高胆红素血症大鼠脑干听觉诱发电位与脑组织NO含量及Na^+-K^+ATP酶活性的变化

目的:探讨脑干听觉诱发电位(BAEP)在早期监测高胆红素血症听力和脑损伤中的作用及脑组织一氧化氮(NO)与胆红素诱导的听力和脑损伤的关系。方法:15dSD大鼠腹腔注射不同剂量(30mg/kg、60mg/kg、90mg/kg、120mg/kg和150mg/kg)胆红素溶液以制备高胆红素血症动物模型,微量胆红素测定仪测定血清胆红素浓度,重氮法测定脑组织胆红素浓度,定磷法测定脑组织中Na+-K+ATP酶活性,硝酸酶还原法测定脑组织NO含量,诱发电位仪检测BAEP。结果:建模后高剂量组(120mg/kg和150mg/kg)部分大鼠出现异常神经行为活动;建模6h后,除低剂量(30mg/kg)组外,各实验组大鼠血清和脑组织胆红素浓度及脑组织NO含量显著升高,脑组织Na+-K+ATP酶活性显著降低,BAEP的波峰潜伏期(PL)和波峰间潜伏期(IPL)显著延长;且BA-EP的PL与IPL和脑组织NO含量与Na+-K+ATP酶活性的变化均与脑组织胆红素水平显著相关。结论:BAEP的PL和IPL是早期监测高胆红素血症听力和脑损伤的无创性指标,NO的过量产生可能参与了胆红素诱导的听力和脑损伤的发病过程。

补心方对慢性心衰大鼠心肌Na^+-K^+ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)ATP酶及琥珀酸脱氢酶的作用研究

目的研究补心方对心梗后早期大鼠Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和琥珀酸脱氢酶(Succinate Dehydrogen-ase,SDH)的影响。方法清洁级大鼠60只,采取结扎冠状动脉左前降支中上1/3部,造成AMI模型,手术成功存活动物随机分为心阳高、中、低剂量组及曲美他嗪组、模型组、假手术组共6组,均予灌胃给药或蒸馏水8周。8周后采用分光光度计检测心梗后早期大鼠心肌Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶以及SDH水平。结果对心肌细胞ATP酶的影响:模型组大鼠ATP酶含量及SDH活性较假手术组降低(P<0.01)。补心方干预后,心阳高剂量、中剂量、低剂量组Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和SDH活性较模型组均升高(P<0.01),但低于假手术组及曲美他嗪组,且随剂量增加,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶含量和SDH活性逐渐增强。结论补心方可增强与Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶含量,提高SDH活力,改善线粒体功能,从而保护心肌,改善慢性心衰大鼠症状,延缓慢性心衰的发生发展。

中药补肾方对心力衰竭大鼠Na^+-K^+ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)ATP酶和琥珀酸脱氢酶的作用研究

目的研究补肾方对心力衰竭大鼠Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和琥珀酸脱氢酶(SDH)的作用。方法 60只大鼠随机分为模型组、假手术组、曲美他嗪组、补肾低、中、高剂量组,每组10只。采用结扎冠状动脉前降支法制备心力衰竭大鼠模型,术后2周开始灌胃,分别给予药物干预8周。8周后通过颈动脉插管记录大鼠血流动力学改变,包括左室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVEDP)、左室内压上升下降最大速率(±LVdp/dtmax);采用分光光度计检测心力衰竭大鼠心肌Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶以及SDH水平。结果模型组大鼠心肌LVSP和+LVdp/dtmax较假手术组明显降低(P<0.01),而LVEDP和-LVdp/dtmax明显升高(P<0.05);补肾方干预后,中、高剂量大鼠心肌收缩、舒张功能明显优于模型组(P<0.01),以高剂量补肾方改善心力衰竭大鼠心功能明显。补肾方干预后,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和SDH活力高于模型组,但低于假手术组,且随补肾方剂量增加,Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶和SDH活力逐渐增强。结论补肾方可改善心力衰竭大鼠的心功能,可能与Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶以及SDH活力增强相关。

