醋酸泼尼松龙对豚鼠耳蜗血管纹内Na^+/K^+/2Cl^-联合转运蛋白的影响

目的观察醋酸泼尼松龙对豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞内Na^+/K^+/2Cl-联合转运蛋白的影响。方法筛选健康白色红目豚鼠40只,随机分成醋酸泼尼松龙组和对照组。利用糖皮质激素对醋酸泼尼松龙组豚鼠制造诱发性肾虚动物模型,按50mg/(kg·d)的剂量每日肌注醋酸泼尼松龙注射液,对照组则每日肌注生理盐水0.3ml/只,共17天。造模结束后,进行ABR阈值测试及90dBSPL给声强度下Ⅲ波潜伏期测试,同时进行免疫组化染色及Na^+/K^+/2Cl-联合转运蛋白积分光密度值(IOD值)测量。结果注射后,醋酸泼尼松龙组豚鼠ABR阈值显著提高,且90dBSPL给声强度下Ⅲ波潜伏期明显延后,两者与对照组之间有显著性差异(P<0.01)。且与对照组相比,醋酸泼尼松龙组豚鼠耳蜗血管纹Na^+/K^+/2Cl-联合转运蛋白显著降低(P<0.01),免疫组化反应明显减弱。结论经醋酸泼尼松龙注射后,豚鼠出现类似"肾虚"的证候,引起耳蜗血管纹边缘细胞中Na^+/K^+/2Cl-联合转运蛋白表达减少,可能是导致听觉功能的减退原因之一。

海水浸泡开放性颅脑外伤早期水通道蛋白4和Na＋-K＋-2Cl-协同转运蛋白1表达的改变

目的了解海水浸泡开放性颅脑外伤早期水通道蛋白4（AQP4）和Na＋-K＋-2Cl-协同转运蛋白1（NKCCl）的表达，及其与脑水肿和血脑屏障破坏程度的关系。方法选取102只sD大鼠，采用控制性皮质撞击法造成不同程度的脑外伤，致伤后将局部损伤的脑组织浸泡在人工海水或生理盐水中，构建动物模型。采用随机数字表法将大鼠分为海水浸泡组和生理盐水浸泡组，每组51只。另选取17只大鼠作为对照组。观察各组在浸泡后3、8和24h时间点上病理学、脑含水量、血脑屏障开放程度、AQP4蛋白和NKCCl表达水平。结果与生理盐水浸泡组相比较，海水浸泡组AQP4表达水平在浸泡后3h（0．222±0．018）和8h（0．228±0．01S）显著降低，而浸泡后24h（0．462±0．013）表达水平显著升高，并超越生理盐水浸泡组；海水浸泡组NKCCl表达水平24h（0．050±0．012）内均处于明显降低的水平。结论海水浸泡对血脑屏障产生明显破坏，导致海水浸泡开放性颅脑外伤具有脑水肿发生晚但程度重的特点。海水浸泡后AQP4表达水平具有先抑制后促进的特点，其与脑组织含水量有类似的变化，值得进一步研究。

布美他尼后处理对大鼠创伤性颅脑损伤后NKCC1表达及脑含水量的影响

目的探讨布美他尼后处理对大鼠创伤性颅脑损伤后Na＋-K＋-2Cl-协同转运蛋白1（NKCC1）表达及脑含水量的影响。方法雄性SD成年大鼠90只,体重220-300 g。采用随机数字表法,将大鼠分为3组：假手术组（S组）、脑创伤组（TBI组）和布美他尼后处理组（TBI-B组）。采用自由落体撞击法制备创伤性颅脑损伤模型。S组接受同样的操作但不接受撞击,TBI-B组于创伤后30 min给予布美他尼30 mg/kg,TBI组给予等量的生理盐水。TBI组和TBI-B组在创伤后12 h测动脉压并取动脉血行血气分析,于创伤后2、12、24 h处死大鼠并取脑,测定皮质NKCC1的表达和脑含水量。结果与S组比较,TBI组和TBI-B组NKCC1表达水平和脑含水量在创伤后12、24 h升高（P〈0.05,P〈0.01）;与TBI组比较,TBI-B组NKCC1表达和脑含水量在创伤后12 h、24 h降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论布美他尼后处理可减轻成年大鼠创伤性脑损伤,其机制可能与布美他尼减少大鼠脑组织NKCC1表达有关。

