异基因骨髓干细胞移植后重建NOD小鼠T淋巴细胞亚群比值的研究

目的:探讨骨髓干细胞移植对NOD小鼠免疫系统重建和预防糖尿病发生的机制。方法:①21只6周龄NOD雌性鼠接受9.5cGy全身照射后随机分为两组,移植组10只,对照组11只;②每周监测血常规和血糖的变化;③小鼠饲养至发生糖尿病时或至30周龄时处死,摘取脾脏分离淋巴细胞,通过流式细胞术检测移植鼠与非移植鼠脾脏CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+淋巴细胞;采用ELISA法测定血清中IFN-γ水平;吉姆萨染色法计数小鼠骨髓分裂相中Y染色体所占比例,检测嵌合程度并作为细胞植活标记。结果:①移植后NOD受鼠经骨髓细胞的性别染色体检测显示均植入成功;②实验组糖尿病发病率显著低于对照组(P<0.05),且发病时间与对照组比较明显延缓(P<0.05);③实验组和对照组CD3+T细胞、CD4+T细胞比较差异无统计学意义(P>0.05),但实验组CD8+T细胞显著高于对照组(P<0.05)。实验组的CD4+/CD8+比值显著低于对照组(P<0.05),血清IFN-γ数值也显著低于对照组水平(P<0.01)。结论:NOD鼠在通过异基因骨髓干细胞移植后,能降低糖尿病的发生率和延缓糖尿病的发生,可能与移植后免疫重建,下调CD4+/CD8+T细胞的比值,使Th1/Th2极化向Th2偏移等机制相关,异基因骨髓干细胞移植可能成为防治1型糖尿病的新途径。