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茶树硝态氮转运蛋白NRT1.1基因的克隆及表达分析 被引量:7
1
作者 杨亦扬 胡雲飞 +3 位作者 万青 李荣林 王枫 阮建云 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期505-512,共8页
以茶树(Camellia sinensis(L.))品种龙井43为试材,采用PCR结合RACE技术,克隆得到硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的c DNA全长序列,基因序列全长1 880 bp,其中开放阅读框(ORF)1 788 bp,编码595个氨基酸,预测蛋白质分子量为65.9 k D,理论等电... 以茶树(Camellia sinensis(L.))品种龙井43为试材,采用PCR结合RACE技术,克隆得到硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的c DNA全长序列,基因序列全长1 880 bp,其中开放阅读框(ORF)1 788 bp,编码595个氨基酸,预测蛋白质分子量为65.9 k D,理论等电点为8.99,命名为Cs NRT1.1。序列分析表明,Cs NRT1.1与葡萄NRT1.1氨基酸序列的相似性最高。通过生物信息学分析,对Cs NRT1.1的氨基酸理化性质、亲/疏水性、跨膜区域及亚细胞定位进行了预测。实时定量PCR表达分析表明,茶树根和叶片中Cs NRT1.1在1 mol·L^(-1) NO3-处理5 min内均受到抑制,叶部Cs NRT1.1表达量0.5 h后即达到最大值,24 h内各个时间点均高于根部,根中表达量Cs NRT1.1始终低于对照。本研究结果为研究茶树对NO3-的吸收、转运和调控机理提供了分子生物学基础。 展开更多
关键词 茶树 硝态氮 nrt1.1基因 实时定量PCR
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植物NRT1.1的研究进展及其在苎麻研究中的展望 被引量:2
2
作者 侯美 喻春明 《中国麻业科学》 2017年第4期207-214,共8页
在自然条件下,硝酸盐是非固氮植物生长过程中从外界环境吸收的主要氮源。植物通过一系列硝酸盐转运蛋白实现对硝态氮的吸收与利用。NRT1.1(硝酸盐转运蛋白nitrate transporter1.1,NRT1.1)是植物根系吸收硝酸盐后第一个发挥作用的蛋白,... 在自然条件下,硝酸盐是非固氮植物生长过程中从外界环境吸收的主要氮源。植物通过一系列硝酸盐转运蛋白实现对硝态氮的吸收与利用。NRT1.1(硝酸盐转运蛋白nitrate transporter1.1,NRT1.1)是植物根系吸收硝酸盐后第一个发挥作用的蛋白,其通过氨基酸序列中第101位苏氨酸是否发生磷酸化修饰而表现双亲和性转运功能;NRT1.1可作为一种信号分子,调控侧根的生长与发育;NRT1.1除了参与硝酸盐响应和转运过程,还参与植物对重金属的吸收。文章结合最新的研究报道,综述了植物硝酸盐转运蛋白NRT1.1的研究进展,并对其在苎麻研究中的作用进行展望,以期为提高苎麻氮同化效率与逆境抗性能力研究提供参考,并为苎麻育种提供理论依据与方向。 展开更多
关键词 硝酸盐 nrt1.1 转运蛋白 信号分子 苎麻
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高羊茅硝态氮转运蛋白基因NRT1.1的克隆及表达模式分析
3
作者 赵丽丽 王小利 +1 位作者 陈超 董瑞 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期240-246,共7页
为探究高羊茅(Festuca arundinacea)硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的表达模式,本研究以黔草1号高羊茅为试验材料,采用RACE和RT-qPCR技术对高羊茅NRT1.1基因的cDNA全长序列进行扩增,并对其不同胁迫处理下的表达情况进行分析。生物信息学分... 为探究高羊茅(Festuca arundinacea)硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的表达模式,本研究以黔草1号高羊茅为试验材料,采用RACE和RT-qPCR技术对高羊茅NRT1.1基因的cDNA全长序列进行扩增,并对其不同胁迫处理下的表达情况进行分析。生物信息学分析发现,高羊茅NRT1.1的理论等电点为4.81,平均亲小性为0.919,含有约32.63%α-螺旋、7.63%β-转角和53.73%不规则卷曲。结果表明,NRT1.1基因的cDNA序列全长为2328 bp,编码606个氨基酸,预测蛋白质分子量为193.9 kDa,且高羊茅NRT1.1与黑麦草NRT1.1氨基酸序列的相似性最高。RT-qPCR表达分析发现,高羊茅叶片NRT1.1受低氮处理0.5~1 h时表达量达到峰值,显著(P<0.05)高于对照组;在干旱和热处理下,NRT1.1表达量分别在6 h和12 h时达到峰值,且显著(P<0.05)高于对照组;在盐处理下,仅在6 h时NRT1.1表达量高于对照组,其余时间均受显著(P<0.05)抑制。本研究结果为解析高羊茅NRT1.1基因的表达模式提供了分子生物学基础。 展开更多
关键词 高羊茅 nrt1.1基因 RACE 实时定量PCR 胁迫
