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牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因克隆及序列分析
被引量:
1
1
作者
赵月兰
郭红斌
+3 位作者
张磊
秦建华
张宁
张保宁
《中国农学通报》
CSCD
2007年第6期1-6,共6页
【目的】对牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因进行克隆及序列分析,为阐明本病致病机理,更好的控制BVDV感染、流行提供理论依据。【方法】以牛病毒性腹泻病毒河北分离株(HB-DCZ)基因组RNA为模板,扩增BVDVHB-DCZ株基因组NS2-3片段cDNA...
【目的】对牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因进行克隆及序列分析,为阐明本病致病机理,更好的控制BVDV感染、流行提供理论依据。【方法】以牛病毒性腹泻病毒河北分离株(HB-DCZ)基因组RNA为模板,扩增BVDVHB-DCZ株基因组NS2-3片段cDNA。将PCR产物克隆后进行PCR及双酶切鉴定。克隆产物进行序列测定及分析。【结果】HB-DCZcDNA体外扩增获得特异性条带,大小约为665bp,表明该分离毒株基因组中无插入序列。PCR产物克隆,提取重组质粒,扩增获得特异性的DNA条带,长度约为665bp,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,获得两条DNA片段,长度分别为2600bp和702bp左右,与理论值相符。序列测定结果表明,克隆得到的NS2-3重要区扩增片段共665核苷酸,NS2-3重要区的蛋白质由208个氨基酸残基组成。HB-DCZ毒株NS2-3重要区核苷酸序列与已公开发表的BVDV其他毒株相比的同源性依次为184株99.1%,ZM195株97.4%,Osloss株92.3%,C_(24)V株77%,NADL株76.4%。HB-DCZ在NS2-3扩增区域中既没有外源序列的插入,也没有基因重组、重排或缺失,但存在某些核苷酸的替换。【结论】HB-DCZ与Osloss株、国内的184株、ZM195株遗传距离较近,与C_(24)V株、NADL株遗传距离较远。HB-DCZ株应为BVDVIb基因亚型。
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关键词
牛病毒性腹泻病毒
HB-DCZ株
基因组
ns
2
-3片段
克隆
序列分析
下载PDF
职称材料
云南省新分离蚊浓核病毒的分子特征研究
被引量:
4
2
作者
冯云
付士红
+8 位作者
张海林
李铭华
周涛
王丕玉
邓淑珍
李金梅
王静林
王环宇
梁国栋
《寄生虫与医学昆虫学报》
CAS
2011年第1期15-20,共6页
对云南省新分离的14株浓核病毒进行基因序列测定和分析,以了解浓核病毒基因组结构及特性.用浓核病毒基因组扩增引物(DNV3F,DNV3R),RT-PCR扩增片段,PCR产物直接测序,拼接后获得基因序列.通过Clustal X(1.8)、DNAStar、GeneDoc (3.2...
对云南省新分离的14株浓核病毒进行基因序列测定和分析,以了解浓核病毒基因组结构及特性.用浓核病毒基因组扩增引物(DNV3F,DNV3R),RT-PCR扩增片段,PCR产物直接测序,拼接后获得基因序列.通过Clustal X(1.8)、DNAStar、GeneDoc (3.2) 等生物学软件进行核苷酸序列及氨基酸序列分析和病毒的系统进化分析.结果表明,2007年7~8月,在云南省西部中缅边境地区采获蚊虫4属29种54 673只,分离到14株浓核病毒,其中来自三带喙库蚊Culex tritaeniorhynchus 10株,中华按蚊Anopheles sinensis、伪杂鳞库蚊Culex pseudovishnui、环带库蚊Culex annulus和致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus各1株.新分离株与我国其他省市的分离株核苷酸同源性很高,在99.9%~100%之间;氨基酸同源性在99.7%~100%之间.基于NS1和NS2基因进行进化分析显示,云南新分离的14株浓核病毒与以往中国分离株进化关系最接近.
