异硫氰酸荧光素标记膀胱癌靶向肽NYZL1的体外特异性鉴定

目的探讨膀胱癌靶向肽NYZL1的特异性,为其临床应用提供理论基础。方法 (1)采用固相化学合成法制备多肽及其异硫氰酸荧光素(FITC)连接肽,噻唑蓝(MTT)鉴定其细胞毒性。(2)采用免疫荧光技术检测FITC-NYZL1与人膀胱癌组织结合的特异性,以FITC-sv NYZL1作阴性对照。(3)应用扫描激光共聚焦显微镜检测FITC-NYZL1与膀胱癌BIU-87、T24、E-J、5637细胞和肾癌KC细胞结合的特异性,以FITC-sv NYZL1作阴性对照。结果 (1)成功制备了实验所需的化学合成肽,高效液相色谱纯化和质谱检测结果显示其纯度高达98%,MTT结果表明化学合成肽对BIU-87细胞的增殖无影响。(2)FITC-NYZL1标记的膀胱癌组织出现了荧光富集,而其他组织未见荧光富集,FITC-sv NYZL1标记的各组织均未见荧光富集。(3)与对照组相比,FITC-NYZL1在膀胱癌细胞上均有荧光富集,且不同膀胱癌细胞间平均荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论多肽NYZL1与膀胱癌组织、细胞均能特异结合,具有显著的结合特异性,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供了新的可能。

靶向肽NYZL1对膀胱癌细胞生物学行为的影响

目的通过体外实验来研究靶向肽NYZL1对膀胱癌BIU-87细胞增殖、侵袭和迁移、细胞凋亡等生物学行为的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法、细胞划痕实验,研究靶向肽NYZL1对BIU-87细胞的增殖、侵袭和迁移能力的影响;使用流式细胞术,研究靶向肽NYZL1对膀胱癌细胞凋亡、周期分布的影响。结果MTT实验结果显示,NYZL1对膀胱癌细胞的增殖无明显抑制作用;细胞生长曲线显示,NYZL1不直接影响肿瘤细胞的生长;损伤修复实验结果显示,BIU-87细胞的迁移能力不受NYZL1的影响;流式细胞仪分析结果显示,NYZL1对BIU-87细胞的周期分布与凋亡结果均无明显影响。结论靶向肽NYZL1对膀胱癌BIU-87细胞的恶性生物学行为无显著影响。