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基于PCR-HRM的水稻氮高效基因NRT1.1B功能标记开发及应用
4
作者 房文文 王海凤 +4 位作者 郭涛 薛芳 姜艳芳 张焕霞 张士永 《山东农业科学》 北大核心 2023年第8期21-26,共6页
水稻对氮肥的高效与合理利用是发展绿色农业的重要保障。培育含有氮高效基因的水稻品种,是提高氮肥利用率最经济有效的途径。本研究开发了一个用于HRM(高分辨率熔解曲线)高通量检测硝酸盐转运蛋白基因NRT1.1B的分子功能标记。利用此标记... 水稻对氮肥的高效与合理利用是发展绿色农业的重要保障。培育含有氮高效基因的水稻品种,是提高氮肥利用率最经济有效的途径。本研究开发了一个用于HRM(高分辨率熔解曲线)高通量检测硝酸盐转运蛋白基因NRT1.1B的分子功能标记。利用此标记对78份山东地方水稻品种进行NRT1.1B基因分型,发现有13个水稻品种为含有NRT1.1B的高效单倍型,表明NRT1.1B在山东省水稻品种中分布较少。利用测序分析验证,测序结果与本标记分型结果一致。可见,本研究开发的功能标记能够快速准确鉴定出NRT1.1B基因型,可为筛选和培育氮高效水稻新品种提供有力的技术支撑。 展开更多
关键词 水稻 高分辨率熔解曲线(HRM) 氮高效基因nrt1.1B 分子功能标记
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2015—2017年东北地区PKV流行情况调查及其VP1基因的遗传变异分析 被引量:2
5
作者 齐珊珊 苏明俊 +3 位作者 李春秋 翟军军 孔凡志 孙东波 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第10期69-73,共5页
为了解我国东北地区猪嵴病毒(PKV)的流行情况及其VP1基因的遗传进化特征,试验通过巢式RT-PCR法对2015—2017年采集自中国东北地区(黑龙江省、吉林省、辽宁省)的122份样品进行PKV检测,分析PKV感染与腹泻的相关性,并针对PKV VP1基因进行... 为了解我国东北地区猪嵴病毒(PKV)的流行情况及其VP1基因的遗传进化特征,试验通过巢式RT-PCR法对2015—2017年采集自中国东北地区(黑龙江省、吉林省、辽宁省)的122份样品进行PKV检测,分析PKV感染与腹泻的相关性,并针对PKV VP1基因进行遗传进化分析。结果表明:利用RT-PCR法检测本试验采集的122份样品,扩增PKV 3D基因的PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳,得到的目的片段与预期大小相符。PKV总检出率为88.5%(108/122),其中腹泻样品和健康样品的阳性率分别为87.9%(94/107)和93.3%(14/15)。通过卡方检验分析发现,PKV的感染与腹泻发生不存在统计学相关性(P>0.05)。本试验鉴定的7株PKV的VP1基因核苷酸同源性为80.8%~99.9%,推导氨基酸同源性为86.6%~99.6%。PKV毒株被划分为4个进化分支,本试验鉴定的7株PKV毒株在1,3,4分支均有分布。说明PKV在中国东北地区猪群中有较高的感染率,且其毒株呈现出遗传多样性。 展开更多
关键词 猪嵴病毒(PKV) VP1基因 巢式RT-PCR 遗传进化 腹泻
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不明原因的颅内感染与博尔纳病病毒感染的研究 被引量:6
6
作者 姚能云 徐平 郭振元 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2008年第2期124-127,共4页
目的分别检测不明原因的颅内感染患者外周血单个核细胞(PBMCs)和脑脊液有核细胞(CSFMCs)中博尔纳病病毒(BDV)p24基因,探讨不明原因颅内感染患者与BDV感染的关系及阳性患者的临床特征。方法用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR... 目的分别检测不明原因的颅内感染患者外周血单个核细胞(PBMCs)和脑脊液有核细胞(CSFMCs)中博尔纳病病毒(BDV)p24基因,探讨不明原因颅内感染患者与BDV感染的关系及阳性患者的临床特征。方法用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)方法检测不明原因颅内感染患者及对照者PBMCs或CSFMCs中BDV p24基因片段,同时用β-肌动蛋白(-βactin)作为内参照,并总结阳性患者的临床特征。结果PBMCs中BDV p24基因片段检测结果显示,实验组7例阳性,对照组均为阴性,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组进行CSF检查的32例颅内感染患者中4例外周血和CSF标本BDV p24基因片段检测均为阳性,阳性基因片段产物测序后与BDV标准病毒株V和马源的BDV病毒株H1766序列比较,结果同源性分别为95.35%和98.84%,在4个位点出现基因突变(nt1649 T→C,nt1656 G→A,nt1670 C→T,nt1676 C→T);7例BDV p24基因片段阳性患者主要以精神行为异常为起病方式,患者与动物关系密切,其他临床特征无特殊。结论贵州省遵义市部分不明原因颅内感染的发生与BDV感染有关,主要以精神行为异常为临床特征。 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链反应 肌动蛋白类 基因 p24 博尔纳病病毒 荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应