胡杨PeSOS1对拟南芥盐诱导H_2O_2信号途径的调控

【目的】研究胡杨质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1)通过H2O2信号途径对盐胁迫的感知和适应作用。【方法】克隆胡杨质膜SOS1基因(PeSOS1),并将其转化到拟南芥中,比较野生型和转PeSOS1基因拟南芥在100mmol/L NaCl胁迫下的萌发率,根长,干质量,K+、Na+和Ca2+含量,活体植株根尖离子流(K+、Na+和H+)的流动情况,H2O2的产生和抗氧化酶活性的变化以及抑制剂对根尖离子流的影响,分析100mmol/L NaCl胁迫下异源表达PeSOS1基因拟南芥与野生型拟南芥耐盐性的差异。【结果】在NaCl胁迫下,转PeSOS1基因拟南芥株系的萌发率、根长和干质量明显高于野生型拟南芥;转PeSOS1基因拟南芥K+和Ca2+含量也高于野生型拟南芥,而Na+含量较野生型拟南芥低。100mmol/L NaCl处理后,转PeSOS1基因拟南芥中K+和Na+的平衡(K+/Na+值)与NaCl胁迫前相比下降幅度较小。转PeSOS1基因植株在NaCl胁迫下能更快地产生H2O2,并使抗氧化酶保持较高的活性。SOS1抑制剂阿米洛利(Amiloride)对NaCl胁迫下野生型和转基因拟南芥根尖离子流的变化有明显影响,用质膜NADPH氧化酶抑制剂DPI(抑制H2O2的产生)处理后,转PeSOS1基因拟南芥根尖K+内流减弱,Na+外流和H+内流增强,植株维持K+和Na+平衡的能力减弱。【结论】在拟南芥中异源表达PeSOS1基因可促进H2O2快速产生,维持了SOS1mRNA的稳定性,调控了K+和Na+平衡,并激活了抗氧化防御系统,因而显著提高了其耐盐性。

NKCC1、KCC2及mTOR相关蛋白4E-BP1在外伤性癫痫中的表达及意义

目的探讨主要表达于神经元细胞膜上的NA^+-K^+-2CL-转运体(NKCC1)、K^+-CL-转运体(KCC2)及表达于神经元细胞质中m TOR通路信号蛋白4E结合蛋白1(4E-BP1)在外伤性癫痫(PTE)癫痫灶中的表达及临床意义。方法收集2010年1月至2015年12月福建医科大学附属第一医院神经外科外伤性癫痫患者术后脑组织标本14例作为实验组;选取脑外伤患者行减压或清创手术获取的和各种病变患者手术入路不可避免要切除的正常脑组织8例作为对照组。用Western blot和实时定量荧光PCR(RT-PCR)检测14例PTE癫痫脑组织、8例对照组"正常脑组织"NKCC1、KCC2、4E-BP1的表达。结果 Western blot显示PTE病灶脑组织中4E-BP1、NKCC1相对灰度值(0.61±0.12、0.92±0.19)高于正常脑组织(0.27±0.05、0.67±0.66),差异有统计学意义(P<0.05)。PTE病灶脑组织中KCC2相对灰度值(0.58±0.99)低于正常脑组织(0.72±0.06),差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,PTE病灶脑组织中4E-BP1、NKCC1相对灰度值(30.84±1.32、27.81±1.92)高于正常脑组织(26.94±1.24、23.52±0.74),差异有统计学意义(P<0.05)。PTE病灶脑组织中KCC2相对灰度值(21.55±1.01)低于正常脑组织(24.59±1.02),差异有统计学意义(P<0.05)。PTE组中NKCC1/KCC2比值(1.29±0.11)高于对照组(0.96±0.26),差异有统计学意义(P<0.05)。结论NKCC1、KCC2和m TOR通路信号蛋白4E-BP1的异常改变,可能是外伤后脑组织组织学改变及反复癫痫发作的重要分子机制。

鱼类离子细胞及离子通道的研究进展

渗透压调节与鱼类生命活动密切相关,离子细胞与离子通道是渗透压调节的重要细胞和通路。本文结合近期国内外在渗透压调节方面的研究热点,论述鱼类离子细胞与离子通道的研究进展,并做出展望。主要从离子细胞的命名演变及离子细胞亚型的类型和两种离子通道的研究进展进行论述。离子细胞的命名从"氯细胞(chloride cells,CCs)"、"线粒体丰富的细胞(mitochondrion-rich cells,MRCs或MR)"发展到"离子细胞(ionocytes)",其中还有PNA+、PNA-、Ⅰ型MR细胞、Ⅱ型MR细胞、Ⅲ型MR细胞、Ⅳ型MR细胞相继因不同的功能而被独立进行命名。两种离子转运通道是:囊性纤维化跨膜传导调节蛋白(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)和Na+/K+/2Cl-协同转运蛋白(NKCC),CFTR在离子细胞的尖端处表达,而NKCC则在离子细胞基底进行表达调控,两者在渗透压调节中处于下游层次,可直接反应离子调控的水平。

