基于NO-cGMP通路探讨地龙蛋白对糖尿病大鼠勃起功能障碍的干预作用及机制

目的探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠的干预作用及其机制。方法60只大鼠随机选取10只作为空白组,其余50只通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病大鼠模型,8周后使用阿朴吗啡(APO)诱导筛选符合DMED症状的大鼠模型,将DMED大鼠随机分为模型组、西地拉非组及地龙蛋白低、中、高剂量组,相应药物干预4周后,检测大鼠平均颈动脉压(MAP)和阴茎海绵体最大内压(ICPmax)以评估大鼠勃起功能,试剂盒检测阴茎海绵体组织SOD活性及NO、cGMP、MDA水平,RT-qPCR法检测阴茎海绵体组织eNOS、cGMP mRNA表达,免疫组化和Western blot法检测eNOS蛋白表达,HE染色观察阴茎海绵体病理结构的改变。结果与空白组比较,模型组大鼠血糖、阴茎海绵体组织MDA水平升高(P<0.01),体质量、ICPmax/MAP、阴茎海绵体组织SOD活性及NO、cGMP水平、阴茎海绵体组织eNOS mRNA和蛋白表达均降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组以上指标均有改善(P<0.01)。空白组阴茎海绵体组织结构正常;模型组阴茎海绵体组织肌纤维、胶原纤维断裂,拧结明显;各给药组阴茎海绵体组织病理损伤较模型组均有不同程度的改善。结论地龙蛋白具有改善糖尿病大鼠勃起功能障碍的作用,其机制可能与抑制氧化应激、上调大鼠阴茎海绵体NO-cGMP通路表达有关。

五子衍宗方及其拆方对大鼠糖尿病性勃起功能障碍、生精细胞凋亡及NO-cGMP通路的影响

目的探讨五子衍宗方及其拆方对糖尿病(DM)性勃起功能障碍(ED)的作用及机制。方法取100只SD雄性大鼠,随机选取10只作为正常对照组,余90只以链脲佐菌素(STZ)建立DM大鼠模型,然后以阿朴吗啡(APO)阴茎勃起实验筛选DM性ED大鼠模型。将成模大鼠随机分为模型组、涩精组、补肾组以及全方组,涩精组、补肾组、全方组分别灌服拆方Ⅰ号药液(0.23g/kg)、拆方Ⅱ号药液(0.85g/kg)、五子衍宗方药液(1.08g/kg),正常对照组与模型组分别灌服等体积蒸馏水,连续30 d。灌胃结束后,计算各组大鼠阴茎海绵体内压(ICP)/平均动脉压(MAP),观察生精细胞凋亡情况,测定总NOS、i NOS(诱导型NOS)、c NOS(结构型NOS)活力和c GMP(环磷酸鸟苷)的含量。结果与模型组比较,涩精组、补肾组、全方组的ICP/MAP显著增高(P<0.01),生精细胞凋亡指数显著降低(P<0.01),总NOS、i NOS、c NOS活力以及c GMP含量均明显增加(P<0.05);与涩精组比较,补肾组、全方组的ICP/MAP显著增高(P<0.01),补肾组的生精细胞凋亡指数无明显差异(P>0.05),而总NOS、i NOS、c NOS活力以及c GMP含量则较高(P<0.05);与补肾组比较,全方组的ICP/MAP显著增高(P<0.01),生精细胞凋亡指数明显降低(P<0.05),总NOS、i NOS、c NOS活力以及c GMP含量明显增高(P<0.05)。结论五子衍宗方能明显改善大鼠糖尿病性勃起功能障碍的生殖及勃起功能,其机制可能与降低生精细胞凋亡,提高总NOS、i NOS、c NOS活力以及c GMP含量水平而影响NO-c GMP通路有关。