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MAGE-3基因mRNA的表达在胸腔积液鉴别诊断中的价值 被引量:2
7
作者 刘静 岳红梅 胡泉 《社区医学杂志》 2008年第11期1-3,共3页
目的研究MAGE-3基因mRNA在胸腔积液中的表达,探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的价值。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)方法,检测35例患者(25例恶性,10例良性)胸腔积液中MAGE-3的表达情况。结果10例良性胸腔... 目的研究MAGE-3基因mRNA在胸腔积液中的表达,探讨MAGE-3基因作为良、恶性胸腔积液鉴别诊断指标的价值。方法采用巢式逆转录-聚合酶链反应(nRT-PCR)方法,检测35例患者(25例恶性,10例良性)胸腔积液中MAGE-3的表达情况。结果10例良性胸腔积液组中,均未见有MAGE-3特异性条带;25例恶性胸腔积液组中,有14例可见MAGE-3特异性扩增条带,MAGE-3基因表达阳性率为56.00%,其敏感性、特异性、诊断符合率分别为56.00%、100.00%、68.57%。结论检测胸腔积液中MAGE-3基因mRNA的表达,可以作为鉴别良、恶性胸腔积液的一个指标。 展开更多
关键词 肺癌 MAGE-3基因 胸腔积液 巢式逆转录-聚合酶链反应
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和田羊毛囊KAP1.1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:1
8
作者 刘鑫 李树伟 姜仁军 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期41-43,共3页
为了分析和田羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP)1.1基因,试验以南疆地方品种羊(和田羊)为样本,从和田羊毛囊中提取总RNA,设计1对引物,通过PCR反应扩增出长度为535 bp的基因片段,连接到pMD18-T载体上。结果表明:克隆得到和田羊毛囊KAP1.1基因成... 为了分析和田羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP)1.1基因,试验以南疆地方品种羊(和田羊)为样本,从和田羊毛囊中提取总RNA,设计1对引物,通过PCR反应扩增出长度为535 bp的基因片段,连接到pMD18-T载体上。结果表明:克隆得到和田羊毛囊KAP1.1基因成熟蛋白编码序列,序列长度与GenBank上发表的序列长度相同,经生物信息学软件分析,有2处碱基发生突变,同源性为99%,说明试验成功克隆了KAP1.1基因。 展开更多
关键词 和田羊毛囊 角蛋白关联蛋白(KAP)1 1基因 克隆 生物信息学分析
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Efficient allelic replacement in rice by gene editing: A case study of the NRT1.1B gene 被引量:12
9
作者 Jingying Li Xin Zhang +6 位作者 Yongwei Sun Jiahui Zhang Wenming Du Xiuping Guo Shaoya Li Yunde Zhao Lanqin Xia 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2018年第7期536-540,共5页
Summary Precise replacement of an existing allele in commercial cultivars with an elite allele is a major goal in crop breeding. A single nucleotide polymorphism in the NRT1.1B gene between japonica and indica rice is... Summary Precise replacement of an existing allele in commercial cultivars with an elite allele is a major goal in crop breeding. A single nucleotide polymorphism in the NRT1.1B gene between japonica and indica rice is responsible for the improved nitrogen use efficiency in indica rice. Herein, we precisely replaced the japonica NRT1.1B allele with the indica allele, in just one generation, using CRISPR/Cas9 gene-editing technology. No additional selective pressure was needed to enrich the precise replacement events. 展开更多
