脑缺血后大鼠前脑NOS神经元与FOS蛋白表达的研究

目的 :观察大鼠全脑缺血再灌注后前脑NOS阳性神经元分布和FOS蛋白表达时程变化 ,探讨其相互间的变化关系及其在脑缺血损伤机制中的可能作用。方法 :采用四血管闭塞模型、运用NADPHd组化反应、FOS免疫组化反应及两者的双重反应技术 ,对全脑缺血 30min再灌注 2h、4h、8h、1 2h、2 4h、4 8h进行研究。结果 :缺血组前脑NOS阳性神经元数目和染色强度增加 ,FOS蛋白表达随再灌注时程而变化 ,并可见有约 1 0～ 1 5 %NOS/FOS双染细胞。结论 :全脑缺血再灌注损伤过程中 ,前脑NOS阳性神经元的分布与FOS蛋白表达密切相关。

急性低温低氧对大鼠下丘脑NOS及c-fos表达的影响

目的：探讨急性低温低氧对大鼠下丘脑ＮＯＳ及ｃ－ｆｏｓ表达的影响。方法：用ｃ－ｆｏｓ免疫组化技术和ＮＡＤＰＨ－ｄ组化法研究急性低温低氧大鼠下丘脑内ｃ－ｆｏｓ原癌基因的表达、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的分布及两者的共存。结果：急性低温低氧组大鼠：①下丘脑内ｃ－ｆｏｓ表达明显增加，在许多核团呈恒定的核特异定位分布，其中室旁核、弓状核、腹内侧核、背内侧核表达最为强烈，乳头体前核、下丘脑后核有中等强度的表达，视上核偶有表达。②室旁核的大细胞部和视上核可见密集深染的ＮＯＳ阳性大细胞。③在室旁核的小细胞部及其附近的区域约有１０％～２０％的中小型ＮＯＳ阳性细胞同时表达ｃ－ｆｏｓ蛋白，其它部位偶见双染细胞。以上结果与对照组比较差异显著，而１ｄ组和３ｄ组之间无明显变化。结论：下丘脑内的特定核团可能参与低氧反应的整合。一氧化氮（ＮＯ）作为一种非经典的新型神经递质和信息分子可能与低氧反应有关。

甲基汞对大鼠脑一氧化氮合酶,丙二醛和即刻早期基因的影响

为了寻找甲基汞神经毒性检测和评价效应指标以及探讨甲基汞神经毒性分子机制,对大鼠进行氯化甲基汞(MMC)急性暴露(对照组为0.9％生理盐水、暴露组浓度为0.05mg/kg),20min后对大鼠进行生理生化指标和即早基因的检测,大鼠大脑中枢神经系统的神经递质一氧化氮合酶活力采用一氧化氮合酶(NOS)测定试剂盒检测;自由基脂质过氧化产物丙二醛含量采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法检测;即刻早期基因c-fos表达的变化采用免疫组化方法检测。结果表明,在暴露氯化甲基汞(MMC)20min后,大鼠大脑中枢神经系统的一氧化氮合酶活力、自由基脂质过氧化产物丙二醛含量以及即刻早期基因(IEG)c-fos蛋白阳性表达数量都有提高。但其中一氧化氮合酶活力及自由基脂质过氧化产物丙二醛含量同对照组相比没有显著性差异;而即刻早期基因c-fos的阳性表达同对照组相比有极显著性差异(P<0.01)。据此可以推测,即刻早期基因能作为甲基汞神经毒性检测和评价效应指标,一氧化氮合酶、丙二醛和即刻早期基因在甲基汞神经毒性过程中具有重要作用。

