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转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响
1
作者
王寿刚
陆玉成
+6 位作者
黄丽梅
尤翠平
王龙
王富敏
苏全平
于继徐
车峰远
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期905-909,共5页
目的探讨转染hSODl.G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响。方法常规体外培养未转染、转染pcDNA3.1(-)、hSODl-pcDNA3.1(-)和hSODl-G93A—pcDNA3.1(-)质粒的NSC-34细胞系;分为正常组、空转组、野生组和突变组。利用...
目的探讨转染hSODl.G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响。方法常规体外培养未转染、转染pcDNA3.1(-)、hSODl-pcDNA3.1(-)和hSODl-G93A—pcDNA3.1(-)质粒的NSC-34细胞系;分为正常组、空转组、野生组和突变组。利用免疫组化染色法观察各组细胞的形态变化;通过检测丙二醛(MDA)含量观察各组细胞氧化应激水平;用逆转录聚合酶链式反应rRT.PCR)和Westernblotting分别检测各组细胞内铁代谢相关蛋白的基因和蛋白表达水平。结果突变组的细胞胞体变圆,突起减少、变短,细胞内MDA含量明显高于其他3组细胞,差异有统计学意义(P〈0.05);各组细胞内的转铁蛋白受体(TfR)、二价金属离子转运体1(DMTI)、铁蛋白等基因在基因水平上表达差异无统计学意3L(P〈0.05);各组细胞内的TfR、DMTl、铁蛋白等在蛋白水平上表达差异无统计学意义(胗O.05),但是突变组细胞铁蛋白表达较正常组细胞明显升高,差异有统计学意义(P,0.051。结论转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞(突变组)内TfR、DMTl表达无明显影响.但可以使细胞内铁蛋白在蛋白表达水平明显升高。
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关键词
肌萎缩侧索硬化
nsc-34细胞
转铁蛋白受体
二价金属离子转运体1
原文传递
G93A突变的hSOD1基因对Nrf2/ARE信号通路的影响
2
作者
亓法英
王富敏
+2 位作者
于继徐
车峰远
赵孔波
《中国临床医学》
2015年第1期19-24,共6页
目的:探讨G93A突变的hSOD1(human Cu/Zn superoxide dismutase)基因在肌萎缩侧索硬化转基因细胞模型NSC-34细胞中对Nrf2/ARE信号通路的影响。方法:将构建好的质粒hSOD1-pcDNA3.1(-)、hSOD1-G93A-pcDNA3.1(-)和pcDNA3.1(-)转染至肌萎缩...
目的:探讨G93A突变的hSOD1(human Cu/Zn superoxide dismutase)基因在肌萎缩侧索硬化转基因细胞模型NSC-34细胞中对Nrf2/ARE信号通路的影响。方法:将构建好的质粒hSOD1-pcDNA3.1(-)、hSOD1-G93A-pcDNA3.1(-)和pcDNA3.1(-)转染至肌萎缩侧索硬化转基因细胞模型NSC-34细胞内,根据转染质粒的不同分为4组:正常组、空转组、野生组和突变组。通过检测细胞内脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量来判断细胞氧化损伤的程度;检测线粒体膜通透性;通过Western blotting检测细胞中Nrf2、抗氧化酶的蛋白表达水平,以反映Nrf2/ARE信号通路在各组的活化程度。结果:转染hSOD1-G93A-pcDNA3.1(-)的NSC-34细胞(突变组)内氧化应激水平增高,同时线粒体通透性增加,提示线粒体受损伤;且Nrf2以及Nrf2/ARE信号通路下游效应分子血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NAD(P)H醌氧化还原酶-1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]的蛋白表达水平均降低(P<0.05)。突变组细胞胞浆中Nrf2表达明显减少(P<0.05),而突变组和野生组细胞核中Nrf2增多,突变组细胞更为显著(P<0.05)。结论:hSOD1基因的G93A突变使细胞Nrf2/ARE信号通路受损,降低了细胞的抗氧化能力,加重了线粒体损伤。
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关键词
肌萎缩侧索硬化
nsc-34细胞
Nrf2/ARE通路
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职称材料
题名
转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响
1
作者
