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NTS/NTSR1在胆管细胞癌侵袭转移中作用及机制研究
1
作者
黄奕森
苏子剑
+2 位作者
张剑华
潘剑辉
刘小瑜
《吉林医学》
CAS
2021年第10期2309-2313,共5页
目的:研究NTS/NTSR1轴对胆管细胞癌侵袭转移的作用及机制。方法:采用MTS比色法检测不同浓度的NTSR1特异性拮抗剂SR48692(5μmol/L、10μmol/L)对人胆管细胞癌细胞HUCCT1、RBE、HCCC 9810,、CCLP-1增殖的影响,用transwell小室实验检测对...
目的:研究NTS/NTSR1轴对胆管细胞癌侵袭转移的作用及机制。方法:采用MTS比色法检测不同浓度的NTSR1特异性拮抗剂SR48692(5μmol/L、10μmol/L)对人胆管细胞癌细胞HUCCT1、RBE、HCCC 9810,、CCLP-1增殖的影响,用transwell小室实验检测对细胞迁移及浸润的影响。比较不同胆管癌细胞NTSR表达量的差异,筛选出合适的细胞进行改造,通过慢病毒转染筛选到的细胞构建过表达NTSR1的细胞株和敲减NTSR1的细胞株。WESTERN BLOT方法检测改造后细胞NTSR1的表达差异,检测MAPK通路三个关键活性分子ERK1/2、P38MAPK、JNK及显著差异表达基因PKC的蛋白磷酸化水平。在体外通过MTS的方法检测改造后细胞株的增殖能力,用transwell小室实验检测迁移能力,在体内通过成瘤实验检测细胞的增殖能力,检测ERK1/2、P38MAPK、JNK三个分子特异性抑制剂对细胞增殖、迁移、浸润以及凋亡的影响。结果:NTSR1特异性拮抗剂SR48692抑制胆管癌细胞的增殖,不同浓度抑制剂的抑制效果差异有统计学意义(P<0.01)。筛选出NTSR1中等表达量的细胞HUCCT1进行改造,得到过表达细胞株和敲减的细胞。过表达的NTSR1的细胞株增殖能力、迁移和浸润能力均高于敲减NTSR1的细胞株。细胞增殖能力差异显著,体内成瘤最快且成瘤数量最多。使用MAPK通路三个关键活性分子ERK1/2、P38MAPK、JNK特异性抑制剂确定NTS/NTSR1轴通过MAPK信号通路的的ERK1促进胆管细胞癌细胞的侵袭转移。结论:NTSR1特异性拮抗剂SR48692对人胆管细胞癌细胞增殖迁移均有抑制作用,NTSR1在细胞内表达差异影响胆管癌细胞侵袭转移。NTS/NTSR1轴通过MAPK信号通路的的ERK1促进胆管细胞癌细胞的侵袭转移。
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关键词
胆管细胞癌
nts/ntsr1
MAPK
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职称材料
题名
NTS/NTSR1在胆管细胞癌侵袭转移中作用及机制研究
1
作者
黄奕森
苏子剑
张剑华
潘剑辉
刘小瑜
机构
福建医科大学附属泉州第一医院消化内科
福建医科大学附属泉州第一医院肝胆外科
出处
《吉林医学》
CAS
2021年第10期2309-2313,共5页
基金
泉州市科技计划项目[2019N013S,049]
泉州市科技高层次人才计划项目[2019C032R]
+2 种基金
福建省自然科学基金项目[2018J01198]
福建省医学创新课题[项目编号:2017-CX-47]
福建省卫生计生青年科研课题[项目编号:2017-2-69]。
文摘
目的:研究NTS/NTSR1轴对胆管细胞癌侵袭转移的作用及机制。方法:采用MTS比色法检测不同浓度的NTSR1特异性拮抗剂SR48692(5μmol/L、10μmol/L)对人胆管细胞癌细胞HUCCT1、RBE、HCCC 9810,、CCLP-1增殖的影响,用transwell小室实验检测对细胞迁移及浸润的影响。比较不同胆管癌细胞NTSR表达量的差异,筛选出合适的细胞进行改造,通过慢病毒转染筛选到的细胞构建过表达NTSR1的细胞株和敲减NTSR1的细胞株。WESTERN BLOT方法检测改造后细胞NTSR1的表达差异,检测MAPK通路三个关键活性分子ERK1/2、P38MAPK、JNK及显著差异表达基因PKC的蛋白磷酸化水平。在体外通过MTS的方法检测改造后细胞株的增殖能力,用transwell小室实验检测迁移能力,在体内通过成瘤实验检测细胞的增殖能力,检测ERK1/2、P38MAPK、JNK三个分子特异性抑制剂对细胞增殖、迁移、浸润以及凋亡的影响。结果:NTSR1特异性拮抗剂SR48692抑制胆管癌细胞的增殖,不同浓度抑制剂的抑制效果差异有统计学意义(P<0.01)。筛选出NTSR1中等表达量的细胞HUCCT1进行改造,得到过表达细胞株和敲减的细胞。过表达的NTSR1的细胞株增殖能力、迁移和浸润能力均高于敲减NTSR1的细胞株。细胞增殖能力差异显著,体内成瘤最快且成瘤数量最多。使用MAPK通路三个关键活性分子ERK1/2、P38MAPK、JNK特异性抑制剂确定NTS/NTSR1轴通过MAPK信号通路的的ERK1促进胆管细胞癌细胞的侵袭转移。结论:NTSR1特异性拮抗剂SR48692对人胆管细胞癌细胞增殖迁移均有抑制作用,NTSR1在细胞内表达差异影响胆管癌细胞侵袭转移。NTS/NTSR1轴通过MAPK信号通路的的ERK1促进胆管细胞癌细胞的侵袭转移。
关键词
胆管细胞癌
nts/ntsr1
MAPK
Keywords
Cholangiocarcinoma
nts/ntsr1
MAPK
分类号
R735.8 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
NTS/NTSR1在胆管细胞癌侵袭转移中作用及机制研究
黄奕森
苏子剑
张剑华
潘剑辉
刘小瑜
《吉林医学》
CAS
2021
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