下瘀清痰汤对脑出血大鼠脑组织NOS及c-fos表达的影响

目的:探讨脑出血后脑组织c-fos表达和一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元活性的变化,观察下瘀清痰汤对这种变化的影响.方法:采大鼠自体血注入脑内制成脑出血模型,造模后分批采集标本,用免疫组化法观察c-fos的蛋白表达,用NADPH-d组化法测定NOS阳性神经元的分布,用双重染色技术观察fos/NOS双标细胞的变化,分析下瘀清痰汤的干预结果.结果:造模后1 h,脑组织即有fos出现和NOS活性的增强;造模后3 h fos表达达高峰;6 h NOS阳性神经元活性增强、数目增多达高峰;约10%～15%的NOS阳性神经元同时呈现fos表达阳性.而以下瘀清痰汤干预的中药组与模型组相比,不同时间点NOS阳性神经元数目与fos表达以及NOS/fos双染细胞数均明显低下.结论:c-fos和NOS参与了脑出血的病变过程,而下瘀清痰汤治疗脑出血的机制可能与其抑制c-fos表达、减弱NOS阳性神经元的活性有关.

豚鼠膀胱组织内Cajal样间质细胞及NOS表达阳性神经元的分布

目的探讨Cajal样间质细胞和一氧化氮合酶2(NOS2)表达阳性神经元在成年豚鼠膀胱组织内的分布。方法成年豚鼠膀胱冰冻切片,c-Kit免疫荧光和n-NOS2免疫荧光染色。结果膀胱肌层内可见c-Kit表达阳性细胞的存在,n-NOS2免疫荧光染色显示其阳性神经元广泛分布于膀胱组织内。c-Kit免疫荧光和n-NOS2免疫荧光双重染色虽未发现两者的共存,但可见c-Kit表达阳性细胞存在于NOS表达阳性神经元的附近。结论豚鼠膀胱的Cajal样间质细胞可能参与膀胱自主节律性运动的调控,提示二者可能共同参与膀胱自主节律性运动的调控,为"神经-Cajal样间质细胞-肌肉"作用单元的形成提供结构基础。

茶多酚联合维生素C、E对染尘大鼠血液中NO、NOS和GSH-Px的影响

为了探讨大鼠染尘后血液中NO含量和NOS、GSH PX的活性在体内的变化以及一些抗氧化剂对测量指标的影响 ,检测血液中NO含量及NOS活性、GSH PX活性。结果显示 :大鼠染尘后 ,血液中NO含量、NOS活性明显上升。GSH PX活性却呈显著下降的趋势。应用茶多酚联合VC、VE 处理30天、90天后 ,血液中NO含量与NOS活性显著下降 ,GSH PX活性明显上升。结果表明 :应用茶多酚联合维生素E和维生素C可以提高体内抗氧化酶的活性 。

大鼠面部伤害性刺激后纹状体边缘区内原癌基因c-fos和NOS的表达

为了研究纹状体边缘区和痛觉的关系 ,用 c- fos和 NADPH- d双标记方法研究了大鼠面部伤害性刺激后 c- fos蛋白(Fos)和 NOS在纹状体边缘区的表达。面部伤害性刺激后 30分钟 ,边缘区中即出现 Fos表达 ,刺激后 3小时 ,Fos表达达最高峰 ,而且主要在边缘区部位表达。正常大鼠纹状体边缘区中有密集的 NOS阳性神经元及纤维 ,面部伤害性刺激 3小时后 ,纹状体其余部位的 NOS阳性胞体及纤维减少或消失 ,但边缘区中仍保留 ,并可见少数 Fos和 NOS双标记细胞。提示纹状体边缘区可能和面部痛觉的调制有关。

电针抗胃炎性痛对内脏感觉c-fos及NOS阳性神经元的影响

目的 :探讨大鼠内脏感觉传入系统c fos及NOS阳性神经元在胃炎性痛时的变化和电针抗胃炎性痛对其的影响。方法 :采用免疫组织化学方法和还原型辅酶Ⅱ显色方法 ,显示在生理条件、胃炎性痛及电针抗痛时c fos和NOS阳性神经元在结状神经节 (NG)、背根神经节 (DRG)、脊髓(SC)及孤束核 (NTS)的表达及其变化。结果 :胃炎性痛时大鼠NG、DRG、SC和NTS中NOS阳性成分有明显变化 ,而c fos的变化仅仅出现在NTS。电针抗胃痛时能调整各个部位NOS阳性成分的变化幅度及孤束核c fos的表达量。结论 :①NO可能参与将胃的伤害性信息向中枢传递 ,其上传途径可能主要是伴随迷走神经径路上行到达脑干的内脏感觉通路 ;②依据c fos在NTS和SC中表达的差异 ,推测在脊髓中可能存在着下行抑制性通路 ,在脊髓水平即对传入的内脏伤害性信息进行了整合 ,阻抑信息的上传 ;③电针参与对胃炎性痛的调节与迷走神经通路中的NO能神经有密切的关系。