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关键词
浓核病毒
ns
1
基因组
ns2基因组
同源性分析
系统进化分析
下载PDF
职称材料
题名
牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因克隆及序列分析
被引量:
1
1
作者
赵月兰
郭红斌
张磊
秦建华
张宁
张保宁
机构
河北农业大学中兽医学院
河北农业大学动物科技学院
出处
《中国农学通报》
CSCD
2007年第6期1-6,共6页
基金
国家"十一五"科技攻关计划<华北农区奶牛疾病综合防治技术应用与示范>部分内容
课题编号(2006BAD04A10-4)
+1 种基金
河北省畜牧局科技攻关计划
课题编号2002-4
文摘
【目的】对牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因进行克隆及序列分析,为阐明本病致病机理,更好的控制BVDV感染、流行提供理论依据。【方法】以牛病毒性腹泻病毒河北分离株(HB-DCZ)基因组RNA为模板,扩增BVDVHB-DCZ株基因组NS2-3片段cDNA。将PCR产物克隆后进行PCR及双酶切鉴定。克隆产物进行序列测定及分析。【结果】HB-DCZcDNA体外扩增获得特异性条带,大小约为665bp,表明该分离毒株基因组中无插入序列。PCR产物克隆,提取重组质粒,扩增获得特异性的DNA条带,长度约为665bp,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切,获得两条DNA片段,长度分别为2600bp和702bp左右,与理论值相符。序列测定结果表明,克隆得到的NS2-3重要区扩增片段共665核苷酸,NS2-3重要区的蛋白质由208个氨基酸残基组成。HB-DCZ毒株NS2-3重要区核苷酸序列与已公开发表的BVDV其他毒株相比的同源性依次为184株99.1%,ZM195株97.4%,Osloss株92.3%,C_(24)V株77%,NADL株76.4%。HB-DCZ在NS2-3扩增区域中既没有外源序列的插入,也没有基因重组、重排或缺失,但存在某些核苷酸的替换。【结论】HB-DCZ与Osloss株、国内的184株、ZM195株遗传距离较近,与C_(24)V株、NADL株遗传距离较远。HB-DCZ株应为BVDVIb基因亚型。
关键词
牛病毒性腹泻病毒
HB-DCZ株
基因组
ns
2
-3片段
克隆
序列分析
Keywords
Bovine Viral Diarrhea Virus, HB-DZC Virus Strain, Cloning , Sequencing,
ns
2
-3 gene, RT-PCR
分类号
S858.235.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
云南省新分离蚊浓核病毒的分子特征研究
被引量:
4
2
作者
冯云
付士红
张海林
李铭华
周涛
王丕玉
邓淑珍
李金梅
王静林
王环宇
梁国栋
机构
云南省地方病防治所
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
云南省寄生虫病防治所
出处
《寄生虫与医学昆虫学报》
CAS
2011年第1期15-20,共6页
基金
中美虫媒病毒研究合作项目(No.U19-GH000004)
国家自然科学基金资助项目(No.30560142)
文摘
对云南省新分离的14株浓核病毒进行基因序列测定和分析,以了解浓核病毒基因组结构及特性.用浓核病毒基因组扩增引物(DNV3F,DNV3R),RT-PCR扩增片段,PCR产物直接测序,拼接后获得基因序列.通过Clustal X(1.8)、DNAStar、GeneDoc (3.2) 等生物学软件进行核苷酸序列及氨基酸序列分析和病毒的系统进化分析.结果表明,2007年7~8月,在云南省西部中缅边境地区采获蚊虫4属29种54 673只,分离到14株浓核病毒,其中来自三带喙库蚊Culex tritaeniorhynchus 10株,中华按蚊Anopheles sinensis、伪杂鳞库蚊Culex pseudovishnui、环带库蚊Culex annulus和致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus各1株.新分离株与我国其他省市的分离株核苷酸同源性很高,在99.9%~100%之间;氨基酸同源性在99.7%~100%之间.基于NS1和NS2基因进行进化分析显示,云南新分离的14株浓核病毒与以往中国分离株进化关系最接近.
关键词
浓核病毒
ns
1
基因组
ns2基因组
同源性分析
系统进化分析
Keywords
De
ns
ovirus
ns
1 genome
ns
2
genome
Sequence analysis
Phylogenetic analysis
分类号
Q939.4 [生物学—微生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株NS2-3区基因克隆及序列分析
赵月兰
郭红斌
张磊
秦建华
张宁
张保宁
《中国农学通报》
CSCD
2007
1
下载PDF
职称材料
2
云南省新分离蚊浓核病毒的分子特征研究
冯云
付士红
张海林
李铭华
周涛
王丕玉
邓淑珍
李金梅
王静林
王环宇
梁国栋
《寄生虫与医学昆虫学报》
CAS
2011
4
下载PDF
职称材料
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