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Expression of a novel alternative transcript of the novel retinal pigment epithelial cell gene NORPEG in human testes 被引量:1
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作者 Wa Yuan Ying Zheng Ran Huo Li Lu Xiao-Yan Huang Lan-Lan Yin Jian-Min Li Zuo-Min Zhou Jia-Hao Sha 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2005年第3期277-288, ,共12页
Aim: To identify a novel alternative transcript of the novel retinal pigment epithelial cell gene (NORPEG) expressed in the human testis. Methods: A human testis cDNA microarray was established and hybridized with... Aim: To identify a novel alternative transcript of the novel retinal pigment epithelial cell gene (NORPEG) expressed in the human testis. Methods: A human testis cDNA microarray was established and hybridized with cDNA probes from human fetal testes, adult testes and human spermatozoa. Differentially expressed clones were sequenced and analyzed. One of these clones was a short transcript of NORPEG which we proceeded to analyze by RT-PCR. Results: The novel short alternative transcript of NORPEG was isolated and named sNORPEG. It was 3486 bp in length and contained a 2952-bp open reading frame, encoding a 110.4-kDa protein of 983 amino acids. Amino acid sequence analysis showed that the sNORPEG protein contains six ankyrin repeats and two coiled-coil domains. It shares a high homology with the NORPEG and ankycorbin proteins in both its sequence and motifs. Blasting the human genome database localized sNORPEG to human chromosome 5pl 3.2-13.3. Expression profiles showed that sNORPEG was expressed in human fetal testes, adult testes and spermatozoa. Moreover, sNORPEG was found to be ubiquitously expressed in human tissues. Conclusion: sNORPEG is expressed in different developmental stages of the testis and encodes a protein that may have roles in human testis development and spermatogenesis. (Asian J Androl 2005 Sep; 7: 277-288) 展开更多
关键词 alternative transcript norpeg testis development SPERMATOGENESIS
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人Norpeg蛋白的原核表达及其抗体的制备
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作者 孙玉宁 靳更林 +1 位作者 李燕 寿成超 《宁夏医学院学报》 2005年第4期256-258,F0003,共4页
目的原核表达NorpegC端编码区并制备小鼠抗Norpeg多克隆抗体。方法将Norpeg基因C端编码区克隆进原核表达载体pGEX4T-1中,转化E.coli,以IPTG诱导重组蛋白的表达。以纯化的重组目的蛋白作为免疫原免疫小鼠,制备相应的多克隆抗体。结果成... 目的原核表达NorpegC端编码区并制备小鼠抗Norpeg多克隆抗体。方法将Norpeg基因C端编码区克隆进原核表达载体pGEX4T-1中,转化E.coli,以IPTG诱导重组蛋白的表达。以纯化的重组目的蛋白作为免疫原免疫小鼠,制备相应的多克隆抗体。结果成功构建原核表达载体,表达了重组蛋白并制备了小鼠抗Norpeg多克隆抗体。结论人NorpegC端编码区能够在体外大肠杆菌中获得融合表达,制备的小鼠抗Nor-peg多克隆抗体特异性较高,为下一步深入Norpeg功能研究提供了重要基础。 展开更多
关键词 norpeg蛋白 表达 多克隆抗体
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猪鼻支原体P37蛋白相互作用蛋白的筛选与鉴定 被引量:3
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作者 孙玉宁 靳更林 +2 位作者 张建芝 吴健 寿成超 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期902-906,共5页
既往工作表明 ,胃癌组织中有较高的猪鼻支原体感染率 ,猪鼻支原体的主要膜蛋白P37能够诱导外周血单核细胞释放肿瘤坏死因子 (TNF) .为了深入研究P37的作用机制 ,利用酵母双杂交系统筛选与P37蛋白相互作用的蛋白质分子 .首先 ,将编码P37... 既往工作表明 ,胃癌组织中有较高的猪鼻支原体感染率 ,猪鼻支原体的主要膜蛋白P37能够诱导外周血单核细胞释放肿瘤坏死因子 (TNF) .为了深入研究P37的作用机制 ,利用酵母双杂交系统筛选与P37蛋白相互作用的蛋白质分子 .首先 ,将编码P37全长的cDNA克隆到 pGBKT7载体中 ,构建“诱饵”表达载体 pGBKT7 p37,以此筛选人胎盘组织cDNA表达文库 .在 2 6× 10 6个克隆中 ,筛选到一株能与P37相互作用的阳性克隆 ,序列测定表明 ,该阳性克隆编码人视网膜色素上皮细胞蛋白 (Norpeg蛋白 ) .在此基础上经GST PullDown实验 ,进一步证实Norpeg蛋白确能与P37相互作用 ,为进一步研究P37对细胞的作用机制奠定了基础 . 展开更多
关键词 猪鼻支原体 酵母双杂交 P37 norpeg
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