人急性B淋巴细胞白血病-NOD/SCID/IL2rγnull新生小鼠异种移植模型的建立

本研究旨在应用NOD/SCID/IL2rγnull新生小鼠建立人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的异种移植模型。NOD/SCID/IL2rγnull新生期(出生48 h之内)小鼠经亚致死剂量(100 cGy)137Cs全身照射后,由面静脉输注FACSAria流式细胞仪分选纯化的B-ALL患者骨髓CD3-CD4-CD8-CD34+CD19+细胞,于移植后8-12周用流式细胞术检测受鼠外周血、骨髓和脾脏中人源细胞的植入水平及其免疫表型,并通过HE染色评价人源B-ALL细胞在受鼠各组织器官中的迁移浸润能力。结果表明,在接受B-ALL患者CD34+CD19+细胞移植的受鼠外周血、骨髓和脾脏细胞中,不仅检测到了不同程度的人源B-ALL(huCD45+CD19+)细胞的植入〔(83.36±10.05)%,(93.88±5.05)%,(88.31±5.01)%〕,而且植入细胞具有与B-ALL患者相似的细胞形态和免疫表型特征。此外,人源B-ALL细胞广泛迁移浸润到受鼠的肝脏、肺脏、肾脏和脑等组织器官中。结论:NOD/SCID/IL2rγnull新生小鼠模型能够支持B-ALL患者CD34+CD19+细胞的高水平植入,是对人B-ALL进行体内功能性研究的新型异种移植模型。

苦参素注射液对TNBS诱导的结肠炎大鼠结肠黏膜NOD2及IL-6的影响

目的:研究NOD2在实验性大鼠结肠炎发病机制中的作用,并探讨苦参素注射液(OMT)对实验性大鼠结肠炎的治疗作用和机制。方法:将40只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、美沙拉嗪组和OMT组,每组10只。正常对照组未行造模,其余3组均采用三硝基苯磺酸(TNBS)造模。OMT组大鼠给予肌肉注射OMT,美沙拉嗪组大鼠给予美沙拉嗪混悬液灌胃,模型组和正常对照组大鼠均以蒸馏水灌胃,观察实验大鼠结肠黏膜大体形态及组织病理评分,并采用免疫组化法检测大鼠结肠黏膜NOD2蛋白表达,ELISA法检测实验大鼠结肠黏膜IL-6的表达。结果:模型组大鼠结肠黏膜NOD2蛋白、IL-6表达较正常对照组明显升高(P<0.01),美沙拉嗪组、OMT组大鼠结肠黏膜NOD2蛋白、IL-6表达较模型组显著降低(P<0.01)。OMT组大鼠结肠黏膜损伤、结肠黏膜病理组织学评分较模型组明显改善。结论:结肠黏膜NOD2蛋白过度表达、IL-6分泌增多参与了溃疡性结肠炎的发生、发展过程,而OMT可以通过抑制NOD2蛋白过度表达、降低IL-6分泌,起到减轻结肠黏膜炎症,保护结肠黏膜的作用。

α-胞衬蛋白siRNA对干燥综合征模型NOD小鼠血清中IL-2、IL-6和TGF-β的影响

目的:观察α-胞衬蛋白(α-Fodrin)的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对干燥综合征动物模型非肥胖糖尿病(NOD)小鼠细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的影响及泪腺的病理改变。方法:0.5 mg/kg体重的pGFPV-RS空载体和α-Fodrin-siRNA表达载体分别尾静脉注射NOD小鼠,1周/次,共2次。注射后2、4、6 d尾部采血,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中细胞因子IL-2、IL-6和TGF-β的表达;注射后7 d病理切片,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠泪腺的病理变化。结果:注射后2 d和4 d siRNA 1组和siRNA2组NOD小鼠血清中IL-6的浓度明显低于对照组和空载体组,差异有统计学意义;而对照组和空载体组间、siRNA 1组和siRNA 2组间比较差异无统计学意义。注射后2、4和6 d siRNA 1组和siRNA 2组NOD小鼠血清中TGF-β和IL-2的浓度较对照组和空载体组升高,但差异无统计学意义。病理切片结果显示,siRNA 1组和siRNA 2组与对照组和空载体组比较,小鼠泪腺淋巴细胞浸润减少。结论:NOD小鼠注射α-Fodrin siRNA载体后,血清中IL-6的水平降低、IL-2和TGF-β的浓度升高,泪腺淋巴细胞浸润减少,提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎症反应。

