乳腺癌发生过程中NOEY2基因启动子区甲基化及mRNA表达

目的探讨乳腺癌发生过程中抑癌基因NOEY2启动子区甲基化状态及其对mRNA表达的影响。方法应用甲基化特异性PCR及双亚硫酸钠基因测序技术检测MCF10模型中乳腺增生细胞系MCF10A、癌前细胞系MCF10AT、导管内癌细胞系MCF10DC IS.com、浸润癌细胞系MCF10CA1 a、MCF10CA1d、MCF10CA1h及正常乳腺组织中NOEY2基因启动子区CpG岛I甲基化状态,然后用RT-PCR和实时PCR技术检测上述样品的mRNA表达水平。结果MCF10模型的增生细胞系、癌前细胞系、导管内癌细胞系、浸润癌细胞系均发生该基因启动子区CpG岛I高度甲基化;与正常乳腺组织相比,上述细胞系mRNA表达显著减少。结论NOEY2基因启动子区高度甲基化及相应的mRNA表达减少是乳腺癌发生过程中的早期事件,与乳腺癌发生有关,可能成为早期诊断乳腺癌的潜在分子生物学标记。

NOEY2基因对人乳腺癌细胞体外生长的影响

目的 :构建NOEY2基因真核表达载体 ,研究其对人乳腺癌细胞系MDA MB 2 31生长的影响。方法 :RT PCR获得目的基因编码区 ,经T A策略克隆后 ,再亚克隆至pcDNA3 ,获得真核表达载体。用lipofectAMINE辅助转染MDA MB 2 31细胞 ,经G418长期筛选而获得稳定转染细胞克隆。Western印迹检测NOEY2蛋白水平的表达。通过记录生长曲线和流式细胞分析术观察转染细胞的生长和细胞周期变化。结果 :NOEY2真核表达载体pcDNA3 NOEY2 CR构建成功。被稳定转染该载体的MDA MB 2 31细胞有明确NOEY2蛋白表达 ,而对照细胞无表达。NOEY2转染细胞的生长抑制率可达 46 .3 % ,在细胞周期改变上可见明显的S期分数和G2 M期分数下降 ,而G0 G1期比例上升。结论 :NOEY2基因转染对体外培养的人乳腺癌细胞生长具有一定的抑制作用 ,支持其作为一个抑癌基因的推测 。

GE7导入系统介导抑癌基因NOEY2体内导入治疗人上皮性卵巢癌裸鼠网膜移植瘤的研究

目的 :研究GE7导入系统体内导入效率及介导抑癌基因NOEY2体内导入后对人上皮性卵巢癌裸鼠网膜移植瘤的治疗作用。方法 :将人上皮性卵巢癌细胞株Hey细胞种植于裸鼠皮下成瘤后半包埋缝于裸鼠脾区网膜建立网膜移植瘤模型。将GE7- β -gal四元复合体经腹腔注入荷瘤鼠体内用X -gal染色法检测基因导入效率 ,同法导入生理盐水、GE7-pcDNA3四元复合体及GE7-pcDNA3-NOEY2四元复合体 ,研究其抑制肿瘤生长的作用。结果 :人上皮性卵巢癌裸鼠网膜移植瘤的成瘤率达 10 0 % ,3周后瘤体达 3 68± 0 82g。GE7- β -gal四元复合体经腹腔注入荷瘤鼠体内 12h后 β -gal即有表达 ,4 8h后以瘤体、肝、脾表达率最高。GE7-pcDNA3-NOEY2四元复合体腹腔注射 3周后瘤体生长抑制率为 4 0 81% (P <0 0 5)。结论 :人上皮性卵巢癌裸鼠网膜移植瘤模型具有实用性。GE7导入系统体内导入基因效率高 ,具有相对肿瘤靶向性。GE7导入系统介导抑癌基因NOEY2体内导入后能有效抑制上皮性卵巢癌的生长。

GE7导入系统介导抑癌基因NOEY2体内导入治疗人上皮性卵巢癌裸鼠腹水瘤

目的 研究GE7导入系统介导抑癌基因NOEY2体内导入后对人上皮性卵巢癌裸鼠腹水瘤的治疗作用。方法 将人上皮性卵巢癌细胞株skov3ipl细胞种植于裸鼠腹腔内建立腹水瘤模型。将生理盐水、GE7 pcD NA3四元复合体及GE7 pcDNA3 NOEY2四元复合体导入荷瘤裸鼠体内研究其抑制肿瘤生长作用。结果 人上皮性卵巢癌裸鼠腹水瘤的成瘤率达 90 % ,GE7 pcDNA3 NOEY2四元复合体腹腔注射后第 2周裸鼠的体重较对照组明显减轻 (P <0 .0 5) ,但第 3周起 3组体重无明显差异。 3组裸鼠的生存期无明显差异。结论 GE7导入系统介导抑癌基因NOEY2体内导入后能延缓但不能抑制上皮性卵巢癌腹水的生长 ,且对腹水瘤裸鼠的生存期无明显延长作用。人上皮性卵巢癌裸鼠腹水瘤模型具有实用性。

