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一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立
被引量:
3
1
作者
简正伟
徐芬
+2 位作者
石淙
万腊根
张长林
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期1058-1062,共5页
本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3...
本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。
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关键词
npm1突变体
ARMS-PCR方法
急性髓系白血病
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职称材料
江西省急性髓系白血病NPM1和FLT3-ITD基因突变分析
被引量:
2
2
作者
简正伟
石淙
+2 位作者
闻芳
万腊根
张长林
《实验与检验医学》
CAS
2015年第5期553-555,567,共4页
目的检测急性髓系白血病患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,分析其突变和临床之间的关系。方法提取患者骨髓标本DNA,采用AS-PCR技术检测FLT3-ITD和NPM1基因突变情况,分析基因突变与白血病FAB分型关系。结果在187例患者中,检测出52例NPM1...
目的检测急性髓系白血病患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,分析其突变和临床之间的关系。方法提取患者骨髓标本DNA,采用AS-PCR技术检测FLT3-ITD和NPM1基因突变情况,分析基因突变与白血病FAB分型关系。结果在187例患者中,检测出52例NPM1基因突变,突变率为27.8%;有28患者被检测出FLT3-ITD基因突变,突变率为14.97%;同时具有NPM1和FLT3-ITD基因突变的有13例,突变率为6.95%。其中NPM1基因突变在M5、M2中较为多见,而FLT3-ITD基因突变在M1、M4中较为多见。结论检测NPM1和FLT3-ITD基因突变可以给临床治疗提供指导意义。
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关键词
npm1突变体
FLT3-ITD
突变体
急性髓系白血病
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职称材料
题名
一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立
被引量:
3
1
作者
简正伟
徐芬
石淙
万腊根
张长林
机构
南昌大学第一附属医院检验科
江西医学院上饶分院检验系
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期1058-1062,共5页
基金
江西省科技支撑计划项目(编号20121BBG70049)
江西省青年科学基金(编号20122BAB215012)
江西省自然科学基金(编号20122BAB205025)
文摘
本研究旨在建立一种简单、灵敏的,能检测多种NPM1突变体的方法,以降低NPM1突变的漏检率。通过构建NPM1基因野生型和最常见的突变型A、B、C、D重组质粒作为检测对象,根据NPM1不同突变体碱基排列方式不同,设计1对特异性引物,使得上游引物3'末端的碱基与突变体A、B、C、D匹配,而与野生型NPM1不匹配;通过条件优化,建立检测多种NPM1突变的ARMS-PCR的方法。通过对该方法的检测范围、灵敏度的评估及与直接测序法的比较,判断该方法的可行性。结果表明,成功构建NPM1基因野生型和突变型A、B、C、D 5种重组质粒,经测序鉴定和目的片段一致。ARMS-PCR方法可以检测到ABCD 4种突变体,检测范围在103copies/ml-109copies/ml,其灵敏度为0.01%,而当突变体含量低于10%时采用直接测序则检测不出突变。结论:本研究建立了一种可以检测NPM1 4种高频突变的ARMS-PCR方法。该方法灵敏度高,可以检出95%以上的突变,为临床检测NPM1基因突变提供一种新型的检测方法。
关键词
npm1突变体
ARMS-PCR方法
急性髓系白血病
Keywords
npm
1
mutation
ARMS-PCR method
acute myeloid leukemia
分类号
R446.1 [医药卫生—诊断学]
R733.71 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
江西省急性髓系白血病NPM1和FLT3-ITD基因突变分析
被引量:
2
2
作者
简正伟
石淙
闻芳
万腊根
张长林
机构
南昌大学第四附属医院检验科
南昌大学第一附属医院检验科
出处
《实验与检验医学》
CAS
2015年第5期553-555,567,共4页
基金
江西省科技支撑计划项目(编号:20121BBG70049)
文摘
目的检测急性髓系白血病患者NPM1和FLT3-ITD基因突变情况,分析其突变和临床之间的关系。方法提取患者骨髓标本DNA,采用AS-PCR技术检测FLT3-ITD和NPM1基因突变情况,分析基因突变与白血病FAB分型关系。结果在187例患者中,检测出52例NPM1基因突变,突变率为27.8%;有28患者被检测出FLT3-ITD基因突变,突变率为14.97%;同时具有NPM1和FLT3-ITD基因突变的有13例,突变率为6.95%。其中NPM1基因突变在M5、M2中较为多见,而FLT3-ITD基因突变在M1、M4中较为多见。结论检测NPM1和FLT3-ITD基因突变可以给临床治疗提供指导意义。
关键词
npm1突变体
FLT3-ITD
突变体
急性髓系白血病
Keywords
npm
l mutation
FLT3-ITD mutation
Acute myeloid leukemia
分类号
R733.71 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种检测多种NPM1突变体的ARMS-PCR方法的建立
简正伟
徐芬
石淙
万腊根
张长林
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
下载PDF
职称材料
2
江西省急性髓系白血病NPM1和FLT3-ITD基因突变分析
简正伟
石淙
闻芳
万腊根
张长林
《实验与检验医学》
CAS
2015
2
下载PDF
职称材料
已选择
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参考文献
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统计分析
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