^(125)I-IL-2在自身免疫胰岛炎NOD小鼠中核素显像应用的探讨

目的探讨IL-2作为自身免疫胰岛炎核素显像药物的可行性。方法将38只雌性未发病NOD小鼠和26只Balb/c小鼠随机分为5个时间组,尾静脉注射酶法标记的125I-IL-2,相应时间处死后测定血液和腹腔各脏器放射性。另3只NOD小鼠在注射131I-IL-230min后行SPECT-CT仪扫描显像。结果注射后10至120min,NOD小鼠胰腺125I-IL2聚集性明显高于Balb/c小鼠,且胰腺放射性与胰岛炎程度呈线性正相关(R2=0.614~0.776,P<0.05);但胰腺/周围组织放射性比值普遍较低;去除脾脏、肝脏和双肾,NOD小鼠胰腺方可显像。结论125I-IL-2在自身免疫胰岛炎的NOD小鼠胰腺有相对高聚集性,但有较高放射性背景,影响局部显像效果。

1.25（OH）2D3对NOD小鼠心肌超微结构的影响

目的 观察NOD小鼠在1,25（OH）2D3治疗前后心肌超微结构的改变,以探讨1.25（OH）2D3对心脏的保护作用. 方法 NOD小鼠（19只）用环磷酰胺诱发建立糖尿病模型后,随机分为1.25（OH）2D3治疗组及糖尿病模型组,每组6只.观察用药前及用药4周后糖尿病小鼠血糖及心肌超微结构的变化. 结果 模型组小鼠心肌纤维稀疏,肌丝扭曲部分断裂,z线增宽,M线、H带模糊不清.线粒体肿胀变形,嵴稀疏,排列紊乱,基底膜增厚,间质胶原纤维增生.1.25（OH）2D3治疗组小鼠心肌细胞中,肌丝排列整齐,结构清晰,肌纤维无明显断裂,线粒体肿胀较未治疗组明显减轻,心肌内微血管基底膜较模型组薄. 结论 1.25（OH）2D3可减轻实验性Ⅰ型糖尿病小鼠心肌超微结构的病变,对心肌有一定的保护作用.

NOD鼠体内CD_4^+NKG2D^+T细胞与CD_8^+T细胞间关系

目的探讨NOD鼠体内CD_4^+NKG2D^+T细胞与CD_8^+T细胞间关系。方法动态监测NOD鼠外周血中CD_4^+NKG2D^+T及CD8+NKG2D^+T细胞在不同周龄频率。利用IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,对其外周血中CD_4^+NKG2D+/CD_4^+T及CD8+NKG2D+/CD_8^+T细胞频率进行分析。将磁珠分选所得CD_4^+NKG2D^+T细胞分别与经CFSE标记的纯CD_4^+NKG2D-T细胞、CD_8^+T细胞共培养4 d,检测体系中CD_4^+NKG2D-T细胞、CD_8^+T细胞CFSE的荧光强度变化。结果 NOD鼠外周血CD_4^+NKG2D+/CD_4^+T及CD8+NKG2D+/CD_8^+T细胞频率均随其1型糖尿病疾病进程发展逐渐升高,且二者之间呈正相关。IGRP206-214特异性CTL清除的NOD鼠,外周血中CD_4^+NKG2D+/CD_4^+T细胞频率随CD8+NKG2D+/CD_8^+T细胞频率降低显著下降。与单独培养的CD_4^+NKG2D-T细胞相比,加入CD_4^+NKG2D^+T细胞的培养体系中,CD_4^+NKG2D-T细胞增殖加快。但CD_4^+NKG2D^+T细胞对CD_8^+T增殖作用不明显。结论 NOD鼠体内存在着一群与1型糖尿病疾病进程正相关的CD_4^+NKG2D^+T细胞,且该群细胞极有可能是通过直接作用于CD_4^+NKG2D-T细胞而间接对CD_8^+T细胞产生作用。

