 d后,酶活保留率提高了15.65%。

NMN柔软复合材料异常排胶问题的探讨

NMN柔软复合材料是F级低压电机槽绝缘的传统材料,针对某F级发电机出现的槽绝缘异常排胶问题进行分析探讨,通过大量的试验进行验证,对可能出现排胶的因素进行了分析。结果表明:后处理工艺不足是NMN排胶的主要原因。结合电机实际应用对NMN柔软复合材料提出了改进建议。

电视新闻信息管理系统(NMNS)

随着改革开放的深入,人们对新闻报导的数量、质量、时效性都有更高的要求。这就要求电视台在新闻节目制作过程中要有新的突破,如果还是沿用过去传统的“人传手抄”、“手工编排节目”、“纸质存档”的方法,显然远远不能适应这种需求。

NMN肠溶胶囊的制备及质量标准研究

烟酰胺单核苷酸(NMN)是烟酰胺嘌呤二核苷酸的前体物质,对老年退行性疾病有一定的治疗作用。本文从增加NMN的稳定性及利用度考虑,将其制备成NMN肠溶胶囊并对其进行质量标准研究。NMN肠溶胶囊的平均含水量为2.54%;平均装量为300.73 mg;平均崩解时限为30.29 min;利用紫外-可见分光光度法对NMN肠溶胶囊进行含量检测,测得烟酰胺单核苷酸的平均含量为130.43 mg/粒。

NMN和Nomex性能对比分析

介绍NMN和Nomex纸的拉伸强度、抗撕裂等机械性能的对比试验数据及价格比,得出可用NMN纸代替Nomex纸用于定子线圈换位绝缘的结论。

NMN转移酶和乙醇脱氢酶共固定化及其动力学特性

采用磁性纳米颗粒对烟酰胺单核苷酸(NMN)转移酶和乙醇脱氢酶进行共价共固定,用以生产NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸),并对共固定化条件、共固定化双酶酶学性质及其动力学进行了考察。结果显示:双酶最佳共固定化反应条件为:NMN转移酶和乙醇脱氢酶添加量分别为6.5U/mg和10.3U/mg,体系pH控制在5.0~7.0,25℃固定化2 h,NADH产率可达到87%,与游离酶的催化产率73%相比提高了14%。所得共固定化双酶在连续使用11次后,剩余酶活仍保留在61.1%左右,表明共固定化酶具有较好的操作稳定性。双酶动力学方程推导与验证结果表明:共固定化双酶反应体系符合米氏方程,其动力学反应速率取决于固定化乙醇脱氢酶的反应速率。

烟酰胺单核苷酸(NMN)的活性与化学制备的研究进展

烟酰胺单核苷酸(NMN)作为生物体内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)补救合成途径中的关键前体,能够一定程度上延缓衰老与治疗由于衰老引起的老年退行性疾病、2型糖尿病等。本文综述了NAD+的主要活性及其生物体内的生物合成方法,以及其前体NMN的最新的化学合成方法。

NMN和F-DMD等柔软复合材料的耐热性能综合评估

介绍NOMEX纸、聚酯纤维无纺布、NMN、F-DMD的性能,指出经试验证明:从抗张强度热老化性能试验、抗撕裂强度热老化性能试验、卷管耐压法试验、模型线圈受潮试验、小型交流异步电动机整机高温下空载运行试验、高温下外表形态变化试验等试验结果综合评估表明,NMN的耐热性能优于F-DMD。

国产复合材料SDMSD、OMO、NMN在低压电机上的应用

本文对国产复合材料SDMSD、OMO、NMN进行了模拟线圈、TGA、挂漆量、相容性等试验。结果表明。用作低压电机槽绝缘、相绝缘的SDMSD、OMO、NMN复合材料都能满足 F 级耐温要求。在挂漆量、相容性、价格等方面,SDMSD较 OMO、NMN占优势。从下线效果还说明。SDMSD的槽满率也能达到通用的DMD、NMN水平。