淋巴孔调控机制的研究进展

近年来对腹膜淋巴孔的研究已引起众多学者的关注,腹膜淋巴孔可能与腹腔感染致全身炎症反应综合症（SIRS）、相关疾病所致肝硬化腹水的转归、免疫调节、肿瘤细胞的转移和扩散等均有密切关联。一直以来,对腹膜淋巴孔调控机制的研究都是研究的重点及焦点。最早利用光镜发现膈腹膜上散在分布有类似于气孔状的结构是一位叫Von Recklinghausen的科学家,并将此特殊构造命名为腹膜淋巴孔,他猜测此孔是连通腹膜腔与腹膜下淋巴管道的重要结构[1]。

胚胎大鼠宫内缺氧动物模型的建立

目的-建立适合不同胎龄大鼠宫内缺氧的动物模型。方法-将孕15、19天的孕鼠随机分为对照组和缺氧组,缺氧组孕鼠用低张性缺氧原理致鼠胚宫内缺氧,将鼠胚大脑组织作c-Fos蛋白和一氧化氮合酶(nitricoxide synthase,NOS)免疫组化双标染色后,进行观察分析。结果-缺氧组鼠胚大脑神经元c-Fos蛋白和NOS阳性细胞均较对照组增多(P<0.05)。结论-可采用低张性缺氧方法使孕鼠缺氧来制造胚胎大鼠宫内缺氧的动物模型。

芎芷地龙汤对偏头痛模型中脑导水管周围灰质c-fos和NOS蛋白共存表达的影响

目的研究芎芷地龙汤对偏头痛模型中脑导水管周围灰质c-fos和NOS蛋白共存表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机为4组:生理盐水组、模型组、舒马普坦组、中药治疗组。皮下注射NTG注射剂复制实验性偏头痛动物模型,经药物干预后在4小时、6小时两个时间点取材,采用免疫组化双标染色法测定导水管周围灰质c-fos和NOS的免疫阳性神经元的兴奋状态及其共存表达情况。结果模型组c-fos阳性细胞数和NOS阳性细胞数增多,4小时多于6小时,两个时间点的阳性细胞数与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01)。中药组和舒马普坦组c-fos阳性细胞数和NOS阳性细胞数减少,两个时间点的阳性细胞数与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论芎芷地龙汤可以减少由硝酸甘油诱导的致痛物质c-fos、NOS的表达,从而进一步减少导水管周围灰质神经元的兴奋性,阻止痛觉信息的传递。

血浆同型半胱氨酸、NO致COPD的发展机制研究

目的分析慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)的关系及意义,并探讨其对COPD的作用机制。方法测定54例AECOPD患者血浆tHcy、NO、NOS、hs-CRP水平,并与60例正常对照组比较。结果 AECOPD患者血浆tHcy和hs-CRP与正常对照组比较均显著性增高(P<0.01),NO和NOS与正常对照组比较均显著性降低(P<0.01)。tHcy与NO、NOS呈负相关(r分别是-0.57、-0.49),与hs-CRP呈正相关(r是0.48),(P<0.01)。结论 COPD患者血浆存在低NO和高Hcy,二者参与COPD的氧化应激和炎症反应,加重了COPD病情的发展。