去甲斑蝥素介导NOD2/RIP2/NF-κB通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的探究去甲斑蝥素(NCTD)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBI)的保护作用及其分子机制。方法将50只新生大鼠随机分为空白组、模型组及去甲斑蝥素低、中、高剂量组,每组各10只。空白组大鼠行假手术(不结扎、不缺氧),其他三组采用Rice-Vannucci法建立HIBI模型,去甲斑蝥素低、中、高剂量组分别灌胃0. 025 mg/(kg·d)、0. 05 mg/(kg·d)、0. 1 mg/(kg·d)的NCTD,连续灌胃7 d,空白组和HIBI组采用生理盐水灌胃。对大鼠神经功能缺陷评分并检测其脑积水量,采用TUNEL染色法检测大鼠脑组织凋亡情况,Western blot法检测脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、核苷酸结合低聚域蛋白2(NOD2)、受体相互作用蛋白2(RIP2)和核因子-κB p65(NF-κB p65)的表达,生化试剂盒检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,免疫组化法检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达,ELISA法检测炎症因子白介素-6(IL-6)、白介素-18(IL-18)和白介素-1β(IL-1β)的含量。结果与空白组相比,HIBI大鼠神经功能评分、脑积水量、脑组织细胞凋亡率、MDA、LDH、ICAM-1、IL-6、IL-18、IL-1β、Bax、NOD2、RIP2及p-NF-κB p65的表达显著上调,SOD水平显著下调;NCTD可剂量依赖性地下调大鼠神经功能评分、脑积水量、脑组织细胞凋亡率、MDA、LDH、ICAM-1、IL-6、IL-18、IL-1β、Bax、NOD2、RIP2及p-NF-κB p65的表达,并剂量依赖性地上调SOD水平(P <0. 05)。结论去甲斑蝥素可呈剂量依赖性减少缺氧缺血对新生大鼠造成的脑损伤,可能通过凋亡、氧化应激、炎症反应及NOD2/RIP2/NF-κB通路起到保护作用。

NOD小鼠人源化后CD4^+T和CD8^+T细胞及其分泌IFN-γ与IL-17的频率变化及意义

目的观察分析NOD小鼠和NOD.β2mnullHHD小鼠Ⅰ型糖尿病(Type1 diabetes,T1D)发病情况以及脾T细胞亚群的频率及功能差异,揭示CD4+T和CD8+T细胞亚群在HLA-A*0201转基因NOD小鼠和NOD小鼠的T1D发病中作用的异同。方法采用测量血糖的方法观察2种小鼠的发病情况,采用流式细胞术分析小鼠脾淋巴细胞CD3+CD4+T、CD3+CD8+T细胞亚群频率以及这2群细胞分泌IL-17和IFN-γ频率的差异。结果 NOD.β2mnullHHD小鼠较NOD小鼠发病早且严重;NOD.β2mnullHHD小鼠脾淋巴细胞的CD3+CD4+T细胞亚群显著高于NOD小鼠,NOD.β2mnullHHD小鼠脾淋巴细胞的CD3+CD8+T细胞亚群显著低于NOD小鼠;2种小鼠的脾淋巴细胞中CD3+CD4+IL-17+T细胞亚群与CD3+CD8+IL17+T细胞频率无差异;NOD.β2mnullHHD小鼠脾淋巴细胞的CD3+CD4+IFN-γ+T和CD3+CD8+IFN-γ+T细胞亚群频率显著高于NOD小鼠。结论 HLA-2.1分子转入NOD小鼠后HLA-2.1分子加速了HLA-A*0201转基因NOD小鼠T1D的发病进程;NOD.β2mnullHHD小鼠相对NOD小鼠的T1D发病更早、病情更重,这与CD3+CD4+T和CD3+CD8+T细胞分泌的IFN-γ显著相关,而与IL-17无关,为T1D防治的临床转化基础研究提供实验数据。

新生期胰岛素干预对NOD鼠1型糖尿病的影响及其机制

目的 :探讨新生期胰岛素干预对NOD鼠 1型糖尿病的预防作用及其机制。方法 :采用NOD鼠作动物模型 ,新生期胰岛素干预后检测血糖、尿糖及糖尿病发病率 ,HE染色观察胰岛炎 ,用RT PCR法检测胰腺干扰素γ(IFN γ)、肿瘤坏死因子α(TNF α)、白介素 10 (IL 10 ) ,免疫组化检测胰腺胰岛细胞Bcl 2和Bax表达。结果 :新生期胰岛素干预组糖尿病发病率为31 6 % ,明显低于对照组 (72 2 % ) (P <0 0 1) ,且胰岛炎严重程度也明显减轻 (P <0 0 1)。胰腺TNF α、IFN γmRNA的表达较对照组显著降低 (P <0 0 1) ;IL 10mRNA的表达增强 (P <0 0 1)。胰腺胰岛Bcl 2表达明显增强 ,而Bax表达较对照组明显减弱。结论 :新生期胰岛素干预可以预防NOD鼠糖尿病的发生 ,其机制可能与纠正Th1型细胞因子与Th2型细胞因子比例失衡 ,进而上调胰岛β细胞Bcl