关键词 HDR B gene Figure A case study of the NRT Efficient allelic replacement in rice by gene editing
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蔗糖对拟南芥根系偏斜角度的影响
10
作者 贾容容 杨亚婷 +2 位作者 姬新宇 张净然 田喜元 《中国农业文摘(农业工程)》 2022年第2期24-27,共4页
本文以野生型拟南芥Col-0及NRT1.1突变体nrt1.1-1和chl1-5为材料,通过在培养基中添加不同浓度的蔗糖,研究了蔗糖对拟南芥根系偏斜程度的影响。结果表明,0,3%蔗糖处理野生型与突变体拟南芥的根系偏斜角度有显著性差异,突变体根系偏斜角... 本文以野生型拟南芥Col-0及NRT1.1突变体nrt1.1-1和chl1-5为材料,通过在培养基中添加不同浓度的蔗糖,研究了蔗糖对拟南芥根系偏斜程度的影响。结果表明,0,3%蔗糖处理野生型与突变体拟南芥的根系偏斜角度有显著性差异,突变体根系偏斜角度分别是野生型的1.34-1.80倍(nrt1.1-1)和1.71-2.05倍(chl1-5)。野生型与突变体拟南芥的根系偏斜角度均表现为随蔗糖浓度的增加而增加,并在2%蔗糖处理达到最高。但3%蔗糖处理时,野生型Col-0根系偏斜角度有显著性下降,而NRT1.1突变体没有显著性变化。该研究为深入研究氮代谢调控碳代谢提供理论依据。 展开更多
关键词 蔗糖 拟南芥 根系偏斜 nrt1.1
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水稻氮高效利用基因NRT1.1B InDel分子标记的开发与应用 被引量:8
11
作者 李军 李白 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3405-3413,共9页
水稻NRT1.1B基因是已经克隆并进行功能验证的氮高效利用基因,具有很高的应用价值。根据籼粳稻NRT1.1B基因的基因组序列比对发现,籼型NRT1.1B基因及粳型NRT1.1B基因内含子序列中存在插入/缺失位点。对30个常规籼粳稻的NRT1.1B基因内含子... 水稻NRT1.1B基因是已经克隆并进行功能验证的氮高效利用基因,具有很高的应用价值。根据籼粳稻NRT1.1B基因的基因组序列比对发现,籼型NRT1.1B基因及粳型NRT1.1B基因内含子序列中存在插入/缺失位点。对30个常规籼粳稻的NRT1.1B基因内含子序列进行PCR扩增、测序及序列比对,发现NRT1.1B基因内含子存在6个In Del位点,籼型NRT1.1B基因比粳型NRT1.1B基因缺失55 bp。根据插入/缺失位点设计出In Del分子标记,对15个籼稻常规稻品种、15个粳稻常规稻品种、3个籼粳杂交稻品种及20个F2代育种材料进行NRT1.1B籼粳基因型鉴定。检测实验表明与通过NRT1.1B基因的SNP位点开发的功能标记的检测完全一致。通过该标记可以准确鉴定NRT1.1B基因的纯合籼型、纯合粳型及杂合基因型,该方法成本低、简单、可靠,可用于NRT1.1B基因的鉴定和分子标记辅助育种。 展开更多
关键词 水稻 氮高效利用 nrt1.1B基因 INDEL标记
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DEP1与NRT1.1B基因的遗传互作对水稻氮素利用的影响
12
作者 李旭 付立东 +6 位作者 王宇 隋鑫 任海 吕小红 马畅 杜萌 毛艇 《作物杂志》 北大核心 2021年第6期22-27,共6页
提高氮素利用效率一直是水稻遗传改良攻关的重点方向。直立穗等位基因dep1及籼稻等位基因nrt1.1b均有利于提高水稻氮素利用效率,因此,阐明DEP1与NRT1.1B基因的互作关系对水稻氮素利用的影响对培育氮高效水稻品种具有重要指导意义。以携... 提高氮素利用效率一直是水稻遗传改良攻关的重点方向。直立穗等位基因dep1及籼稻等位基因nrt1.1b均有利于提高水稻氮素利用效率,因此,阐明DEP1与NRT1.1B基因的互作关系对水稻氮素利用的影响对培育氮高效水稻品种具有重要指导意义。以携带不同DEP1与NRT1.1B基因型组合的重组自交系为供试材料,在低、中及高氮条件下(分别记为LN、MN和HN),分析了DEP1与NRT1.1B基因间不同的遗传互作方式对水稻氮素利用、产量及其构成因素的影响。结果表明,不同氮素条件下,基因型组合dep1/nrt1.1b具有最大的氮素收获指数;LN条件下,nrt1.1b基因有利于提高氮素利用效率,在MN和HN条件下dep1基因有利于提高氮素利用效率;携带dep1基因株系有效穗数和穗粒数显著提升,其产量均值显著高于其他株系,而NRT1.1B基因对产量无显著影响。 展开更多
关键词 水稻 氮素利用效率 DEP1基因 nrt1.1B基因 遗传互作
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水稻氮高效基因NRT1.1B功能标记开发和资源筛选 被引量:8
13