钩藤碱对AngⅡ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的研究钩藤碱（rhynchophylline，Rhy）对血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AngⅡ）诱导大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）增殖的抑制作用及机制。方法采用细胞计数法和MTT比色法检测Rhy对AngⅡ诱导大鼠VSMCs增殖的影响；测定Rhy对AngⅡ作用的VSMCs上清液一氧化氮（nitric oxide，NO）含量和一氧化氮合酶（constitutive nitric oxide synthase，cNOS）活性的影响；实时定量聚合酶链式反应（RT—PCR）检测VSMCs中c—myc、NOS和高血压相关基因-1（hypertension relatedgene-1，rHRG-1）mRNA的表达.结果Rhy（3×10^-6～3×10＆-7mol·L^-1）呈浓度依赖性地抑制AngⅡ诱导大鼠VSMCs的增殖，升高细胞上清液中N0的含量和NOS活性，降低c—myc mRNA，升高rHRG-1和NOS mRNA的表达.结论Rhy明显抑制AngⅡ诱导大鼠VSMCs的增殖，机制可能与增加VSMCs中NOS活性并促进NO的合成和释放以及下调c—myc、上调NOS和rHRG-1 mRNA的表达有关。

急性颅脑损伤患者血清NO、NOS和hs-CRP检测的临床意义

目的:探讨了急性颅脑损伤患者血清NO、NOS和hs-CRP水平的变化及临床意义。方法:应用生化法和免疫比浊法对33例急性颅脑损伤患者进行了血清NO、NOS和hs-CRP测定,并与35名正常健康人作比较。结果:在治疗前急性颅脑损伤患者血清中NO水平非常显著地低于正常人组(P<0.01),而NOS、hs-CRP水平则非常显著地高于正常人组(P<0.01),经治疗一个月后则与正常人组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:观察血清中NO、NOS和hs-CRP水平的变化对研究急性早期颅脑损伤的病理生理变化,判断疗效及观察预后均具有重要的临床意义。

微量海人酸注入大鼠延髓网状背侧亚核诱导的Fos表达及其与NADPH-d的共存(英文)

目的 :研究大鼠网状背侧亚核的功能传出通路及该通路上NADPH d的分布。 方法 :将微量海人酸注入大鼠延髓网状背侧亚核 ,2h后灌注 ,脑片进行NADPH d组织化学和Fos免疫组化染色。 结果 :Fos阳性细胞主要分布于中缝背核 (DR)、中缝大核 (NRM )、蓝斑 (LC)、中脑导水管周围灰质腹外侧 (vlPAG)和下丘脑室旁核。Fos/NADPH d双标细胞主要分布于巨细胞网状核、下丘脑室旁核和中缝大核。 结论 :大鼠延髓网状背侧亚核与脊髓上中枢存在广泛的功能联系 ,而且在延髓网状背侧亚核的功能传出通路上有一氧化氮合酶的分布。

芎芷地龙汤对偏头痛模型三叉神经脊束核c-fos和NOS蛋白共存表达的影响

目的:研究芎芷地龙汤对偏头痛模型三叉神经脊束核c-fos和NOS蛋白共存表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠随机为4组:生理盐水组、模型组、舒马普坦组、中药组。皮下注射NTG注射剂复制实验性偏头痛动物模型,经药物干预后在4h、6h两个时间点取材,采用免疫组化双标染色法测定三叉神经脊束核细胞癌基因fos(celluar oncogene,c-fos)和一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)的免疫阳性神经元的兴奋状态及其共存表达情况。结果:模型组c-fos阳性细胞数和NOS阳性细胞数增多,4h多于6h,两个时间点的阳性细胞数与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.01)。中药组和舒马普坦组c-fos阳性细胞数和NOS阳性细胞数减少,两个时间点的阳性细胞数与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:芎芷地龙汤可以减少由硝酸甘油诱导的致痛物质c-fos、NOS的表达,从而进一步减少三叉神经脊束核神经元的兴奋性,阻止痛觉信息的传递。