芍药苷预处理对大鼠心肌缺血-再灌注损伤氧化应激的保护作用及对Nrf-2/TXNIP/NLRP-3信号通路的影响

目的探讨芍药苷(PF)对心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)大鼠氧化应激的影响及其可能作用机制。方法选取65只SD大鼠采用结扎冠状动脉(冠脉)左前降支建立MIRI模型,造模成功后随机分为模型组、PF低、高剂量(60 mg/kg、120 mg/kg)组和西药(1 mg/kg盐酸地尔硫卓)组各15只,另设对照组。检测大鼠天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平;HE染色观察心肌组织病理学变化;RT-PCR和Western blot检测心肌组织核因子E2相关因子2(Nrf2)、硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)、NOD样受体蛋白3(NLRP-3)mRNA和蛋白表达情况。结果与模型组比较,各实验组AST、CK、CK-MB、LDH、MDA水平、TXNIP、NLRP-3 mRNA和蛋白水平降低,GSH-Px、SOD、CAT水平、Nrf2 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05)。与PF低剂量组比较,PF高剂量组以上指标效果更佳(P<0.05)。结论PF可减轻MIRI大鼠氧化应激,改善心肌损伤,可能与Nrf2/TXNIP/NLRP-3信号通路有关。

重组ANGPT2及抗体对白血病荷瘤小鼠ANGPT1/2表达的影响

目的应用重组的ANGPT2及ANGPT2单克隆抗体注射急性髓系白血病荷瘤小鼠,了解荷瘤小鼠肿瘤组织中ANGPT1/2表达的变化.方法应用HL-60细胞构建急性髓系白血病模型,同时给予小鼠注射重组的ANGPT2和Anti-ANGPT2,应用Western blot检测急性髓系白血病小鼠肿瘤组织中的ANGPT1/2蛋白的表达.结果应用重组的ANGPT2,对照组与实验组中的ANGPT1和ANGPT2蛋白的表达差异无统计学意义;应用Anti-ANGPT2,对照组与实验组中的ANGPT2蛋白的表达差异无统计学意义,ANGPT1蛋白的表达明显低于对照组.结论进行ANGPT2单克隆抗体实验时,需要阻断VEGF以达到理想的结果.

当归六黄汤对非肥胖性糖尿病小鼠胰岛炎和Bax、Bcl-2表达的影响

目的:不同剂量下当归六黄汤对非肥胖型糖尿病的预防效果及可能机制。方法:50只NOD小鼠按随机数字表法分为模型组、阳性药组(二甲双胍)、L组、M组及H组。培养4周后每组随机抽取3只小鼠进行OGTT与血清胰岛素检测,免疫组化观察小鼠胰岛Bax、Bcl-2的表达,余下小鼠观察至26周分析糖尿病的发病率。结果:4周后阳性药组、M组、H组整体血糖水平降低且H组糖耐量能力最高,各组血清胰岛素水平(F=21.102,P=0.014)、糖尿病发病率不完全相同,阳性药组、M组、H组均与模型组存在显著差异。秩和检验显示各组胰岛炎评分存在明显差异,阳性药组、M组、H组中Bax、Bax/Bcl-2水平明显减少,且剂量越高效应越明显,而Bcl-2表达水平则相反。结论:当归六黄汤对非肥胖型糖尿病有一定预防效果,其机制可能与减轻胰岛炎症、降低胰岛细胞Bax的表达、增加Bcl-2的表达有关。