益肾通络方对大鼠勃起功能障碍及NO-cGMP通路的影响

目的:探究益肾通络方对大鼠勃起功能障碍(ED)及一氧化氮-环磷酸鸟苷(NO-cGMP)通路的影响。方法:构建ED模型大鼠,随机分为模型组,益肾通络方低、中、高剂量组,以及西地那非组,每组12只;另取12只SD大鼠设为对照组。采用阿扑吗啡实验检测大鼠勃起功能,测定最大阴茎海绵体内压(Max ICP)/平均动脉压(MAP),ELISA检测血清睾酮水平、阴茎组织一氧化氮合酶(NOS)活性及NO和cGMP水平,Western blot法检测阴茎组织NOS和鸟苷酸环化酶(GC)的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠勃起次数显著减少,Max ICP/MAP、血清睾酮水平、阴茎组织NOS活性、NO和cGMP水平及NOS和GC蛋白表达均显著降低(P<0.05),勃起潜伏期显著延长(P<0.05);与模型组比较,益肾通络方低、中、高剂量组和西地那非组大鼠勃起次数显著增多,Max ICP/MAP、血清睾酮水平、阴茎组织NOS活性、NO和cGMP水平及NOS和GC蛋白表达均显著升高(P<0.05),勃起潜伏期显著缩短(P<0.05),且益肾通络方各组之间呈剂量依赖性(P<0.05);益肾通络方高剂量组与西地那非组相比,各指标的差异无统计学显著性(P>0.05)。结论:益肾通络方可提高血清睾酮水平并减轻大鼠ED,这可能是通过上调NO-cGMP通路实现的。

蒙医不同针刺法对慢性应激抑郁大鼠额叶神经元形态及NO-cGMP信号通路的影响

目的观察蒙医不同针刺法对抑郁模型大鼠额叶神经元及NO-cGMP信号通路的影响,探讨蒙医不同针刺法抗抑郁作用的生物学机制。方法雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、百忧解组、蒙医银针组、蒙医三根平衡针组、针药结合组,每组8只。除正常组外,其余各组大鼠孤养,不可预知的应激刺激前1 h,接受不同方式的治疗。28 d后观察大鼠行为学改变,断头取大鼠海马及额叶组织,不同染色观察额叶神经元形态改变,应用硝酸还原酶法和放射免疫法检测海马及额叶NO-cGMP含量。结果尼氏染色结果显示,模型组大鼠额叶神经元锥体细胞形态不完整、排列紊乱、数量明显减少,尼氏体变浅、大部分模糊不清;蒙医三根平衡针组、蒙医银针组大鼠额叶神经元形态尚可,尼氏体呈深蓝色。HE染色结果显示,模型组大鼠额叶神经元胞膜破裂、结构不清楚,部分细胞脱落而形成空泡;蒙医三根平衡针组、蒙医银针组大鼠额叶细胞排列较规则,细胞层次较丰富,神经元胞膜较完整。与正常组比较,模型组额叶及海马NO-cGMP含量明显升高,各治疗组均能不同程度逆转此变化。结论蒙医不同针刺法可能通过调控NO-cGMP的表达而达到治疗抑郁症的目的。

基于NO-cGMP信号转导通路交泰丸对慢性温和不可预知性应激抑郁大鼠的抗抑郁作用研究

目的基于一氧化氮-环磷酸鸟苷酸(NO-cGMP)信号转导通路探讨交泰丸对慢性温和不可预知性应激(CUMS)抑郁模型大鼠的抗抑郁作用。方法采用CUMS进行大鼠抑郁模型造模,实验第21天各给药组连续ig治疗药物14 d。采用ELISA法检测大鼠海马组织及血浆中NO和cGMP水平;RT-PCR法检测大鼠海马组织中一氧化氮合酶(包括iNOS、nNOS)及NMDA受体亚单位NR1、NR2A和NR2B基因mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠海马组织及血浆中NO、cGMP水平明显升高;大鼠海马组织中iNOS mRNA、nNOS mRNA、NR1 mRNA、NR2A mRNA、NR2B mRNA表达显著升高。与模型组相比,交泰丸高、中、低剂量(3.00、1.50、0.75 g/kg)及阳性药盐酸氟西汀均可逆转以上指标的改变。结论交泰丸可通过调节NO-cGMP信号转导通路达到抗抑郁作用。