目的研究抗人神经纤毛蛋白-1(Neuropilin1,NRP-1)单克隆抗体对肝癌Hep G2细胞的生长抑制作用及其机制。方法小鼠腹水法制备抗NRP-1单克隆抗体(NRP-1 m Ab)并用r Protein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测抗体的滴度水平。Western blot检测...目的研究抗人神经纤毛蛋白-1(Neuropilin1,NRP-1)单克隆抗体对肝癌Hep G2细胞的生长抑制作用及其机制。方法小鼠腹水法制备抗NRP-1单克隆抗体(NRP-1 m Ab)并用r Protein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测抗体的滴度水平。Western blot检测NRP-1 m Ab对Hep G2细胞的特异性,细胞免疫荧光和流式细胞术检测NRP-1蛋白在肝癌细胞株Hep G2上的表达,MTT法检测NRP-1 m Ab对Hep G2的生长抑制作用,Western blot检测ERK1/2、P-ERK1/2、Akt、P-Akt蛋白的表达水平。结果 SDS-PAGE和间接ELISA检测纯化的NRP-1 m Ab纯度为95%以上,效价为1×10^(-6);Western blot检测结果显示NRP-1 m Ab可与Hep G2细胞膜上的NRP-1蛋白特异性结合。细胞免疫荧光染色结果显示NRP-1定位于Hep G2细胞膜,流式细胞术结果显示NRP-1蛋白在Hep G2细胞上表达水平较高;MTT法检测结果显示NRP-1 m Ab对Hep G2细胞有生长抑制作用。Western blot检测到在不同浓度NRP-1 m Ab作用下,Hep G2细胞裂解液P-ERK1/2、P-Akt蛋白的条带信号逐渐减弱。结论纯化的NRP-1m Ab能抑制Hep G2细胞的生长,其抑制作用是通过EGF和HGF信号通路实现的。展开更多
目的研究和分析Doublecortin样激酶-1(Doublecortin Like Disease 1,DCLK1)单克隆抗体在结肠癌中的表达情况与相关影响因素。方法选取2018年7月—2022年6月哈尔滨工业大学附属黑龙江省医院收治的73例结直肠癌患者作为研究对象,根据患者...目的研究和分析Doublecortin样激酶-1(Doublecortin Like Disease 1,DCLK1)单克隆抗体在结肠癌中的表达情况与相关影响因素。方法选取2018年7月—2022年6月哈尔滨工业大学附属黑龙江省医院收治的73例结直肠癌患者作为研究对象,根据患者肿瘤组织中DCLK1表达水平,将其分为DCLK1低表达组(n=31)与DCLK1高表达组(n=42),分析DCLK1单克隆抗体在结直肠癌中表达的影响因素。结果DCLK1高表达组与DCLK1低表达组肿瘤直径、肿瘤分期(Tumor Node Metastasis,TNM)、浸润深度、淋巴结是否转移、有无脉管、肿瘤病灶是否远处转移及肿瘤分化程度对比,差异有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析研究结果表明,肿瘤组织中DCLK1高表达水平影响因素包括淋巴结转移、浸润深度、TNM分期、肿瘤直径、肿瘤病灶远处转移、肿瘤分化程度(OR=1.079、1.235、1.548、1.784、1.745、2.026,P均<0.05)。结论肿瘤组织中DCLK1高表达水平影响因素包括淋巴结转移、浸润深度、TNM分期、肿瘤直径、肿瘤病灶远处转移、肿瘤分化程度,临床可通过检测上述指标的方式判断肿瘤组织中DCLK1表达水平。展开更多
文摘目的研究抗人神经纤毛蛋白-1(Neuropilin1,NRP-1)单克隆抗体对肝癌Hep G2细胞的生长抑制作用及其机制。方法小鼠腹水法制备抗NRP-1单克隆抗体(NRP-1 m Ab)并用r Protein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测抗体的滴度水平。Western blot检测NRP-1 m Ab对Hep G2细胞的特异性,细胞免疫荧光和流式细胞术检测NRP-1蛋白在肝癌细胞株Hep G2上的表达,MTT法检测NRP-1 m Ab对Hep G2的生长抑制作用,Western blot检测ERK1/2、P-ERK1/2、Akt、P-Akt蛋白的表达水平。结果 SDS-PAGE和间接ELISA检测纯化的NRP-1 m Ab纯度为95%以上,效价为1×10^(-6);Western blot检测结果显示NRP-1 m Ab可与Hep G2细胞膜上的NRP-1蛋白特异性结合。细胞免疫荧光染色结果显示NRP-1定位于Hep G2细胞膜,流式细胞术结果显示NRP-1蛋白在Hep G2细胞上表达水平较高;MTT法检测结果显示NRP-1 m Ab对Hep G2细胞有生长抑制作用。Western blot检测到在不同浓度NRP-1 m Ab作用下,Hep G2细胞裂解液P-ERK1/2、P-Akt蛋白的条带信号逐渐减弱。结论纯化的NRP-1m Ab能抑制Hep G2细胞的生长,其抑制作用是通过EGF和HGF信号通路实现的。