COX-2/NLRP3/IL-18信号通路在尼罗替尼对癫痫大鼠神经保护中的作用

目的探讨尼罗替尼对癫痫大鼠神经保护的机制及COX-2/NLRP3/IL-18信号通路的作用。方法采用戊四唑(PTZ)腹腔注射法诱导制作癫痫模型大鼠48只,将其随机分为模型组、SC-58125(即COX-2抑制剂)组、尼罗替尼组、尼罗替尼+SC-58125组,每组12只;另取12只正常大鼠为对照组。SC-58125组每天给予10 mg/kg的SC-58125灌胃,尼罗替尼组每天给予25 mg/kg尼罗替尼灌胃,尼罗替尼+SC-58125组每天给予25 mg/kg尼罗替尼和10 mg/kg SC-58125灌胃,对照组和模型组给予等量溶剂灌胃,每天1次,连续4周。末次给药1 h后,除对照组外,其余各组再次腹腔注射PTZ,观察大鼠癫痫发作情况,记录最终癫痫发作评分、癫痫发作潜伏期及持续时间。然后每组随机选取6只大鼠,断头取脑,分离海马组织,进行苏木精-伊红染色观察海马组织病理学变化,Western blotting法检测海马组织COX-2/NLRP3/IL-18通路相关蛋白表达。结果对照组无癫痫发作,癫痫模型大鼠最后一次注射PTZ后表现出明显的癫痫发作症状,可见海马CA1区神经元损伤。与模型组相比,SC-58125组和尼罗替尼组癫痫最终发作评分降低和癫痫发作持续时间缩短、发作潜伏期显著延长、海马CA1区神经元损伤减轻(P均<0.05)。与对照组相比,模型组海马组织COX-2、NLRP3、Cleaved Caspase-1和IL-1β、IL-18蛋白表达升高(P均<0.05);与模型组相比,SC-58125组和尼罗替尼组COX-2、NLRP3、Cleaved Caspase-1和IL-1β、IL-18蛋白表达降低(P均<0.05);尼罗替尼+SC-58125组COX-2、NLRP3、Cleaved Caspase-1和IL-1β、IL-18蛋白表达低于SC-58125组和尼罗替尼组(P均<0.05)。结论尼罗替尼可能通过抑制COX-2/NLRP3/IL-18信号通路降低PTZ诱导大鼠癫痫发作和海马神经元损伤。

VPA联合HA14-1对Bcl-2高表达的BALL-1细胞作用的实验研究

目的:观察体内外丙戊酸(VPA)和HA14-1联合应用对Bc l-2高表达的白血病细胞的杀伤效能。方法:(1)将BALL-1分为对照组、VPA组、HA14-1组、VPA+HA14-1组,作用后流式细胞法检测各组凋亡率、Bc l-2的平均荧光指数(MFI)以及胱冬肽酶(caspase)3、8和9的含量;(2)NOD/SC ID鼠在接种BALL-1后24 h按(1)分组进行实验。记录各组小鼠的存活时间;流式细胞仪检测各组小鼠外周血、骨髓、肝、肺、脾组织中CD19的表达。结果:(1)HA14-1+VPA组凋亡率高达(76.5±6.9)%,与另3组比较P<0.01。HA14-1组和联合作用组中Bc l-2低于其它两组,caspase 9和3的含量则较高,差异显著;联合作用组上述3种指标与其它组的差异更显著(P<0.01)。Caspase 8在各组间无显著差异。(2)HA14-1+VPA组小鼠生存(87.5±4.5)d,显著长于其它3组,而其它3组之间无明显差异。HA14-1+VPA组CD19在外周血、骨髓、肝、脾中的表达显著低于另3组。结论:HA14-1与VPA联合用药,可克服Bc l-2高表达造成的对VPA的抗性。