β-烟酰胺单核苷酸跨境产品中NMN含量的测定

本文基于高效液相色谱法,通过优化色谱条件和样品前处理条件,建立了一种测定β-烟酰胺单核苷酸(NMN)胶囊和NMN片剂基质中NMN含量的检测方法,并进行方法学验证。结果表明,本方法在5~500μg/mL范围内有较好的线性关系,方法检出限(LOD,S/N=3)为1.0 mg/kg,定量限(LOQ,S/N=10)为3.0 mg/kg,仪器精密度为0.3%。对于NMN片剂样品,方法稳定性为1.7%,重复性为1.8%;对于NMN胶囊样品,方法稳定性为0.6%,重复性RSD值0.6%。NMN片剂和NMN胶囊样品中NMN的检测回收率在90.9%~108.9%之间,相对标准偏差均不超过1.9%。综上,本方法具有较好的重现性、精密度、稳定性、重复性,结果准确可靠,可用于实际样品中NMN含量的准确测定。通过对6种市售的NMN产品进行检测,所有样品中均检出了NMN,但是部分产品的实际含量较其标称含量偏少,发现部分产品存在虚报NMN含量的问题。本文研究为制定NMN跨境产品中NMN含量的检测方法标准奠定了方法学基础,对于提高NMN相关产品质量,促进相关产业的便捷监管具有深远意义。

国产绝缘用复合材料SDMSD、OMO、NMN性能的系统分析

以前关于复合材料的报道,大多为生产工艺的研制,应用方面讨论的虽有一些,但从理论上进行分析的不多。本文就西安绝缘材料厂研制生产的NMNF级复合材料、东方绝缘材料厂研制的聚矾改性F级复合材料SDMSD、山东蓬莱登州绝缘材料厂研制的聚苯醚改性F级复合材料OMO等的各项物理、化学、电气性能进行了系统分析,并进行了讨论。

火花塞电极合金线NMn2-1.8-1.8的研制

镍锰硅铬合金为电极材料的复合电极火花塞,被广泛应用于中低档汽车和摩托车。国内火花塞电极合金线NMn2-1.8-1.8主要采用中频感应熔炼—锻造—轧制—拉拔工艺生产。本文阐述了该合金线的试制工艺流程,通过对该工艺试制的Ф4.4mm合金线成品进行化学成分分析、外观质量检测、直径允许偏差、力学性能和电阻率测试,结果表明Ф4.4mm合金线NMn2-1.8-1.8符合JB/T 8899-1999火花塞电极合金线要求,说明采用该工艺试制火花塞电极合金线NMn2-1.8-1.8是可行的,具有较好的实际生产指导意义。

β-烟酰胺单核苷酸(NMN)对自然老化小鼠免疫力与精神状态的影响

目的:研究β-烟酰胺单核苷酸(NMN)对自然老化小鼠免疫力与精神状态的影响。方法:将20只6月龄ICR小鼠分为对照组与NMN组,正常饲养6个月后NMN组连续灌胃给药60 d。末次给药24 h后各组别进行自发活动与强迫游泳实验,之后小鼠眼内眦取血进行血细胞分析,颈椎脱臼处死动物,取胸腺与脾脏称重,计算器官指数。结果:NMN组较对照组小鼠体重、胸腺及脾脏指数无显著性差异。血细胞检测中,各指标无显著性差异。自发活动分析结果显示NMN组小鼠5 min内运动总路程与运动时间百分比较对照组有极显著增高(P<0.01)。强迫游泳实验结果中,NMN组小鼠不动时间较对照组有极显著性降低(P<0.01)。结论:NMN对自然老化小鼠的免疫无显著影响,但具有一定改善焦虑与提高活跃度的药效作用。