作者 方琳 陶亚军 +9 位作者 张灵 范方军 张爱伟 李文奇 王芳权 许扬 陈智慧 蒋彦婕 杨杰 王军 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第23期7795-7800,共6页
氮是水稻生产发育过程中所必须的大量营养元素,但是大量的氮肥投入在提高产量的同时对环境造成了严重危害。选用含有氮高效基因的水稻品种提高水稻自身的氮肥利用效率是减少氮肥使用量降低环境氮污染的最有效途径之一。NRT1.1B是一个影... 氮是水稻生产发育过程中所必须的大量营养元素,但是大量的氮肥投入在提高产量的同时对环境造成了严重危害。选用含有氮高效基因的水稻品种提高水稻自身的氮肥利用效率是减少氮肥使用量降低环境氮污染的最有效途径之一。NRT1.1B是一个影响水稻籼、粳亚种间氮肥利用效率的关键基因,主要分布在籼稻品种中。为了筛选携带NRT1.1B基因的粳稻资源,根据氮高效基因NRT1.1B与其等位基因nrt1.1b在功能区域存在的单核苷酸变异,设计和筛选出NRT1.1B的等位基因特异PCR功能标记1nrt/1NRT。结合测序分析验证,1nrt/1NRT可以准确快速鉴定出NRT1.1B的不同基因型。利用1nrt/1NRT对71份籼稻品种和134份粳稻品种进行NRT1.1B基因型检测,结果表明71份籼稻品种均携带NRT1.1B基因,134份粳稻品种均携带nrt1.1b基因。进一步对172太湖流域地方粳稻资源和99份粳稻育种中间品系进行NRT1.1B基因型检测,结果发现粳稻品系‘常粳144’携带NRT1.1B基因,测序分析也进一步证实了该结果。本研究为利用NRT1.1B改良粳稻氮高效育种提供了科学依据。 展开更多
关键词 水稻(Oryza sativa L.) 氮高效 nrt1.1B 功能标记 等位基因特异PCR
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一种水稻高氮利用率NRT1.1B基因功能标记的开发与应用 被引量:12
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作者 田孟祥 余本勋 +4 位作者 张时龙 何友勋 吴瑞 田井平 叶永印 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期410-416,共7页
水稻NRT1.1B是一个高氮利用率基因,在育种中有着重要的应用价值。为提高NRT1.1B基因的选择效率,根据野生型NRT1.1B与突变型nrt1.1b基因存在的单核苷酸差异,结合四引物扩增受阻突变体系PCR的技术原理开发基因功能标记。使用8份含NRT1.1B... 水稻NRT1.1B是一个高氮利用率基因,在育种中有着重要的应用价值。为提高NRT1.1B基因的选择效率,根据野生型NRT1.1B与突变型nrt1.1b基因存在的单核苷酸差异,结合四引物扩增受阻突变体系PCR的技术原理开发基因功能标记。使用8份含NRT1.1B基因的常规籼稻、8份含nrt1.1b基因的常规粳稻及4份含NRT1.1B/nrt1.1b基因的F1材料对功能标记进行检测验证,结果表明,所开发的基因功能标记可准确区分NRT1.1B基因的纯合显性、纯合隐性和杂合基因型,其扩增带型与基因型完全吻合,是一种鉴定NRT1.1B基因的有效方法。该方法操作简便,且费用低廉,可广泛应用于水稻NRT1.1B基因的资源鉴定和分子标记辅助选择育种。利用NRT1.1B功能标记,对本课题组的籼粳杂交育种材料进行鉴定,筛选出了一批含高氮利用率NRT1.1B的材料,为进一步的育种利用奠定了基础。 展开更多
关键词 水稻 高氮利用率 nrt1.1B基因 功能标记 开发与应用
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水稻氮高效利用基因NRT1.1B对粳稻农艺性状的影响 被引量:5
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作者 李军 李白 陈贵 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期3629-3636,共8页
水稻硝酸盐转运蛋白基因NRT1.1B可以提高水稻氮肥利用率。为研究NRT1.1B基因在高产背景下对粳稻的增产效应,我们构建了以‘秀水134’为轮回亲本的NRT1.1B基因近等基因系并进行主要农艺性状分析。结果发现,NRT1.1B基因可以提高粳稻苗期... 水稻硝酸盐转运蛋白基因NRT1.1B可以提高水稻氮肥利用率。为研究NRT1.1B基因在高产背景下对粳稻的增产效应,我们构建了以‘秀水134’为轮回亲本的NRT1.1B基因近等基因系并进行主要农艺性状分析。结果发现,NRT1.1B基因可以提高粳稻苗期硝酸盐含量及有效穗数,苗期硝酸盐含量提高7.7%~195.4%,分蘖数提高4.8%~16.0%,有效穗数提高3.6%~11.8%。NRT1.1B基因可能与早熟基因连锁,含有籼型NRT1.1B基因的材料早熟4~6 d,虽然有效穗数提高,但小区产量并未增加,可能与生育期缩短有关。研究结果表明,在高产背景下NRT1.1B基因可以促进粳稻的硝酸盐吸收和利用、增加粳稻的有效穗数,在提高粳稻产量方面具有很大应用价值。 展开更多
关键词 粳稻 氮高效利用 nrt1.1B基因 农艺性状
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Abscisic acid signaling negatively regulates nitrate uptake via phosphorylation of NRT1.1 by SnRK2s in Arabidopsis 被引量:5