胰岛素A链拮抗性HLA-A*0201限制性CTL表位或其改造肽的设计和鉴定

目的设计并鉴定胰岛素A链拮抗性HLA-A*0201限制性CTL表位mInsA_(2-10)或其APLs,为T1D防治的临床转化基础研究提供良好的实验依据。方法腹腔注射可溶性肽mInsA_(2-10)与无关对照肽,通过血糖监测判断肽mInsA_(2-10)是否有T1D的防治作用;通过Insight II和Discover软件获得mInsA_(2-10)和其APLs的分子动力学模拟参数,选择候选的APLs,再通过检测它们的相对亲和力及各候选APLs体外抑制mInsA_(2-10)自身反应性CD8+T细胞的增殖情况,初步鉴定具有拮抗作用的APLs,再系统性给予人源化NOD小鼠拮抗性APLs,考察其是否有T1D的防治作用。结果比较分析mInsA_(2-10)和其APLs的分子动力学模拟参数的差异,选择出4种候选的APLs;体外实验鉴定出APLs mInsA_(2-10)DQ4和mInsA_(2-10)DC6与HLA-A*0201分子的相对亲和力比其它2个候选的APLs相对更高;与天然肽组相比,这2个APLs能显著地抑制mInsA_(2-10)自身反应性的CD8+T细胞的增殖;系统性给予人源化NOD小鼠这2个拮抗性APLs,仅mInsA_(2-10)DQ4具有显著的T1D保护作用。结论 mInsA_(2-10)DQ4和mInsA_(2-10)DC6是具有拮抗作用的APLs,而在人源化NOD小鼠的在体研究中发现仅mInsA_(2-10)DQ4具有显著的T1D保护作用,下一步将探讨mInsA_(2-10)DQ4防治T1D的免疫学机制,这为T1D防治的临床转化基础研究提供良好的实验依据。

丙戊酸联合HA14-1诱导Bcl-2高表达的白血病细胞株BALL-1凋亡

目的观察体内外丙戊酸(VPA)和HA14-1联合应用对Bcl-2高表达的白血病细胞的杀伤效能及对外周血象的影响。方法(1)将BALL-1分为空白对照组1、mmol/L VPA组5、mmol/L VPA组、15 mmol/L VPA组,作用72 h,流式细胞仪检测各组细胞凋亡结果;(2)将BALL-1分为对照组、VPA组、HA14-1组、VPA+HA14-1组,作用后流式细胞法检测各组凋亡率;(3)每组6只NOD/SCID鼠在每只鼠接种1×107/0.2 ml BALL-1后24 h按如下分组进行实验:①对照组;②HA14-1组,经尾静脉注射灭菌HA14-1 25 mg.kg-1.d-1,共7天;③VPA组,注射灭菌VPA 250 mg.kg-1.d-1,共7天;④HA14-1+VPA组,注射灭菌HA14-1 25 mg.kg-1.d-1,4小时后再注射灭菌VPA 250 mg.kg-1.d-1,共7天。记录各组小鼠的存活时间。(4)将普通小白鼠共24只按(3)方法进行分组,比较几组普通小鼠的生存率、存活时间,及外周血细胞计数。结果(1)VPA15 mmol/L作用72 h BALL-1凋亡率为(24.8±2.8)%,与其它3组比较P<0.01;另3组之间比较P>0.05。(2)HA14-1组、VPA组凋亡率分别为(4.6±0.1)%(、4.8±0.5)%,与对照组比较,P>0.05。HA14-1+VPA组凋亡率高达(76.5±6.9)%,与另3组比较P<0.01。(3)HA14-1+VPA组小鼠生存天数为(87.5±4.5)天,显著长于其他3组,而其他3组之间无差异。(4)HA14-1单独作用组和HA14-1与VPA联合作用组表现为白细胞与血小板轻微而短期下降,而小鼠的生存率、存活时间无显著性差异。结论HA14-1与VPA联合用药,可克服Bcl-2高表达造成的对VPA的抗性。

七氟醚减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤

目的探讨七氟醚对大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)的影响并探讨其可能机制。方法健康SPF级雄性SD大鼠36只,6~8周龄,体重220~280 g。随机分为三组:对照组(C组)、VILI组(V组)和七氟醚组(S组),每组12只。大鼠给予1%戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉后行气管切开插管术,C组自主呼吸4 h,V组和S组插管后机械通气4 h,S组机械通气期间吸入2%七氟醚4 h。通气参数:V_(T) 20 ml/kg,RR 80次/分,I∶E 1∶1,FiO_(2)21%,PEEP 0 cmH_(2)O。机械通气结束时采集股动脉血测定PaO_(2)。处死大鼠,取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),计算肺组织湿/干重比值(W/D),采用ELISA法检测BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-18浓度,二氯荧光黄双乙酸盐法检测BALF中肺泡巨噬细胞活性氧(ROS)水平,Western blot法及qRT-PCR法检测肺组织NF-E2相关因子2(Nrf2)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量,观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分。结果与C组比较,V组和S组机械通气结束时PaO_(2)、肺组织Nrf2蛋白含量及其mRNA表达量明显降低(P<0.05),肺组织W/D、BALF中IL-1β、IL-18浓度、BALF中肺泡巨噬细胞ROS水平、肺组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量、肺损伤评分明显升高(P<0.05)。与V组比较,S组机械通气结束时PaO_(2)、肺组织Nrf2蛋白含量及其mRNA表达量明显升高(P<0.05),肺组织W/D、BALF中IL-1β、IL-18浓度、BALF中肺泡巨噬细胞ROS水平、肺组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量、肺损伤评分明显降低(P<0.05)。结论七氟醚可能通过上调Nrf2和下调NLRP3炎性小体的表达,减轻肺组织氧化应激反应和炎症反应,减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤。

