胡椒PnNPR2基因的克隆

基于胡椒转录组数据库,筛选胡椒病程相关基因非表达子基因的EST序列,设计引物,运用RACE法克隆得到1个NPR基因,命名为PnNPR2;该基因全长2 260 bp,开放阅读框1 722 bp,编码573个氨基酸;开放读码框含有BTB/POT结构域、ANK锚蛋白重复序列、DUF和NPR1-like C 4个结构域,具有植物NPR1所共有的保守结构域,并将PnNPR2基因插入pCAMBIA1300-35S-sGFP超表达载体中。本研究结果为PnNPR2的功能研究奠定基础。

NPR2基因突变致Maroteaux型肢端肢中发育不全1例

对2018年11月天津医科大学总医院儿科诊治的1例Maroteaux型肢端肢中发育不全(AMDM)患儿的临床资料进行回顾性分析。患儿,女,3岁3个月,身高83 cm(-3.84 SD),表现为非匀称性矮小,前臂和小腿不成比例缩短,指趾粗短,基因检测显示 NPR2基因复合杂合突变c.1640T>A(p.Val547Asp)/c.682G>A(p.Gly228Ser),2个变异在人类基因突变数据库中未见报道,蛋白质功能预测有害,确诊为AMDM。患儿于门诊随诊至4岁8个月,身高90 cm(-4.35 SD),生长速率(GV)=4.9 cm/年,予重组人生长激素(rhGH)治疗并定期随诊,已使用rhGH 9个月,身高98.2 cm(-3.07 SD),GV=10.9 cm/年。该病例丰富了AMDM的基因突变谱。rhGH可有效改善患儿的身高,但长期疗效有待进一步随诊和观察。

FSH与GDF9对绵羊卵泡颗粒细胞中C型钠肽及其受体表达的影响

为了阐明绵羊卵泡颗粒细胞功能调控机制,试验选取不同条件培养的绵羊卵泡壁层颗粒细胞(MGCs)和卵丘颗粒细胞(CCs),分别设置对照组、FSH组和GDF9+FSH组,利用qPCR、Western blot和免疫荧光法分别检测MGCs和CCs中NPPC和NPR2的mRNA和蛋白表达量。结果表明:对于壁层颗粒细胞,FSH组NPPC 12 h mRNA及12,24 h蛋白水平显著高于对照组(P<0.05),极显著低于GDF9+FSH组(P<0.01);体外培养16 h后,与对照组相比,FSH组NPR2 mRNA及蛋白表达水平显著提高(P<0.05),但与GDF9+FSH组差异不显著(P>0.05)。对于卵丘颗粒细胞,FSH组NPPC mRNA及蛋白水平极显著高于对照组和GDF9+FSH组(P<0.01);FSH组NPR2 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组和GDF9+FSH组(P<0.05)。说明FSH可以显著提高体外培养的绵羊卵泡颗粒细胞中NPPC、NPR2的表达;GDF9可以促进FSH诱导的壁层颗粒细胞中NPPC的表达,但抑制了FSH诱导的卵丘细胞颗粒细胞中NPR2的表达。

哺乳动物卵泡发育调控分子机制研究进展

哺乳动物卵泡发育研究对于辅助生殖技术的发展具有重要意义。随着分子生物学技术的发展,哺乳动物卵泡发育研究主要放在对其调控的分子机制中。本文重点阐述了与卵泡发育相关的激活素/抑制素作用通路、BMP/Smad信号通路以及NPPC/NPR2信号通路,以期对哺乳动物不孕发生的原因及治疗提供参考。

拟南芥突变体npr1-2的鉴定及水杨酸感受性分析

【目的】拟南芥的NPR1 (nonexpresser pathogenesis-related gene 1)是植物系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)的关键调节基因,SAR是一种有效的先天免疫反应,提供广谱抗病性。大量的研究表明:水杨酸为诱导SAR的细胞外信号,而NPR1蛋白作为水杨酸的受体串联并启动细胞内的反应。拟南芥突变体npr1-2是研究拟南芥水杨酸信号转导途径的材料之一。为了筛选出纯合的npr1-2突变体,测定纯合突变体中NPR1基因的表达水平,鉴定突变幼苗对水杨酸的敏感性。【方法】采用PCR扩增、DNA测序、定量RT-PCR以及水杨酸敏感性鉴定等方法。【结果】鉴定并筛选出了npr1-2纯合突变体,发现突变体NPR1基因表达量下调为野生型的30%左右,突变体幼苗对水杨酸的敏感性降低。【结论】npr1-2纯合突变体为进一步的研究奠定了材料基础。

C型利钠尿肽在卵细胞双相体外成熟技术中的应用

卵细胞体外成熟(IVM)技术是指将未成熟的卵丘-卵细胞复合体(COCs)从窦卵泡中取出后,在体外促进卵细胞发育成熟的一种辅助生殖技术。自1991年IVM技术首次应用于人类以来,其发展较为缓慢。近年来,该技术逐渐受到人们重视,并获得了一定的发展。在卵细胞发育过程中,C型利尿钠肽(CNP)能够使卵细胞停滞于减数分裂生发泡(GV)期。利用这个特点,逐渐形成基于CNP的卵细胞双相IVM系统。该技术在多个物种的应用获得了极大的成功。近来,在人类也证实该系统能够大幅提高人类卵细胞IVM的获卵率,以及所获卵的发育潜能。本文将论述CNP的作用原理,以及卵细胞双相IVM技术研究进展。