全反式维甲酸对NT2细胞系胶质瘤趋向性的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对NT2细胞系胶质瘤趋向性的影响。方法将NT2细胞分为4组:NT2组(未经ATRA干预)、NT2RA1周组(ATRA干预1周)、NT2RA2周组(ATRA干预2周)、NT2RA3周组(ATRA干预3周),采用细胞迁移分析的方法,分别检测其对U87胶质瘤细胞、无血清DMEM培养基以及含100mL/L胎牛血清DMEM培养基的趋向性。结果经ATRA干预的NT2细胞,其胶质瘤趋向性较未经干预组(NT2组)显著提高(P<0.05),对非特异性迁移趋化物如血清等的迁移则较未经干预组显著减少(P<0.05),其中NT2RA2周组胶质瘤趋向性最强,与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论经ATRA干预2周的NT2细胞其胶质瘤特异趋向性显著提高,有望成为临床治疗胶质瘤的新型靶向基因传递载体。

顺铂作用于人恶性睾丸生殖细胞瘤NT2细胞后对肿瘤干细胞标志物的影响

为了探讨顺铂(cisplatin, CDDP)对人恶性睾丸生殖细胞瘤NT2细胞中干细胞标志物的影响,用20μmol/L CDDP作用于处于对数生长期的NT2细胞12 h、24 h、48 h,采用免疫荧光、实时定量PCR和Western-blot法检测NT2细胞中干细胞标志物Sox-2、Oct-4、Nanog的细胞定位以及mRNA和蛋白质的表达情况,同时对肿瘤干细胞耐药相关基因ABCG2的表达进行实时定量PCR检测。与对照组相比, CDDP处理组细胞变圆且漂浮细胞数量增多,存留活细胞数量随药物作用时长增加而减少;免疫荧光显示Sox-2、Oct-4、Nanog主要定位在细胞质中;实时定量PCR和Western-blot分析结果都显示Sox-2、Oct-4、Nanog在CDDP处理组中的表达较对照组上调;同时ABCG2 mRNA的相对表达量在CDDP处理组显著增加(P<0.05)。研究结果初步表明,顺铂导致人恶性睾丸生殖细胞瘤NT2细胞的肿瘤干细胞耐药机制加强。

NT_2细胞株的分化诱导及在大鼠海马区的微注射移植(英文)

目的 观察分化的NT2 细胞大鼠脑内移植后的生存情况 ,以及bcl 2基因对移植神经元生存的影响 ;方法 用bcl 2转染NT2 细胞株 ,在培养基中加入 10 μm视黄酸进行分化诱导 5wk ,被诱导分化的细胞表现出成熟神经元的特性。对分化的细胞进行分离、纯化后移植到大鼠的海马。术后 16d及 6 0d分别处理大鼠 ,采用漂染法对大鼠脑组织切片进行免疫组织化学检测移植的神经元在大鼠海马区的生存情况 ;结果 有相当数量的NT2 细胞被视黄酸进行分化诱导成神经元 ,包括带有或不带有bcl 2基因的神经元均可在大鼠海马存活 2mo以上 ,带有bcl 2基因的神经元在大鼠海马存活的情况优于不带bcl 2基因的对照组 ,但在 6 0天时点带有或不带有bcl 2基因的神经元存活数量均低于第 16天时点 ;结论 由NT2 细胞株诱导分化的神经元大鼠海马移植后可生存相当一段时间 ,bcl 2基因有助于这种生存。

视黄酸对心、脑特异性基因NDRG4在NT2神经元前体细胞中表达的影响

目的 探讨视黄酸 (RA)对人心、脑特异表达基因NDRG4在人中枢神经元前体细胞NT2中表达的影响。 方法 培养回收分别经RA(10 μmol L)处理 1、2周及未经处理的NT2细胞 ,提取总RNA进行NDRG4表达的Northern印迹分析 ,并应用NDRG4变异体NDRG4 B及NDRG4 H5’ 端特异序列寡核苷酸引物对NT2细胞总RNA进行逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)。 结果 Northern印迹分析表明 ,RA刺激可使NT2细胞NDRG4表达显著增加。RT PCR结果表明 ,NDRG4 H及NDRG4 B变异体mRNA表达对RA反应不同 ,受RA刺激后前者表达逐渐上调 ,后者表达则无明显变化。 结论 NDRG4可能与中枢神经元发育及生长有关。对NDRG4基因的深入研究将为了解其在阿尔茨海默病 (AD)等神经元变性疾病发病机制中的作用提供某些线索。