人特异性蛋白激酶-15基因在增生牙龈组织中表达的研究

目的:检测细胞增殖相关基因人特异性蛋白激酶-15(specific protein kinase 15,NYD-SP15)基因在增生牙龈及正常牙龈组织中的表达,初步探讨该基因与牙龈增生发生的关系。方法:应用RT-PCR及免疫组化法检测27例正常牙龈组织(取自外伤冠折后行牙冠延长术中切除的牙龈组织)及40例牙龈增生患者(以增生表现为主的慢性牙龈炎12例、药物性牙龈增生13例、牙龈瘤15例)牙龈切除术中切除的增生牙龈组织标本中NYD-SP15 mRNA及蛋白的表达。结果:增生牙龈组织中NYD-SP15的mRNA水平显著高于正常牙龈组织(P<0.05)。免疫组化结果显示,在正常牙龈组织中该基因高表达于胞浆,在增生牙龈组织中高表达于胞核。结论:NYD-SP15表达量异常以及定位差异在人牙龈增生发生发展过程中起到一定的作用,但该基因高表达与牙龈增生发生的相关机制尚待进一步研究。

高表达人源SP15对小鼠生长和生殖的影响

目的:探究高表达人源SP15对小鼠生长和生殖的影响,为研究NYD-SP15在生物体中的功能提供动物模型。方法:将人源NYD-SP15 cDNA以及Cre序列插入PCAG启动子下游,构建NYD-SP15转基因表达载体,并通过原核注射,构建全身性表达NYD-SP15的转基因小鼠;将获得的NYD-SP15转基因小鼠与C57/BL6小鼠交配,PCR鉴定转基因小鼠是否有Cre插入,筛选出人源NYD-SP15表达的小鼠,统计转基因小鼠体重变化和后代阳性情况。结果:通过PCR鉴定及公司测序验证,我们成功构建了NYD-SP15转基因过表达载体。并通过PCR鉴定小鼠基因型,筛选出可以表达人NYD-SP15的转基因小鼠。比较转基因小鼠与同窝野生型小鼠体重,发现转基因小鼠体重与同窝野生型小鼠相比无明显区别,说明在体内过表达NYD-SP15对小鼠体重无明显影响。通过对后代阳性小鼠出生情况统计发现F2代阳性小鼠出生率较F1代明显降低。结论:人源NYD-SP15在小鼠体内能正常表达,对其生长无明显影响,但其后代阳性出生率呈逐代下降趋势,推测该原因可能与NYD-SP15在睾丸中表达有关。