中国汉族人群不明原因猝死与NOS1AP基因多态性的相关性

目的研究日常活动中不明原因猝死(sudden unexpected death,SUD)者NOS1AP基因的单核苷酸多态性。方法收集60例一般日常活动中SUD病例心血样本作为SUD组,另外随机抽取80例无关个体的外周血样本作为对照组,提取基因组DNA,用特异性引物对NOS1AP部分SNP位点(rs10494366、rs10918859、rs12143842、rs12742393、rs3751284、rs348624)进行PCR扩增和直接测序,计算等位基因频率和基因型频率,并分析各SNP位点在SUD组与对照组之间的差异性。结果 NOS1AP第6外显子区域的rs3751284位点的等位基因频率和基因型频率在两组人群中的差异均有统计学意义(P<0.05)。rs3751284位点的最小等位基因的频率在SUD组为0.325,在对照组为0.475。结论 rs3751284位点可能是SUD的易感基因位点。

NOS1基因多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性的关系

目的 研究一氧化氮合成酶结构式基因 (NOS1)第 2 9外显子翻译终止位点下游 2 76 bp处 C/ T(C5 2 6 6 T)位点多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性及血浆 Ig E水平的关系。方法 用聚合酶链反应和限制片段长度多态性 (PCR- RFL P)方法对湖北汉族 134例变应性哮喘患者 (哮喘组 )及 90例无血缘关系的汉族健康人(对照组 )进行 NOS1基因 C5 2 6 6 T位点多态性分析 ,用免疫发光法测定血浆总 Ig E水平。结果 哮喘组 NOS1基因 C5 2 6 6 T位点 TT基因型频率与对照组相比差异显著 (P=0 .0 0 9) ,T等位基因频率与对照组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 )。哮喘组 TT基因型者血浆总 Ig E显著高于 CC和 CT基因型者 (P<0 .0 5 )。结论 NOS1基因C5 2 6 6 T位点 TT基因型与湖北汉族人哮喘易感性和高血浆总 Ig E水平均相关。

曲古抑菌素A对神经胶质瘤细胞NOS1基因转录的影响

目的以曲古抑菌素A(TSA)为乙酰化作用因素,研究大鼠神经胶质瘤C6细胞中乙酰化对神经型一氧化氮合酶(NOS1)基因转录水平的影响。方法应用real-time RT-PCR方法检测C6细胞中NOS1基因mRNA在不同时间及不同浓度TSA作用下表达水平的变化;采用nuclear run-off实验检测TSA作用下NOS1基因转录效率的改变。结果 TSA以时间及浓度依赖方式上调C6细胞中NOS1 mRNA水平;NOS1基因转录效率在TSA作用下显著提高。结论 TSA引起的乙酰化使C6细胞中NOS1基因转录水平明显增加。

神经细胞中乙酰化对NOS1基因启动子活性的调节

目的探讨乙酰化对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中NOS1基因启动子活性的调节作用。方法构建系列截短的NOS1 5′侧翼序列萤光素酶报告基因载体,应用萤光素酶报告基因检测系统分析SK-N-SH细胞中NOS1启动子活性,并比较组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)刺激前后启动子活性的变化。结果构建并鉴定了系列截短的NOS1启动子萤光素酶报告基因载体;在NOS1基因启动子区鉴定了两个正调控区域和两个负调控区域,同时TSA可上调不同长度启动子的转录活性。结论乙酰化参与调节神经细胞中NOS1基因启动子活性。

脑梗死人群NOS1基因多态性与脂代谢的相关性

目的探讨脑梗死患者神经元型一氧化氮合酶基因(NOS1)多态性与脂代谢的相关性。方法本研究共纳入605例脑梗死患者。以位于NOS1基因的rs9658281和rs2682820位点为遗传标记,采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测NOS1基因的基因型。应用氧化酶法测定入组患者血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)的水平。结果脑梗死患者nNOS基因rs9658581的等位基因频率与TC呈显著性相关(χ2=4.583,P=0.032)。携带G等位基因个体的总胆固醇水平(TC)明显高于携带A等位基因的个体。结论脑梗死患者TC的水平与NOS1基因rs9658581多态性可能有关。