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作者 Hang Su Tian Wang +5 位作者 Chuanfeng Ju Jinping Deng Tianqi Zhang Mengjiao Li Hui Tian Cun Wang 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2021年第3期597-610,共14页
Nitrogen(N)is a limiting nutrient for plant growth and productivity.The phytohormone abscisic acid(ABA)has been suggested to play a vital role in nitrate uptake in fluctuating N environments.However,the molecular mech... Nitrogen(N)is a limiting nutrient for plant growth and productivity.The phytohormone abscisic acid(ABA)has been suggested to play a vital role in nitrate uptake in fluctuating N environments.However,the molecular mechanisms underlying the involvement of ABA in N deficiency responses are largely unknown.In this study,we demonstrated that ABA signaling components,particularly the three subclass Ⅲ SUCROSE NON-FERMENTING1(SNF1)-RELATED PROTEIN KINASE 2 S(SnRK2)proteins,function in root foraging and uptake of nitrate under N deficiency in Arabidopsis thaliana.The snrk2.2 snrk2.3 snrk2.6 triple mutant grew a longer primary root and had a higher rate of nitrate influx and accumulation compared with wild-type plants under nitrate deficiency.Strikingly,SnRK2.2/2.3/2.6 proteins interacted with and phosphorylated the nitrate transceptor NITRATE TRANSPORTER1.1(NRT1.1)in vitro and in vivo.The phosphorylation of NRT1.1 by SnRK2 s resulted in a significant decrease of nitrate uptake and impairment of root growth.Moreover,we identified NRT1.1Ser585 as a previously unknown functional site:the phosphomimetic NRT1.1S585 D was impaired in both low-and high-affinity transport activities.Taken together,our findings provide new insight into how plants fine-tune growth via ABA signaling under N deficiency. 展开更多
关键词 abscisic acid nitrogen deficiency nrt1.1 Sn RK2.2/2.3/2.6
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Improving Nitrogen Use Efficiency in Rice through Enhancing Root Nitrate Uptake Mediated by a Nitrate Transporter, NRT1.1B 被引量:7
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作者 ZhiChang Chen JianFeng Ma 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2015年第9期463-465,共3页