新的候选抑癌基因NOEY2在胰腺肿瘤中的表达

目的 探讨NOEY2基因与胰腺癌的相关性。方法 病理确诊的胰腺肿瘤26例（23例胰腺导管腺癌、3例胰岛细胞瘤）,12例正常胰腺,8株人胰腺癌细胞株（Pu-Pan-1、Miapaca-Ⅱ、Panc-1、CFpac-1、Aapc-1、BXPC3、HS766T、SW1990）。用NOEY2特异性抗体进行免疫组化检测NOEY2基因编码蛋白在胰腺癌组织的表达;用该基因的cDNA探针进行RNA印迹杂交分析上述胰腺癌细胞株有无NOEY2 mRNA表达;用免疫细胞化学的方法检测NOEY2基因编码蛋白在胰腺癌细胞株的表达。结果 （1）正常人胰腺导管、腺泡、胰岛细胞胞浆中均可见到NOEY2蛋白的表达;（2）23例胰腺导管腺癌组织中有11例胰腺癌组织无NOEY2蛋白表达,占47.8％,又可分为二种类型,一种为肿瘤组织表达阴性、正常组织表达阳性（2/11）,另一种为肿瘤组织、正常组织表达均阴性（9/11）;12/23例（52.2％）肿瘤组织癌旁组织表达均阳性。（3）本实验未发现NOEY2蛋白与胰腺癌分化程度之间有相关性;（4）3例胰岛细胞瘤均无NOEY2蛋白表达;（5）RNA印迹杂交分析及免疫细胞化学结果显示8个胰腺癌细胞株均无NOEY2基因在mRNA和蛋白水平的表达。结论 NOEY2基因蛋白在正常人胰腺广泛表达,但在胰腺癌组织中蛋白表达有较高比例的缺失,在胰腺癌细胞株中不仅有蛋白表达缺失,同时NOEY2基因mRNA表达?

乳腺癌NOEY2基因启动子区甲基化的研究

目的检测NOEY2基因在乳腺癌发生不同阶段的甲基化状态及其在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的mRNA表达水平,探讨NOEY2基因启动子区异常甲基化与乳腺癌发生发展的关系。方法收集2010年1月—2012年1月手术切除乳腺的女性患者标本,其中IDC组46例,乳腺普通型导管增生(UDH)组30例,癌旁正常乳腺组织(NBT)组20例,乳腺原位导管癌(DCIS)组20例,乳腺非典型导管增生(ADH)组13例,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测NOEY2基因的甲基化率及水平,分析其与临床病理参数的关系;采用实时定量PCR检测30例IDC中NOEY2基因的mRNA相对表达量,分析NOEY2基因甲基化对其mRNA表达的影响。结果 IDC组的完全甲基化率高于NBT及UDH组(P<0.01);NOEY2基因完全甲基化与乳腺癌患者的临床分期、组织学分级有关(P<0.05),而与年龄、肿瘤大小、ER、PR、HER2无相关性(P>0.05);完全甲基化的IDC标本NOEY2 mRNA表达量低于部分甲基化的IDC标本(P<0.05);IDC中NOEY2基因的甲基化水平与NOEY2基因mRNA表达量呈负相关(r=-0.659,P<0.05)。结论 NOEY2基因启动子区异常高甲基化及其导致的mRNA表达下调在乳腺癌发生发展过程中起重要作用。

NOEY2 mRNA在乳腺癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨NOEY2 mRNA在乳腺癌组织中的表达水平及临床意义.[方法]收集2016年1月至2017年2月本院诊治的80例乳腺癌患者癌组织及癌旁正常组织标本,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测乳腺癌组织及癌旁组织NOEY2 mRNA表达,分析乳腺癌组织NOEY2 mRNA表达水平与临床病理参数的相关性.[结果]乳腺癌组织中NOEY2 mRNA表达水平明显低于癌旁正常组织（P〈0.05）;腋窝淋巴结阳性的乳腺癌患者NOEY2 mRNA表达水平低于阴性者（P〈0.05）.乳腺癌组织NOEY2 mRNA水平与腋窝淋巴结转移呈负相关（P〈0.05）.[结论]乳腺癌组织中NOEY2 mRNA低表达,且癌组织NO-EY2 mRNA表达水平与淋巴结转移呈负相关,推测NOEY2 mRNA低表达可能参与乳腺癌淋巴结转移过程.

乳腺癌组织中NOEY2基因的mRNA表达及其与临床病理的关系

目的 观察乳腺癌组织中NOEY2基因的mRNA表达情况 ,并探讨其与临床病理及其他分子指标的关系。方法 以RT PCR法和反义RNA探针原位杂交法 ,检测乳腺良恶性病变组织中NOEY2基因的mRNA表达。以免疫组化法检测乳腺癌石蜡标本中的雌激素受体 (ER)状态、Ki6 7标记指数以及p2 7和p2 1WAF1的表达。结果 RT PCR法检测显示 ,2 4例冻存乳腺组织中 ,6例良性病变NOEY2均为阳性 ;18例乳腺癌中 ,13例 (72 .2 % )NOEY2为阳性。原位杂交法检测显示 ,10例乳腺良性病变NOEY2均为阳性 ;而 6 0例乳腺侵袭性癌中 ,仅有 31例NOEY2为阳性 ,占 5 1.7%。良恶性病变NOEY2阳性率差异有显著性 (P <0 .0 2 5 )。NOEY2的阳性率有随组织学分级升高而递减的趋势。淋巴结阴性者阳性率为 76 .7% ,而阳性者仅为 2 6 .7% ,两者差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。NOEY2基因mRNA表达与其他临床病理指标以及免疫组化指标均无显著相关性。结论 NOEY2基因可能在一定程度上参与了乳腺癌的发生和发展 。

ARHI基因与肿瘤的关系

近年来研究表明,一种新的抑癌印迹基因ARHI(NOEY2)的异常参与了一些肿瘤的发生。该文就ARHI(NOEY2)的结构、功能及其与某些肿瘤的关系进行综述。