王寿刚
陆玉成
黄丽梅
尤翠平
王龙
王富敏
苏全平
于继徐
车峰远
机构
泰山医学院
临沂市人民医院中心实验室
临沂市人民医院急诊科
临沂市人民医院神经内科
山东省立医院睡眠医学中心
出处
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期905-909,共5页
基金
山东省自然科学基金(ZR2010HM041)
山东省博士后创新项目专项资金(201102004)
文摘
目的探讨转染hSODl.G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响。方法常规体外培养未转染、转染pcDNA3.1(-)、hSODl-pcDNA3.1(-)和hSODl-G93A—pcDNA3.1(-)质粒的NSC-34细胞系;分为正常组、空转组、野生组和突变组。利用免疫组化染色法观察各组细胞的形态变化;通过检测丙二醛(MDA)含量观察各组细胞氧化应激水平;用逆转录聚合酶链式反应rRT.PCR)和Westernblotting分别检测各组细胞内铁代谢相关蛋白的基因和蛋白表达水平。结果突变组的细胞胞体变圆,突起减少、变短,细胞内MDA含量明显高于其他3组细胞,差异有统计学意义(P〈0.05);各组细胞内的转铁蛋白受体(TfR)、二价金属离子转运体1(DMTI)、铁蛋白等基因在基因水平上表达差异无统计学意3L(P〈0.05);各组细胞内的TfR、DMTl、铁蛋白等在蛋白水平上表达差异无统计学意义(胗O.05),但是突变组细胞铁蛋白表达较正常组细胞明显升高,差异有统计学意义(P,0.051。结论转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞(突变组)内TfR、DMTl表达无明显影响.但可以使细胞内铁蛋白在蛋白表达水平明显升高。
关键词
肌萎缩侧索硬化
nsc-34细胞
转铁蛋白受体
二价金属离子转运体1
Keywords
Amyotrophic lateral sclerosis
nsc-
34
cell
Transferrin receptor
Divalent metal ion 1
分类号
R744.8 [医药卫生—神经病学与精神病学]
原文传递
题名
G93A突变的hSOD1基因对Nrf2/ARE信号通路的影响
2
作者
亓法英
王富敏
于继徐
车峰远
赵孔波
机构
山东省临沂市人民医院神经内科
山东省临沂市人民医院急救中心
出处
《中国临床医学》
2015年第1期19-24,共6页
基金
山东省自然科学基金(编号:ZR2010HM041)
山东省临沂市科学技术发展计划(编号:201413006)
文摘
目的:探讨G93A突变的hSOD1(human Cu/Zn superoxide dismutase)基因在肌萎缩侧索硬化转基因细胞模型NSC-34细胞中对Nrf2/ARE信号通路的影响。方法:将构建好的质粒hSOD1-pcDNA3.1(-)、hSOD1-G93A-pcDNA3.1(-)和pcDNA3.1(-)转染至肌萎缩侧索硬化转基因细胞模型NSC-34细胞内,根据转染质粒的不同分为4组:正常组、空转组、野生组和突变组。通过检测细胞内脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量来判断细胞氧化损伤的程度;检测线粒体膜通透性;通过Western blotting检测细胞中Nrf2、抗氧化酶的蛋白表达水平,以反映Nrf2/ARE信号通路在各组的活化程度。结果:转染hSOD1-G93A-pcDNA3.1(-)的NSC-34细胞(突变组)内氧化应激水平增高,同时线粒体通透性增加,提示线粒体受损伤;且Nrf2以及Nrf2/ARE信号通路下游效应分子血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NAD(P)H醌氧化还原酶-1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]的蛋白表达水平均降低(P<0.05)。突变组细胞胞浆中Nrf2表达明显减少(P<0.05),而突变组和野生组细胞核中Nrf2增多,突变组细胞更为显著(P<0.05)。结论:hSOD1基因的G93A突变使细胞Nrf2/ARE信号通路受损,降低了细胞的抗氧化能力,加重了线粒体损伤。
关键词
肌萎缩侧索硬化
nsc-34细胞
Nrf2/ARE通路
Keywords
Amyotrophic lateral sclerosis
nsc-
34
cells
Nrf2/ARE signaling pathway
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响
王寿刚
陆玉成
黄丽梅
尤翠平
王龙
王富敏
苏全平
于继徐
车峰远
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
0
原文传递
2
G93A突变的hSOD1基因对Nrf2/ARE信号通路的影响
亓法英
王富敏
于继徐
车峰远
赵孔波
《中国临床医学》
2015
0
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