Nitrogen (N) is one of most important nutrients for crop production, which makes up 1%-5% of total plant dry matter (Marschner, 2012). Due to the limited availability of N in soil, application of N fertilizers has... Nitrogen (N) is one of most important nutrients for crop production, which makes up 1%-5% of total plant dry matter (Marschner, 2012). Due to the limited availability of N in soil, application of N fertilizers has been an important agronomic practice to increase crop yield. However, over-application of N fertilizers has caused pollution of N in soil, water and air. It was estimated that the nitrogen use efficiency (NUE, the total biomass or grain yield produced per unit of applied fertilizer N) in cereal crops is as low as 33% (Raun and Johnson, 1999). Therefore, improving NUE together with reducing application of N fertilizers is an important issue for environment and sustainable production of crops. This is especially important for rice, which is a staple food for half population in the world. 展开更多
关键词 nrt1.1B Improving Nitrogen Use Efficiency in Rice through Enhancing Root Nitrate Uptake Mediated by a Nitrate Transporter
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Nitrate transporter NRT1.1 and anion channel SLAH3 form a functional unit to regulate nitrate-dependent alleviation of ammonium toxicity 被引量:1
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作者 Chengbin Xiao Doudou Sun +7 位作者 Beibei Liu Xianming Fang Pengcheng Li Yao Jiang Mingming He Jia Li Sheng Luan Kai He 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2022年第4期942-957,共16页
Ammonium(NH_(4)^(+))and nitrate(NO_(3)^(-))are major inorganic nitrogen(N)sources for plants.When serving as the sole or dominant N supply,NH_(4)^(+)often causes root inhibition and shoot chlorosis in plants,known as ... Ammonium(NH_(4)^(+))and nitrate(NO_(3)^(-))are major inorganic nitrogen(N)sources for plants.When serving as the sole or dominant N supply,NH_(4)^(+)often causes root inhibition and shoot chlorosis in plants,known as ammonium toxicity.NO_(3)^(-) usually causes no toxicity and can mitigate ammonium toxicity even at low concentrations,referred to as nitrate-dependent alleviation of ammonium toxicity.Our previous studies indicated a NO_(3)^(-) efflux channel SLAH3 is involved in this process.However,whether additional components contribute to NO_(3)^(-)-mediated NH_(4)^(+)detoxification is unknown.Previously,mutations in NO_(3)^(-) transporter NRT1.1 were shown to cause enhanced resistance to high concentrations of NH_(4)^(+).Whereas,in this