大鼠NR2B基因核心启动子区单核苷酸多态性研究

目的对大鼠NR2B基因核心启动子区进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)筛查及分析。方法提取16只健康SD大鼠海马组织基因组DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增NR2B基因核心启动子区序列和SNP库已报道的rs8169392所在区域序列,结合DNA测序方法进行SNP筛查和验证。结果在大鼠NR2B核心启动子区705bp中,发现1个新的SNP位点,为-217位C/T多态;本研究中未筛查到NCBI-SNP库报道的rs8169392。结论 -217位C/T多态的发现为NR2B基因多态性数据库提供了新信息。

人NR2B基因真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

目的克隆人NR2B基因，构建其真核表达载体，获得暂态表达NR2B的CHO细胞。方法RT—PCR方法克隆人NR2B基因，并插入真核表达载体pcDNA3．1中，将该重组载体转染至CHO细胞。通过RT-PCR、Western blot及间接免疫荧光鉴定细胞中NR2B的表达，通过流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果成功获得人NR2B基因，转染的CHO细胞可检测到NR2B的表达．表达NR2B的CHO细胞并不会凋亡。结论成功克隆和构建了人NR2B基因的真核表达载体，并在CHO细胞中得到了表达。

pDC515-nr2B重组质粒的构建及其免疫效应

目的构建pDC515-nr2B重组质粒,并研究其在体外表达及体内的免疫效应。方法根据本研究前期从噬菌体随机12肽库中筛选出的NR2B(N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基)表位DNA序列,合成两条部分互补的DNA单链,用PCR法合成NR2B表位DNA片段。将NR2B表位编码基因克隆入真核高效表达载体pDC515中,构建pDC515-nr2B重组质粒,经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切和DNA测序鉴定其正确性。在293fectinTM介导下将pDC515-nr2B体外转染293细胞后,经RT-PCR及免疫细胞化学染色法鉴定目的基因的表达。将10只SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组用100μg的pDC515-nr2B免疫,0d及7d各肌注1次,对照组于相同时间注射相同剂量的空质粒pDC515。免疫后14d,检测大鼠血清中抗NR2B抗体的水平。结果正确构建了pDC515-nr2B重组质粒。以其转染293细胞后,在转染的293细胞中用RT-PCR可检测到NR2B的mRNA,用免疫细胞化学染色法检测其胞质染色呈阳性。实验组大鼠的血清中可检测到抗NR2B抗体。结论成功地构建pDC515-nr2B重组质粒并可诱导SD大鼠产生相应的抗体。

补骨脂汤对血管性痴呆大鼠海马内雌激素受体-β、NMDAR2B基因表达的影响

目的:补骨脂汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆的作用。方法:通过双侧颈动脉结扎制作血管性痴呆模型,用RT-PCR及免疫组化方法测定海马内雌激素受体β(ER-β)、NMDAR2B(NR2B)受体基因的表达产物。结果:补骨脂汤组ER-β、NR2B基因表达的mRNA量明显高于模型组及银杏片组(P<0.05);补骨脂汤组大鼠海马CA3区的阳性细胞数均高于模型组、银杏片组(P<0.05)。结论:补骨脂汤能改善血管性痴呆大鼠的学习记忆,可能的作用途径是提高ER-β受体、NR2B受体的基因表达水平,从而提高学习记忆。

制造聪明不是梦

聪明的"杜吉" 在美国普林斯顿大学的生物实验室里,一个名叫"杜吉"的老鼠正在玩弄研究人员给它的LEGO玩具积木块.两个积木块中,一个是几天前它仅玩弄过5分钟的旧玩具,另一个是刚给的新玩具.只见杜吉明显地喜新厌旧,对旧积木块只瞄了两眼,就跑到新积木块那里,玩起来没个够.杜吉就跟大象一样,在见过一个物体5天后仍然能记起它,无论这物体是食品还是有害的东西.