β-烟酰胺单核苷酸霜在经皮护理中的功效机制

为探究实验室制备β-烟酰胺单核苷酸(NMN)霜的生物功效,借助小鼠光老化模型和自然衰老模型对NMN霜的抗衰老作用及生物安全性进行了评估。结果显示,NMN霜可以通过提高皮肤及血液中抗衰老因子(NAD+和SIRT3)、上调血液中过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力及促进皮肤胶原纤维生成达到抗衰老效果;NMN霜治疗组小鼠的血液指标及五脏H&E染色结果相比对照组均无异常,提示NMN霜的生物安全性较高。

Investigation of the effect of 2＇-substitution of NMN analogues on CD38 NADase inhibitory activity

CD38是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)代谢酶,可以催化生成不同的钙信号信使。它的酶抑制剂对于CD38调控的信号通路和生理功能的进一步研究有重要作用。为了深入了解2'位取代基对烟酰胺单核苷酸(NMN)类似物抑制CD38酶活性的影响,本文研究了一种2'位有两个取代基的新NMN类似物,同时使用分子动力学模拟和量子化学计算方法探索2'位取代基影响活性的原因。结果表明2'位有两个取代基时,会干扰核苷酸C1'与CD38之间共价键的形成。本研究将有助于全面理清NMN类似物作为CD38酶抑制剂的构效关系。

β-烟酰胺单核苷酸对牛卵母细胞脂滴含量及冷冻效果的影响

旨在探明β-烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对牛卵母细胞脂滴含量和玻璃化冷冻效果的影响。本研究将牛卵母细胞置于含1μmol·L^(-1)NMN的培养液中进行体外成熟(in vitro,IVM)、玻璃化和体外受精(in vitro fertilization,IVF),检测了牛卵母细胞的脂滴含量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、凋亡水平和发育能力;添加NMN组作为NMN处理组,未添加NMN组作为新鲜对照组;添加NMN且进行玻璃化处理的作为NMN玻璃化组,未添加NMN但进行玻璃化处理的作为玻璃化对照组。结果表明,NMN组牛卵母细胞的脂滴含量、ROS水平、凋亡水平均显著低于新鲜对照组(P<0.05),卵裂率((89.57±7.58)%)和囊胚率((45.63±3.78)%)均显著高于新鲜对照组((80.77±0.70)%,(36.90±1.20)%,P<0.05);同时,NMN玻璃化组牛卵母细胞的ROS水平和凋亡水平也显著低于玻璃化对照组(P<0.05),并且解冻后的存活率((97.25±0.11)%)、卵裂率((75.47±1.11)%)和囊胚率((33.75±1.43)%)均显著高于玻璃化对照组((89.29±1.16)%、(52.00±1.26)%、(15.38±1.73)%,P<0.05)。本研究结果表明,添加NMN可以有效降低牛卵母细胞的脂滴含量,降低玻璃化牛卵母细胞的ROS水平和凋亡水平,从而提高玻璃化牛卵母细胞的发育能力。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定茶叶中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸及其4种前体化合物含量

烟酰胺核糖体(NR)、烟酰胺单核苷酸(NMN)、烟酸(NA)和烟酰胺(NAM)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))的4个前体化合物,口服后可在体内转化为NAD^(+)发挥抗衰老等功效。建立了采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定茶叶中NAD^(+)及其4种前体化合物含量的方法,茶叶经水提取,稀释后直接进行UPLC-MS/MS分析。经方法学验证,5种目标化合物在各自范围内线性关系良好(R^(2)≥0.99),回收率为70.00%~120.00%,相对标准偏差为2.09%~14.50%,方法的定量限为0.10~0.50μg·L^(-1)。绿茶、红茶和黑茶中5种目标化合物的含量测定结果显示,绿茶和红茶是NR、NMN、NAD^(+)的良好天然食物来源;主成分分析结果显示,根据5种化合物含量能对红茶、绿茶、黑茶进行良好的类群区分;聚类分析结果显示,同一产地同一类型茶叶中5种化合物质量分布不均,离散度较高,无法进行区分。