补肾益智方对老年性痴呆模型鼠NOS1表达的影响

探讨天然促智药复方——补肾益智方对基底前脑神经元型一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ１， ＮＯＳ１）表达的影响。方法：用鹅膏蕈酸（Ｉｂｏｔｅｎｉｃ ａｃｉｄ，ＩＢＯ）损毁老年大鼠双侧基底核作为老年性痴呆（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ， ＡＤ）模型，治疗组行补肾益智方灌胃，用药对照组用石杉碱甲（Ｈｕｐ Ａ）灌胃，正常对照组为青年组和老年正常组。各组Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫检测，之后取各组受试大鼠脑组织冠状切片进行ＮＯＳ１免疫细胞化学染色。结果：逃避潜伏期中药组大鼠较模型组、Ｈｕｐ、 Ａ组明显缩短。 ＮＯＳ１阳性细胞数中药组较模型组、Ｈｕｐ Ａ组明显增加，明显低于青年组和老年正常组。灰度值中药组较青年组、老年正常组明显降低，斜角带水平支（ ｈｏｒｉｚｏｎａｌ ｄｉａｇｏｎａｌ ｂａｎｄ ｏｆ Ｂｒｏｃａ， ｈＤＢ）较模型组有明显增加。胞体面积中药组较模型组、Ｈｕｐ Ａ组显著增加。结论：补肾益智方可增加基底前脑 ＮＯＳ１表达。

NOS1基因多态性与腔隙性脑梗死相关性研究

目的探讨神经元型一氧化氮合酶基因(NOS1)多态性与腔隙性脑梗死发病的关系。方法本研究共纳入385例腔隙性脑梗死患者和313例对照组人群,以位于NOS1基因的rs9658281和rs2682820位点为遗传标记,采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测NOS1基因的多态性。结果 Cocaphase分析表明腔隙性脑梗死组rs9658281位点G等位基因频率较对照组显著增高(χ2=4.135,P=0.042,OR=1.422,95%CI 1.013～1.997),这种差异在女性患者更加明显(χ2=9.522,P=0.002,OR=2.502,95%CI 1.398～4.479)。卡方检验表明腔隙性脑梗死组rs9658281位点的GG基因型频率较对照组显著增高(χ2=5.862,P=0.015,OR=1.579,95%CI 1.091～2.286),这种差异在女性更加明显(χ2=13.641,P<0.0001,OR=3.501,95%CI 1.800～6.810)。经过多因素回归分析调整了传统危险因素的影响后,两组间的差异仍有显著性(P=0.014)。腔隙性脑梗死组和对照组的rs2682820位点的基因型、等位基因频率差异无显著性(P>0.05)。结论 NOS1基因rs9658281位点G等位基因与腔隙性脑梗死的发病可能有关。

雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS_1的共存

目的探讨雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1共存的可能性。方法采用免疫组织化学SABC法双重标记技术 ,用鼠抗ER血清和兔抗NOS1血清分别孵育切片 ,葡萄糖氧化酶 硫酸镍胺 DAB/AP red试剂盒呈色。结果在ER/NOS1双重免疫组织化学反应下可见三种细胞 :①NOS1单标细胞 :胞浆为NOS1 IR阳性 ,反应产物鲜红色 ,胞核未见着色 ;②ER单标细胞 :胞核为ER IR阳性 ,胞浆未见明显染色。③ER/NOS1双标细胞 :胞核为ER IR阳性 ,反应产物黑蓝色 ,胞浆为NOS1 IR阳性 ,反应产物鲜红色。ER/NOS1双标细胞约占NOS1 IR阳性神经元总数的 19%、占ER IR阳性神经元总数的 34%。结论雌性大鼠心内神经节细胞中ER与NOS1共存 ,部分ER IR阳性神经元为NO能神经元。

基于纳米金比色检测NOS1AP基因单碱基突变

基于单、双链DNA与纳米金颗粒间的不同静电作用,建立了一种基于颜色反应检测NOS1AP基因单碱基突变的方法.根据NOS1AP基因的单碱基多态位点设计检测探针、互补靶序列及带有单碱基突变序列寡核苷酸DNA.室温下,检测探针分别与互补序列、单碱基突变序列在缓冲液中进行杂交,再分别加入纳米金溶液以及NaCl溶液.用肉眼可以观察到纳米金溶液在两种不同杂交溶液中产生明显不同的颜色变化.这种变化可通过紫外-可见分光光度计测定纳米金溶液的紫外吸收峰值的变化来证实.实验结果表明,纳米金溶液在一定浓度NaCl存在的条件下,对互补双链NOS1APDNA及单碱基突变NOS1APDNA呈现出不同的颜色反应及紫外吸收光谱的改变.此方法可望用于相关疾病的医学诊断及单碱基突变的检测.