盐酸椒苯酮胺对庆大霉素所致豚鼠听力损伤的保护作用

目的观察豚鼠耳蜗自噬相关蛋白beclin1和LC3、Na^(+-)K^(+-)2Cl^-联合转运体(NKCC1)m RNA、内皮素(ET)表达与耳蜗庆大霉素(GM)损伤关系及盐酸椒苯酮胺(PPTA)对损伤的保护作用及其机制。方法将60只豚鼠随机分成对照组、模型组、同期治疗组、造模后对照组、后期治疗组。对照组给NS+人工外淋巴液、模型组给GM+人工外淋巴液、治疗组给GM+PPTA(均连续给药7 d),造模后对照组及后期治疗组均连续注射GM 7 d后,再分别行人工外淋巴液及PPTA连续注入7 d。所有豚鼠给药前均手术行听泡置管,NS及GM(160 mg·kg^(-1)·d^(-1))采用腹腔注射,人工外淋巴液及PPTA采用听泡注入。各组豚鼠完成给药后ABR测试分析听力,检测beclin1和LC3、NKCC1 m RNA及ET-1的表达。结果模型组、造模后对照组的ABR结果差异无统计学意义(P>0.05),但两者均明显高于其余3组(P<0.05),同期治疗组豚鼠ABR阈值明显低于后期治疗组(P<0.05);模型组LC3Ⅱ及Beclin1的表达量较其余4组明显升高,后期治疗组LC3Ⅱ及Beclin1的表达量较造模后对照组降低;模型组NKCC1 m RNA表达较其余4组明显升高(P<0.05),后期治疗组NKCC1 m RNA表达明显低于造模后对照组(P<0.05)。模型组各部位ET-1表达较其余4组明显增高,对照组各部位ET-1表达低于其余4组,后期治疗组各部位ET-1表达较造模后对照组降低。结论 PPTA可抑制耳蜗细胞自噬、NKCC1、ET-1的表达,从而对耳蜗庆大霉素损伤起到保护作用;PPTA早期对抗庆大霉素耳蜗损伤效果更优,提示GM可能对听觉细胞产生不可逆损伤。

离子转运／交换蛋白在缺血性脑卒中后脑水肿中的作用机制

脑卒中严重危害着人类生命健康，目前高居世界人类死因排名第二位、中国居民死亡率第二位，且发病率近年来仍呈上升趋势。脑卒中分为缺血性脑卒中及出血性脑卒中，其中缺血性脑卒中的发病率更高，约占脑卒中总数的80％。

肾素原受体参与肾脏对体液与电解质的调节（英文）

最初的研究发现肾素原受体(PRR)作为肾素与肾素原的特异性受体,参与对肾素-血管紧张素系统(RAS)活性的调节。然而,最新的证据揭示PRR功能的多样性,PRR可以发挥RAS依赖性与非依赖性的作用。PRR可以被furin或ADAM19切割,产生两个功能性片段,一是28 ku可溶性PRR受体(s PRR),另一个是M8.9,后者是vacuolar H+-ATPase的一个亚型,负责H+转运。近些年的研究证明,PRR参与了许多的生理与病理生理过程的调节。比如,PRR通过调节集合管水通道-2(AQP2)与髓袢升枝粗段(TAL)Na^+,K^+,Cl^-共转运蛋白(NKCC2)的调节而决定尿液浓缩功能;PRR通过介导局部醛固酮的产生而促进K+的排泄;肾脏PRR过度激活介导了血管紧张素II与果糖/高盐诱导的高血压。总之,PRR是肾脏生理与病理生理过程的新的调节因子。

大黄-黄芩配伍应用对脑损伤早期癫痫易感性的影响

目的：研究大黄-黄芩配伍应用对小鼠脑损伤早期癫痫易感性的影响,探讨该药对抗脑损伤后癫痫的机制。方法：将SPF级C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组,模型组,大黄-黄芩药对低（1 g·kg^-1）,高剂量组（4 g·kg^-1）及阳性组（2.6 g·kg^-1丙戊酸钠）。除空白组外,其余各组采用自由落体法建立小鼠封闭性颅脑损伤模型,于脑损伤后给予相应药物灌胃治疗,连续7 d。于末次给药后给予戊四氮（pentylenetetrazole,PTZ）亚惊厥剂量刺激,通过行为学观察各组小鼠的癫痫发作潜伏期及平均发作强度,脑电图（electroencephalogram,EEG）分析小鼠的脑部放电图谱,统计0-20 Hz的放电总和;免疫组化法（immunohistochemistry,IHC）计数海马CA1,CA3区胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的阳性细胞数;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测神经元Na^＋-K^＋-2Cl^-共转运体-1（NKCC1）的蛋白表达水平。结果：与空白组比较,模型组的小鼠癫痫发作潜伏期明显缩短,脑部异常高频放电明显增多,海马CA1,CA3区的GFAP阳性细胞计数显著增加（P〈0.05）,且神经元NKCC1的表达也较高（P〈0.05）;与模型组比较,药对低、高剂量均可延长癫痫发作的潜伏期,减少脑部异常放电,降低海马区GFAP阳性细胞数以及神经元NKCC1蛋白的表达,且药对高剂量组与模型组比较具有显著性差异（P〈0.05）。结论：大黄-黄芩配伍应用可降低脑损伤早期癫痫的易感性,作用机制可能与星形胶质细胞的调控作用有关。