HSQC-TOCSY技术对一种多糖三萜皂苷应用解析

从川续断干燥根中分离得到一种常春藤皂苷元型三萜皂苷(化合物1),其结构被鉴定为3-O-[β-D-吡喃木糖(1-4)-β-D-吡喃葡萄糖(1-4)][α-L-吡喃鼠李糖(1-3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1-3)-α-L-吡喃鼠李糖(1-2)-α-L-吡喃阿拉伯糖-常春藤皂苷元28-β-D-吡喃葡萄糖(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖脂苷,该文利用HSQC-TOCSY技术,并结合1 H-1 H COSY、HSQC、HMBC等二维谱技术对该化合物13 C,1 H化学位移进行了明确归属.

川续断β-香树脂醇合酶的基因克隆及生物信息学分析

续断是我国常用中药材之一,药用历史悠久,具有补肝肾、强筋骨、续折伤等功效。三萜皂苷类化合物是川续断科植物川续断的主要药效成分。β-香树脂醇合酶(β-AS)属于氧化角鲨烯环化酶(OSCs)超家族,在生物合成途径中具有催化齐墩果烷型三萜皂苷骨架形成的功能。目前有关川续断β-香树脂醇合酶的研究较少,其催化机制仍待探究。为进一步挖掘与丰富该类酶的信息,该研究通过对转录组测序结果进行分析,从川续断中克隆得到1个β-香树脂醇合酶基因DaWβ-AS,并构建至大肠杆菌载体中实现蛋白表达;并采用实时荧光定量PCR技术分析其在川续断4个不同组织中的相对表达量,结果显示DaWβ-AS基因在叶中的相对表达量最高。生物信息学分析表明,DaWβ-AS蛋白含有PLN03012保守结构域,属于cl31551超家族,无跨膜区且不含信号肽。通过对川续断β-AS的克隆、表达及生物信息学分析,为川续断三萜皂苷生物途径解析提供了科学依据,有助于推动后期川续断三萜皂苷的定向生物合成,并为高质量川续断资源培育与开发提供相关参考。