大黄素对实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠的免疫保护作用研究

目的探讨大黄素对实验性自身免疫性甲状腺炎小鼠的免疫保护作用和机制。方法通过过量碘剂诱导NOD小鼠建立EAT动物模型，造模4周后大黄素组小鼠进行大黄素灌胃处理。造模8周后检测小鼠血浆TgAb水平、甲状腺淋巴浸润程度及外周血T细胞亚群频率以观察大黄素对EAT小鼠的免疫保护作用。结果（1）甲状腺病理学观察，大黄素组较模型组甲状腺淋巴细胞浸润程度减轻，且两组淋巴细胞浸润程度均高于对照组，各组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）造模小鼠血浆TgAb水平均较对照组升高，且大黄素组升高幅度明显低于模型组，各组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。（3）大黄素组外周血单核细胞中CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋T细胞频率和CD3＋CD4＋FIN-γ＋、CD3＋CD4＋IL-4＋T细胞频率均明显低于模型组，且均高于对照组，各组间比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论过量碘剂诱导NODd、鼠自身免疫性甲状腺炎造模是可行的；大黄素对造模小鼠甲状腺组织的自身免疫性炎症反应有一定免疫抑制作用，大黄素通过抑制CD4＋、CD8＋T淋巴细胞增殖分化及其IFN-γ和IL-4细胞因子分泌，从而发挥免疫性保护作用。

不同品系小鼠感染甲型流感病毒肺小血管内血栓形成

目的本实验旨在观察不同品系小鼠感染甲型流感病毒后肺组织内血栓形成的情况。方法使用H1N1病毒A/California/7/2009(CA7)株和H3N2病毒A/Brisbane/10/07株,对BALB/C小鼠、Scid小鼠、NOD/LTJ小鼠、BALB/C-nu小鼠、NOD-Scid小鼠和icosl-KO小鼠经乙醚麻醉后进行滴鼻攻毒。检测小鼠感染后肺组织病毒拷贝数并观察肺组织病理学改变。结果 H1N1和H3N2滴鼻攻毒的各组小鼠均染毒,病理表现为程度略有差异的间质性肺炎。13只H1N1病毒感染小鼠和6只H3N2感染小鼠在肺组织中观察到多个小血管内有血栓形成,血栓成分主要为纤维素和血小板。结论各品系小鼠感染H1N1和H3N2流感病毒后均可能出现肺组织内血栓形成。

胰岛素早期强化治疗对发病NOD小鼠胰岛炎及bax、bcl-2表达的影响

目的探讨胰岛素早期强化治疗对发病非肥胖糖尿病(NOD)小鼠胰岛炎及对胰岛细胞凋亡与再生的影响。方法选取近期发病NOD小鼠12只,随机平均分为A、B两组,A组给予胰岛素早期强化治疗,B组为发病未治疗组。同时选取同周龄未发病小鼠6只为C组。B和C组分别于分组当日即开始予PBS缓冲液对照治疗。B组于20 d处死,A和C组于60 d处死。HE染色观察各组小鼠胰岛炎性积分,免疫组化观察小鼠胰岛bax、bcl-2蛋白的表达。结果 A组小鼠糖尿病症状得到明显控制,其胰岛炎性积分显著低于B组(P<0.05),与C组相比差异无统计学意义(P>0.05)。A组bax表达低于B组,但差异无统计学意义(P>0.05),与C组相比差异有统计学意义(P<0.05)。A组bcl-2表达显著高于B组和C组(P<0.05)。结论胰岛素早期强化治疗能够减轻胰岛炎症,减少细胞凋亡,促进胰岛细胞再生。