NOS1AP基因多态性对瑞舒伐他汀钙调脂效果的影响Δ

目的:探讨一氧化氮合酶1转接蛋白(NOS1AP)基因rsl2742393位点A/C多态性对瑞舒伐他汀钙调脂效果的影响。方法:选取2014年1月-2015年6月于我院心内科接受治疗的冠心病患者236例,予瑞舒伐他汀钙等对症治疗12周。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法检测各患者NOS1AP基因rs12742393位点A/C多态性,采用光电比色法分别于治疗前和治疗后第4、12周检测其血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,分析患者基因型与血脂水平变化的相关性。结果:236例冠心病患者中,AA、AC、CC基因型分别有131(55.5%)、98(41.5%)和7例(3.0%),各基因型和等位基因频率均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);血脂正常患者132例,合并高脂血症患者104例,两者各基因型和等位基因型频率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。104例冠心病合并高脂血症患者在治疗前,AA与AC+CC基因型患者TG、TC、LDL-C和HDL-C水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后第4、12周,各基因型患者TG、TC和LDL-C水平均较治疗前显著降低;治疗后第4周,AC+CC基因型患者LDL-C水平显著低于AA基因型患者,且较治疗前的变化幅度显著大于AA基因型患者,差异均有统计学意义(P<0.05);各基因型患者HDL-C水平与治疗前比较,治疗后第4、12周AA基因型患者TG、TC、HLD-C水平及其较治疗前的变化幅度与AC+CC基因型患者比较,以及治疗后第12周AA基因型患者LDL-C水平及其较治疗前的变化幅度与AC+CC基因型患者比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:NOS1AP基因rs12742393位点A/C多态性与冠心病患者合并高脂血症有关,该位点C等位基因可能通过影响LDL-C水平来增强冠心病合并高脂血症患者对瑞舒伐他汀钙调脂效果的反应性。

NOS1基因rs3782206多态性对反应抑制的影响:事件相关电位研究

目的探讨神经型一氧化氮合成酶基因(NOS1)rs3782206多态性与反应抑制能力的相关性。方法以132名健康被试为研究对象,通过偏相关分析,验证NoGo-N2效应与反应抑制能力是否有显著相关性。根据rs3782206基因型将被试分为风险等位基因(T)携带者组和非携带者组。通过协方差分析比较不同基因型组完成点阵图预期任务(DPX任务)时探测刺激阶段N2差异波(N2_(AY-AX))波幅是否存在差异。结果在控制了协变量年龄、性别和工作记忆能力(E_(BX-AY))后,差异波N2_(AY-AX)的波幅与E_(AY)显著相关(r=0.21;P<0.05)。风险等位基因携带者组的差异波N2_(AY-AX)波幅显著大于非携带者组,差异具有统计学意义(F=4.73;P<0.05)。结论验证了以NoGo-N2效应作为反应抑制能力电生理指标的正确性。并进一步发现NOS1rs3782206主要通过影响反应抑制功能发挥精神分裂症易感作用。

NOS1AP基因rs12742393位点多态性对瑞格列奈治疗我国汉族2型糖尿病患者疗效的影响

目的:探讨一氧化碳合成酶1调节蛋白(NOS1AP)基因rs12742393位点多态性对瑞格列奈治疗我国汉族2型糖尿病(T2DM)患者疗效的影响。方法:选取2015年8月-2017年3月于徐州医科大学附属医院初诊为T2DM且未接受过任何降糖治疗的汉族患者100例,在常规治疗的基础上加用瑞格列奈片1.0 mg,tid,连续治疗至少8周。采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性法检测患者NOS1AP基因rs12742393位点的基因型,并观察其治疗前后空腹血糖(FPG)、餐后血糖(PPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)、餐后胰岛素(PINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平。结果:退出和失访的患者各有1例,共有98例患者完成本研究。NOS1AP基因rs12742393位点AA、AC、CC型患者分别有39、42、17例,分布频率分别为39.8%、42.9%、17.3%,均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。治疗8周后,所有患者的FPG、PPG、HbA1c、HOMA-IR、TC、TG水平较治疗前显著下降,FINS、PINS水平较治疗前显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,各基因型患者各项临床指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,各基因型患者FPG、PPG、HbA1c水平,AA型患者HOMA-IR水平,CC型患者TC水平,AA、CC型患者TG水平均较治疗前显著下降;各基因型患者PINS水平,AC、CC型患者FINS水平,CC型患者HOMA-IR水平均较治疗前显著升高;CC型患者FPG、PPG水平显著高于AA、AC型患者,其较治疗前的下降值显著小于AA、AC型患者;AC型患者FPG水平显著高于AA型;AC、CC型患者FINS水平及较治疗前的上升值、HOMA-IR水平均显著高于或大于AA型,各基因型患者HOMA-IR较治疗前的变化值两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。而其余指标在治疗前后、组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:NOS1AP基因rs12742393位点多态性可能影响瑞格列奈治疗我国汉族T2DM患者的疗效,其风险基因C可能通过影响患者的FPG、PPG、FINS和HOMA-IR水平来降低瑞格列奈的疗效。