study,we found when the high-NH_(4)^(+) medium was supplemented with low concentrations of NO_(3)^(-),nrt1.1 mutant plants showed hyper-sensitive phenotype instead.Furthermore,mutation in NRT1.1 caused enhanced medium acidification under high-NH_(4)^(+)/Iow-NO_(3)^(-) condition,suggesting NRT1.1 regulates ammonium toxicity by facilitating H+uptake.Moreover,NRT1.1 was shown to interact with SLAH3 to form a transporter-channel complex.Interestingly,SLAH3 appeared to affect NO_(3)^(-) influx while NRT1.1 influenced NO_(3)^(-) efflux,suggesting NRT1.1 and SLAH3 regulate each other at protein and/or gene expression levels.Our study thus revealed NRT1.1 and SLAH3 form a functional unit to regulate nitrate-dependent alleviation of ammonium toxicity through regulating NO_(3)^(-) transport and balancing rhizosphere acidification. 展开更多
关键词 ammonium toxicity NITRATE rhizosphere acidification nrt1.1 SLAH3
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斑马鱼Gfi1.1基因的克隆及其体外转录
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作者 朱贤敏 姜利军 +3 位作者 赵磊 关军 尹琎 张义成 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第10期1818-1820,1812,共4页
目的:克隆斑马鱼Gfi1.1基因的全长cDNA,运用T7 RNA聚合酶对含有Gfi1.1基因的ORF区进行体外转录,在体外合成5端带有帽子结构的Gfi1.1 mRNA分子,为后续研究斑马鱼Gfi1.1基因的功能打下基础。方法:应用RT-PCR从斑马鱼组织中扩增出Gfi1.1 c... 目的:克隆斑马鱼Gfi1.1基因的全长cDNA,运用T7 RNA聚合酶对含有Gfi1.1基因的ORF区进行体外转录,在体外合成5端带有帽子结构的Gfi1.1 mRNA分子,为后续研究斑马鱼Gfi1.1基因的功能打下基础。方法:应用RT-PCR从斑马鱼组织中扩增出Gfi1.1 cDNA片段,经回收纯化与pGM-T载体连接并转化感受态细菌DH-5α,通过蓝白筛选酶切鉴定阳性菌落,小量提取质粒,Nde I限制性内切酶线性化pGM-T-Gfi1.1质粒,运用T7 RNA聚合酶对Gfi1.1基因进行体外转录及加帽。经凝胶电泳对目的片段进行鉴定。结果:RT-PCR扩增获得约1.2 kb的DNA片段,DNA序列分析的结果与GenBank上的序列(NM_001020776)一致,酶切线性化及体外转录加帽pGM-T-Gfi1.1,凝胶电泳鉴定RNA分子大小与预期完全一致。结论:成功克隆斑马鱼Gfi1.1基因并体外转录及加帽pGM-T-Gfi1.1。 展开更多
关键词 Gfi1 1基因 克隆 体外转录
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植物硝酸盐转运蛋白研究进展 被引量:37
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作者 张合琼 张汉马 +1 位作者 梁永书 南文斌 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期141-149,共9页
氮是植物生长发育所必需的大量元素,能构成有机分子并参与植物体内各种代谢活动。硝酸盐作为植物生长发育过程中的主要无机氮源,不仅是植物的营养元素,也可以作为信号分子调控植物的形态建成、生理响应和相关基因的表达,从而应对环境硝... 氮是植物生长发育所必需的大量元素,能构成有机分子并参与植物体内各种代谢活动。硝酸盐作为植物生长发育过程中的主要无机氮源,不仅是植物的营养元素,也可以作为信号分子调控植物的形态建成、生理响应和相关基因的表达,从而应对环境硝酸盐浓度的变化和自身生理状态的需求。硝酸盐转运体参与植物对硝酸盐的吸收和分配。本文结合最新报道,从硝酸盐的吸收、转运和分配以及硝酸盐转运体1.1(NRT1.1)的作用机制等方面系统综述硝酸盐在植物生长发育中的作用机理以及硝酸盐转运体的研究进展,以期为后续研究提供参考。 展开更多
关键词 硝酸盐转运体 作用机制 nrt1.1
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