NPTX2基因概述及其相关疾病

Neuronal pentraxinⅡ(NPTX2)属于神经元五聚体蛋白家族,但其分布广泛,不局限于神经系统。近来发现NPTX2与恶性神经胶质瘤、帕金森病、发作性睡病、药物成瘾、肺癌、胰腺癌等疾病的发生相关。本文综述了NPTX2及其在神经系统内外疾病中作用的研究进展。

NPTX2甲基化在胰腺癌中的定量检测及诊断应用

目的:检测NPTX2甲基化水平在胰腺癌中变化并评价其用于胰腺癌诊断的价值。方法:在10例胰腺癌组织和10例癌旁正常胰腺组织中,分别应用定量RT-PCR和SYBR Green荧光掺入甲基化特异性定量检测法检测NPTX2 mRNA表达量及CpG岛的甲基化量。应用上述建立甲基化特异性定量检测方法分析NPTX2甲基化在胰腺癌及健康志愿者全血DNA中的差异。结果:NPTX2基因在胰腺癌组织中mRNA表达量低于癌旁正常胰腺组织(RQ,0.276±0.263vs3.526±3.037,P=0.001),而其甲基化指数(MI)较癌旁正常胰腺组织高[(9.02±7.52)%vs(1.28±0.98)%,P=0.003]。RQ与MI两者之间存在负相关关系(R=-0.552,P=0.012)。NPTX2基因MI在胰腺癌患者全血DNA中显著高于健康人[(1.80±1.76)%vs(0.84±0.45)%,P<0.05]。结论:在胰腺癌组织中NPTX2发生高甲基化变化,检测其在临床样品中的MI可辅助用于胰腺癌诊断。

胰液中CLDN5和NPTX2基因高甲基化在胰腺癌诊断中的意义

目的:探讨胰腺癌和慢性胰腺炎患者胰液中CLDN5和NPTX2基因高甲基化在胰腺癌诊断中的临床意义。方法:MSP方法检测21例胰腺癌和8例慢性胰腺炎患者胰液中CLDN5和NPTX2基因启动子区CpG岛高甲基化。结果:21例胰腺癌患者的胰液中,17例(81.0%)CLDN5基因高甲基化阳性;15例(71.4%)NPTX2基因高甲基化阳性。8例慢性胰腺炎患者的胰液中,各有1例(12.5%)CLDN5和NPTX2基因高甲基化阳性。结论:CLDN5和NPTX2基因高甲基化作为分子生物学标志物可用于胰腺癌的诊断,有较高的临床应用价值。

NPTX2基因DNA甲基化与胰腺癌的研究进展

神经元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)属于神经元正五聚体蛋白家族(NPs)的成员之一,参与细胞周期调控、细胞增殖、凋亡和致癌等生物学过程。近年来研究发现,在胰腺癌中DNA甲基化普遍存在,导致一些抑癌基因高甲基化而失活,NPTX2作为胰腺癌的一种抑癌基因,在胰腺癌癌前病变阶段就出现明显高甲基化。DNA甲基化可能是导致胰腺癌中NPTX2蛋白功能失活,表达沉默的机制之一。而DNA甲基化是肿瘤的早期、多发、可逆事件,有望作为胰腺癌早期诊断的潜在标志物以及治疗靶点。文章对NPTX2的DNA甲基化在胰腺癌中的最新研究进展做一综述。

NPTX2基因在肿瘤中的研究进展

肿瘤是一类严重威胁人类健康的疾病，其发生发展是一个多因素参与的复杂过程，涉及多种基因突变及表观遗传学上的改变。近年来，有研究发现NPTX2基因表达于睾丸、胰腺、心、肝、骨骼肌、垂体后叶和神经系统等，并以睾丸中表达最高，其广泛定位及异常表达与肿瘤有着千丝万缕的关系。NPTX2基因在许多肿瘤中都存在着过表达或高甲基化的现象，是潜在的肿瘤相关的诊断、预测生物标记物及治疗靶点。NPTX2基因与肾细胞癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤等疾病有着密切的关系。

