大鼠创伤性脑损伤后Numbl的表达变化

目的:观察大鼠创伤性脑损伤后Numbl的表达变化及其与脑损伤的关系。方法:构建大鼠创伤性脑损伤模型,收集蛋白并做冰冻切片,采用Western Blot及免疫组化分析Numbl的表达变化及分布,免疫荧光双标分析Numbl的细胞定位。结果:大鼠创伤性脑损伤后Numbl的表达降低,其主要分布在损伤区域的皮质中,免疫荧光显示Numbl主要定位于皮质的神经元中。结论:Numbl在大鼠创伤性脑损伤后表达减少,其主要定位于损伤区域的神经元中,有可能参与损伤诱导的神经元的凋亡及再生。

NUMBL在大鼠脊髓损伤过程中的表达变化

[目的]观察NUMBL在大鼠脊髓损伤过程中的表达情况,探讨其在脊髓损伤和修复过程中的生物学功能。[方法]制作脊髓损伤模型,利用western blot、免疫组织化学、免疫荧光等技术观察NUMBL在损伤脊髓中的表达变化、组织分布与细胞定位,在此基础上探讨NUMBL在脊髓损伤后的病理生理意义。[结果]western blot结果显示NUMBL经历了在损伤后8 h和1 d的显著增加后开始下降,直到损伤后2周仍没有明显上调的变化趋势。免疫组化结果显示在脊髓损伤后1 d,NUMBL的表达在临近损伤中心的脊髓中显著增加,而在脊髓损伤后1周,NUMBL的表达较1d时明显降低。免疫荧光结果显示NUMBL与神经元和少突胶质细胞存在共定位,而与星形胶质细胞无明显共定位。[结论]脊髓损伤后脊髓中NUMBL的表达上调参与脊髓损伤的病理过程。

一种简便的齿轮传动优化设计方法

本文通过分析齿面接触疲劳强度和齿根弯曲疲劳强度的内在联系，引进齿形复合系数和齿数算子概念，提出了一种能直接求得齿轮传动优化参数的简便方法。将该方法用于二级或多级齿轮减速器的优化设计，其优化过程更为直观、清晰，编程更为简单、快捷。

提高涤纶长丝染色均匀性的研究

研究了干燥条件、纺丝温度、侧吹风的调节及后加工设备维护等对ＤＴＹ染色均匀性的影响。结果表明，合适的工艺条件及完善的设备管理可使ＤＴＹ的染色均匀性明显提高．

miR-184对小鼠神经干细胞增殖的影响及其机制

目的观察miR-184对小鼠神经干细胞（NSCs）增殖的影响及其机制。方法构建包装pHBLV-U6-GFP-miR-184基因过表达和pHBLV—U6-GFP-sh-miR-184基因干扰慢病毒载体和各自对照无义序列慢病毒载体，分离培养孕14d的CD1胎鼠大脑侧脑室下区的NSCs并鉴定。实验细胞分为过表达对照组、miR-184过表达组、干扰对照组和miR-184干扰组，各组细胞在感染对应的慢病毒后，用嘌呤霉素进行抗性筛选。筛选后，继续培养细胞至3代，实时定量PCR进行miR-184过表达验证。通过targetScan、iRTarBase、miRanda等软件预测 miR—184的靶基因并进行内源性验证，采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）细胞渗入实验观察各实验组的增殖情况，通过Western blotting实验和实时定量PCR观察各组Notch信号通路相关蛋白Hes1和Hes5及其mRNA的表达情况。结果免疫荧光染色显示，90％的分离培养细胞呈巢蛋A（nestin）和Y性别决定转录因子2（Sox2）双阳性，miR-184过表达组的miR—184表达量是过表达对照组的（67．63±7．53）倍，差异具有统计学意义（P〈0．05）。Brdu细胞渗入实验结果显示与各自对照组比，miR-184过表达组的细胞增值率是过表达对照组的（1．47±0．05）倍，而miR—184干扰组的细胞增值率是干扰对照组的（0．84±0．03）倍．差异均具有统计学意义（P〈0．05）。iRTarBase和miRanda软件预测，Numblike蛋白（Numbl蛋白）作为miR-184的潜在靶基因，miR—184可以下调Numbl蛋白的表达，miR-184过表达组和miR-184干扰组的Numbl相对表达量分别是各自对照组的（0．73±0．07）倍、（1．30±0．05）倍，差异均具有统计学意义（P〈0．05），但miR—184并不能改变Numbl mRNA的表达水平。miR-184可抑制Numb1蛋白的表达．使Notch信号通路的下游相关蛋白Hes1和Hes5及其mRNA表达升高，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-184通过在蛋白翻译水平抑制Numb1蛋白的表达，从而激活Notch信号通路，促进NSCs的增殖。