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下调lncRNA NONRATT021972调控TLR4对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症反应
被引量:
4
1
作者
郑翔宇
付宗强
+1 位作者
张艳敏
郭伟胜
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2021年第11期1150-1157,共8页
目的关于lncRNA NONRATT021972在糖尿病中表达上调对胰岛β细胞影响的研究较少。文中旨在探讨下调lneRNA NONRAT021972调控Toll样受体4(TLR-4)对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症因子表达的影响。方法将胰岛β细胞NIT-1分成对照组(正常培...
目的关于lncRNA NONRATT021972在糖尿病中表达上调对胰岛β细胞影响的研究较少。文中旨在探讨下调lneRNA NONRAT021972调控Toll样受体4(TLR-4)对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症因子表达的影响。方法将胰岛β细胞NIT-1分成对照组(正常培养的胰岛β细胞)、模型组(用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理)、sh-NC组(转染shRNA control,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)、sh-NONRATT021972组(转染sh-NON-RATT021972,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)。PCR方法检测NONRATTO21972.TLR4和TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达;CCK8实验检测细胞增殖活性变化;流式细胞术检测细胞凋亡变化;Westernblot检测C-Caspase-3.C-Caspase-9、TLR4、TNF-α、IL-6、1L-1β蛋白表达。在胰岛β细胞中分别将NONRATT021972 shRNA、阴性对照载体和NON-RATT021972 shRNA.TLR4过表达载体共转染,用含有25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理,分为sh-NON-RATT021972+NC组(共转染NONRATT021972 shRNA和空载体,高糖高脂诱导)和sh-NONRATT021972+TLR4组(共转染NONRATT021972 shRNA和TLR4过表达载体,高糖高脂诱导)。Westerm blot检测C-Caspase-3、C-Caspase-9、TLR4,TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达。结果与对照组胰岛β细胞中NONRATTI021972表达水平(1.00±0.11)比较,模型组(2.47±0.12)明显升高(P<0.001);与sh-NC组NONRATT021972表达水平(2.45±0.23)比较,sh-NONRATT021972组(1.12±0.16)明显降低(P<0.001)。与对照组比较,模型组胰岛β细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-NONRATT021972组胰岛β细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中C-Caspase-3.C-Caspase-9蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与sh-NONRATT021972+NC组比较,sh-NONRATT021972+TLR4组胰岛β细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论下调NONRATT021972通过降低TLR4的表达减少糖脂毒性诱导胰岛β细胞炎症因子表达和细胞凋亡,提高细胞增殖活性,为分子靶向治疗糖尿病提供了思路。
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关键词
胰岛Β细胞
糖脂毒性
nonratt021972
TOLL样受体4
炎症
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职称材料
题名
下调lncRNA NONRATT021972调控TLR4对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症反应
被引量:
4
1
作者
郑翔宇
付宗强
张艳敏
郭伟胜
机构
河南省中医院检验科
河南省中医院肝胆外科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2021年第11期1150-1157,共8页
基金
河南省中医管理局科研专项(2018ZY2094)。
文摘
目的关于lncRNA NONRATT021972在糖尿病中表达上调对胰岛β细胞影响的研究较少。文中旨在探讨下调lneRNA NONRAT021972调控Toll样受体4(TLR-4)对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症因子表达的影响。方法将胰岛β细胞NIT-1分成对照组(正常培养的胰岛β细胞)、模型组(用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理)、sh-NC组(转染shRNA control,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)、sh-NONRATT021972组(转染sh-NON-RATT021972,然后用25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸处理细胞)。PCR方法检测NONRATTO21972.TLR4和TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达;CCK8实验检测细胞增殖活性变化;流式细胞术检测细胞凋亡变化;Westernblot检测C-Caspase-3.C-Caspase-9、TLR4、TNF-α、IL-6、1L-1β蛋白表达。在胰岛β细胞中分别将NONRATT021972 shRNA、阴性对照载体和NON-RATT021972 shRNA.TLR4过表达载体共转染,用含有25mmol/L葡萄糖、0.25mmol/L棕榈酸的细胞培养液处理,分为sh-NON-RATT021972+NC组(共转染NONRATT021972 shRNA和空载体,高糖高脂诱导)和sh-NONRATT021972+TLR4组(共转染NONRATT021972 shRNA和TLR4过表达载体,高糖高脂诱导)。Westerm blot检测C-Caspase-3、C-Caspase-9、TLR4,TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达。结果与对照组胰岛β细胞中NONRATTI021972表达水平(1.00±0.11)比较,模型组(2.47±0.12)明显升高(P<0.001);与sh-NC组NONRATT021972表达水平(2.45±0.23)比较,sh-NONRATT021972组(1.12±0.16)明显降低(P<0.001)。与对照组比较,模型组胰岛β细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白表达及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-NONRATT021972组胰岛β细胞增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中C-Caspase-3.C-Caspase-9蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与sh-NONRATT021972+NC组比较,sh-NONRATT021972+TLR4组胰岛β细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞中C-Caspase-3、C-Caspase-9蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论下调NONRATT021972通过降低TLR4的表达减少糖脂毒性诱导胰岛β细胞炎症因子表达和细胞凋亡,提高细胞增殖活性,为分子靶向治疗糖尿病提供了思路。
关键词
胰岛Β细胞
糖脂毒性
nonratt021972
TOLL样受体4
炎症
Keywords
pancreatic isletβcells
glycolipid toxicity
nonratt021972
TLR4
inflammation
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
下调lncRNA NONRATT021972调控TLR4对糖脂毒性诱导的胰岛β细胞炎症反应
郑翔宇
付宗强
张艳敏
郭伟胜
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2021
4
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