兔防御素NP-1基因在转基因番茄中表达的初步研究

兔防御素ＮＰ－ｌ是α-防御素的一种，含３３个氨基酸残基。最初从兔子的多形核嗜中性细胞中分离出来。它对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、分枝杆菌、真菌、被膜病毒以及ＨＩＶ病毒都有不同程度的抑制作用。兔防御素ＮＰ－１所带阳离子较多，可抗不具代谢活性的靶细胞。实验中将兔防御素ＮＰ－１基因构建到植物表达载体中，通过根瘤农杆菌介导转入番茄，得到了转基因番茄植株。对转基因番茄植株进行了 ＰＣＲ． Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ点杂交及体外抑菌检测，证实了兔防御素ＮＰ－ｌ基因已经转入番茄中，并得到了正常的表达，抗病实验表明转基因番茄对番茄青枯病具有抗性，为番茄的抗病育种工作奠定了基础。

利用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入小麦的研究

兔防御素NP-1是抗性谱最广的防御素之一。为提高小麦的抗病虫能力,培育优质高抗的小麦品种,采用花粉管通道法将兔防御素NP-1基因导入优质小麦品种G8901。对得到的193株T0植株进行抗除草剂筛选,获得4株抗性植株。通过PCR及PCR-Southern杂交,证实了NP-1基因已经整合到转基因植株的基因组中,并稳定遗传到T1。田间抗病虫鉴定结果表明,这些植株对于白粉病、叶锈和条锈病有较强的免疫力和抗性,但对于蚜虫的抗性没有明显提高。

兔防御素NP-1基因转化百合的研究

本研究以百合鳞片为外植体,用叶盘法将兔防御素NP-1基因导入百合中,经培养获得再生植株。通过抗生素筛选和PCR分析,证实为转基因植株。同时,对农杆菌转化过程中的一些影响因素进行了探讨。