兔肝外胆道内脏感觉传导途径的实验研究

目的:通过动物造模观察与内脏痛相关核团中C-fos、一氧化氮合酶(NOS)的表达,探讨内脏感觉传导途径。方法:新西兰大白兔36只,随机分为假手术a组、假手术b组、胆管注射大肠杆菌组、胆囊内注射大肠杆菌组、胆管扩张组、扩张Oddis括约肌组共6组,每组6只,取脊髓、脑干以及间脑作连续切片后,采用HE染色光镜定位及免疫组织化学技术检测各组脑和脊髓不同部位C-fos、NOS的表达,并进行比较。结果:胆管注射大肠杆菌组、胆囊内注射大肠杆菌组在脊髓(C5-7、T6-9)后角、薄束核、楔束核、丘脑腹后外侧核、孤束核中NOS的阳性表达明显高于假手术a组(P<0.05);胆管扩张组脊髓(C5-7、T6-9)后角、薄束核、楔束核、孤束核、丘脑腹后外侧核中C-fos的阳性表达明显高于假手术b组(P<0.05);扩张Oddis括约肌组脊髓后角(C5-7)和孤束核中C-fos的阳性表达明显高于假手术b组(P<0.05)。结论:胆囊和胆管引起的疼痛均与脊髓(C5-7、T6-9)后角、薄束核、楔束核、丘脑腹后外侧核、孤束核有关,推测由交感和迷走神经双重支配;Oddis括约肌引起的疼痛与孤束核有关,推测由迷走神经传入。

脑梗死患者血清一氧化氮及高密度脂蛋白胆固醇含量测定的意义

目的 探讨一氧化氮 (NO)、一氧化氮合成酶 (NOS)和高密度脂蛋白胆固醇 (HDL -c)在脑梗死患者发病过程中的含量变化及其意义。方法 检测 5 3例脑梗死急性期患者和 40例健康对照组血清中的NO、NOS和HDL -c的含量 ,并进行显著性检验和相关性分析。结果 与对照组比较 ,脑梗死患者NO和NOS含量显著高于对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,其中皮层动脉梗死组高于腔隙性梗死组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。而脑梗死组HDL -c显著低于对照组 ,其中皮层动脉梗死组低于腔隙性梗死组 (P <0 0 1) ,NO与HDL -c呈现负相关关系 (r =- 0 5 5 6 ,P <0 0 1)。结论 脑梗死患者体内自由基反应及HDL -c合成失去平衡 ,观察NO、NOS及HDL -c值的变化具有重要意义。

无水酒精阻滞大鼠腹腔神经丛后脊髓、孤束核C-FOS和NOS-1的表达

目的:通过免疫组化的方法研究无水酒精阻滞大鼠腹腔神经丛后脊髓和延髓孤束核内CFOS和NOS1的表达。材料和方法:对70只Wistar大鼠实施手术,建立实验动物模型。分5组于术后不同时间取得脊髓和延髓样本,并用标准方法对其进行CFOS和NOS1免疫组化染色,观察脊髓和延髓孤束核CFOS和NOS1的表达。结果:无水酒精阻滞后脊髓后角、延髓孤束核神经元细胞内均有CFOS和NOS1表达。结论:无水酒精阻滞腹腔神经丛后,短时间内脊髓后角和延髓孤束核内CFOS和NOS1表达阳性,表明FOS和NOS1与内脏信息在脊髓水平的传导有关。CFOS和NOS1参与了内脏信息在孤束核内的传导。

通冠胶囊治疗冠心病作用机制的实验研究

目的:通过动物实验观察通冠胶囊对实验性兔急性心肌缺血内皮功能及血脂的影响,以期阐明该方药治疗冠心病的药效学机制。方法:实验动物随机分为5组,通过结扎麻醉兔的冠状动脉左前降支中段,造成急性心肌缺血模型,采用比色法测定NO、NOS,直接法测定LDL-C。结果:急性心肌缺血时,血清NO、NOS水平下降,LDL明显升高,通冠胶囊可以提高血清NO、NOS浓度,降低LDL-C水平。结论:通冠胶囊有提高血清NO、NOS,拮抗LDL-C的作用,保护血管内皮细胞,降低血脂,改善心肌缺血,从而达到防治冠心病的作用。