人NPTX2真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立

目的构建人神经元正五聚蛋白2（NPTX2）真核表达载体，转染人胰腺癌细胞PANC1，建立稳定转染的细胞系。方法通过双酶切的方法获得人NPTX2全长cDNA，利用NotⅠ和EcoRⅠ酶切位点将其插入到真核表达载体pcDNA3．1（＋），经酶切和测序验证后，用脂质体转染法转染PANC1细胞，通过G418筛选，建立稳定转染的PANC1细胞，用实时定量PCR方法筛选NPTX2mRNA高表达克隆。结果成功构建了pcDNA3．1（＋）-NPTX2真核表达载体，并建立了稳定转染的PANC1细胞，成功表达了目的基因。结论真核表达载体的构建和稳定转染PANC1细胞系的建立为进一步研究NPTX2基因在胰腺癌细胞的作用奠定了良好的基础。

基于数据挖掘分析神经元正五聚体蛋白2在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的:通过数据挖掘分析神经元正五聚体蛋白2(NPTX2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及意义.方法:通过Oncomine、基因表达谱交互分析(GEPIA),以及人类蛋白质表达图谱(HPA)分别从mRNA水平和蛋白质水平上分析NPTX2在正常肾组织和ccRCC组织中的表达情况.使用GEPIA分析NPTX2与ccRCC临床分期及预后的相关性.经MethHC数据库分析NPTX2在ccRCC中的甲基化水平,利用String-DB分析NPTX2与上下游蛋白的相互作用.结果:在mRNA水平上,NPTX2在ccRCC组织中较正常肾组织显著高表达,且其表达水平与ccRCC病理分期呈正相关.TCGA数据分析结果显示,NPTX2高表达患者的总体生存率以及无病生存率明显低于低表达患者.免疫组化结果证实,NPTX2蛋白在ccRCC中也较正常肾组织高表达,且其启动子区甲基化水平明显增高.同时,NPTX2与AVP、MT-ATP6、MT-ATP8、NPAS4、RCN2等蛋白存在相互作用,并参与氧化磷酸化、ATP代谢过程等生物过程.结论:通过对肿瘤基因数据库的信息挖掘,发现NPTX2在ccRCC组织中呈高表达,且其高表达与患者预后有关.

胆汁中胆管癌相关基因甲基化状态与胆管癌病变关系研究

目的探讨胆汁中组织因子途径抑制物-2（TFPI-2）、叉头框E1（FOXE1）、神经元正五聚蛋白2（NPTX2）基因启动子区异常甲基化及其联合检测在胆管癌诊断中的价值。方法选择因梗阻性黄疸就诊临床考虑胆管癌患者，经ERCP抽取胆汁并行细胞刷刷检，纳入同期27例胆总管结石患者作为对照，采用甲基化特异性PCR（MSP）技术，检测并比较胆汁中TFPI-2、FOXE1、NPTX23种基因启动子区甲基化改变，比较联合检测3种基因启动子区甲基化与细胞刷病理检查诊断胆管癌的敏感度和特异度。结果40例患者中确诊胆管癌29例，胆管癌患者胆汁FOXE1和NPTX2的甲基化检出率明显高于胆总管结石患者（75．86％比25．93％，x^2=13．964，P〈0．05和44．82％比14．81％，x^2=4．622，P〈0．05）；胆汁中TFPI-2基因启动子区甲基化检出率在两组间差异无统计学意义（17．24％比18．52％x^2=0．016，P〉0．05）。与细胞刷病理检查相比，联合检测FOXE1、NPTX2启动子甲基化诊断胆管癌敏感度明显增高（86．20％比34．48％，x^2=14．122，P〈0．05）。结论胆管癌患者胆汁中FOXE1、NPTX2启动子甲基化阳性率明显增高，两者联合检测可明显提高胆管癌的诊断敏感度。