尼可地尔含血停搏液对心肌细胞Na^(+)-K^(+)ATP酶的保护作用

目的缺血再灌注损伤会导致心肌细胞Na+-K+ATP酶活性降低,通过对比缺血再灌注后Na+-K+ATP酶活性改变,研究尼可地尔含血停搏液对心肌细胞Na+-K+ATP酶的保护作用。方法采用间生态离体兔心共生支持系统模型。16个心脏随机分为两组,每组8只。分别采用尼可地尔超极化含血停跳液或者高钾去极化含血停跳液灌注。超极化含血停跳液由尼可地尔(100μmol/L),Krebs-Henseleit液和兔血1:2混合配制。去极化停搏液由St.Thomas'液与兔血1:2混合配制,最终K+浓度20mmol/L。心脏停跳后以含血停跳液间断灌注,常温缺血60min。再灌注60min。采用电镜酶化学方法检测缺血前后心脏Na+-K+ATP酶的变化。结果缺血再灌注后两组中酶的活性均明显降低,高钾组较尼可地尔组减少更明显。结论尼可地尔对心肌细胞Na+-K+ATP酶缺血再灌注损伤有保护作用。

Na^+-K^+-ATP酶α1亚基DR多肽单克隆抗体的制备和应用

目的制备钠钾ATP酶(Na^+-K^+-ATPase)α1亚基DR区段(897DVEDSYGQQWTYEQR911)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其活性。方法以合成的DR-钥孔戚血蓝素(KLH)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术建立能稳定分泌抗DR的杂交瘤细胞株,制备Na^+-K^+-ATPaseα1亚基DR mAb。ELISA测定杂交瘤细胞上清中mAb效价,斑点免疫杂交、Western blot法及免疫荧光细胞化学染色法检测单克隆的特异性,采用Senso LyteFDP蛋白磷酸酶定量试剂盒检测Na^+-K^+-ATPase活性,高糖细胞损伤实验检测DR mAb对高糖引起细胞损伤的保护作用。结果成功制备3株稳定分泌抗体的阳性细胞株。选择强阳性DRm217细胞株,制备腹水进一步验证。免疫荧光细胞化学染色、免疫斑点杂交及Western blot法结果显示,DRm217 mAb能够特异性结合在细胞膜表面,识别Na^+-K^+-ATPase的DR多肽。DRm217能够提高Na^+-K^+-ATPase活性,对高糖引起的细胞损伤具有一定的保护作用。结论成功制备了针对Na^+-K^+-ATPase DR多肽的mAb。

mGluR1选择性拮抗剂LY367385对脑星形胶质细胞Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的影响

背景：脑星形胶质细胞肿胀是肝衰竭时脑水肿的特征,但其机制尚未完全阐明。目的：研究代谢型谷氨酸受体1亚型（mGluR1）选择性拮抗剂LY367385对脑星形胶质细胞Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的影响。方法：分离、培养小鼠脑星形胶质细胞,分为谷氨酸组、谷氨酸＋LY367385组、谷氨酸＋DMSO组和空白对照组,以定磷法检测Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性,以高效液相色谱法测定ATP含量。结果：与空白对照组相比,谷氨酸组、谷氨酸＋LY367385组和谷氨酸＋DMSO组Na^＋-K^＋-ATP酶活性、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性和ATP水平显著降低（P〈0.05）;谷氨酸＋LY367385组和谷氨酸＋DMSO组显著高于谷氨酸组（P〈0.001）,两组间则无明显差异。结论：mGluR1选择性拮抗剂LY367385可提高Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性,减少ATP消耗,从而有效保护脑星形胶质细胞,有望成为预防和治疗肝性脑病的药物。

糖末宁对实验性糖尿病大鼠坐骨神经Na^＋-K^＋-ATP酶活性的影响

目的观察中药复方制剂糖末宁对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性影响.方法采用STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖末宁组、西药对照组、模型组,另设正常对照组.糖末宁组灌胃糖末宁,西药对照组灌胃甲钴胺片,连续6周,观察糖末宁对糖尿病大鼠坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性、血糖等指标的影响.结果糖尿病大鼠坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性明显降低,糖末宁能明显提高Na+-K+-ATP酶活性.结论糖末宁对糖尿病周围神经病变的治疗作用,可能与改善坐骨神经Na+-K+-ATP酶活性有关.

SMO保存液对犬肾低温保存期间Na^+-K^+ ATPase的影响

目的:研究SMO保存液对犬肾低温保存期间Na+-K+ATPase的影响。方法:建立犬离体肾脏单纯低温保存模型,对照组用0~4℃HTK保存液和UW保存液对供肾进行灌注和保存,试验组用0~4℃自制SMO保存液对供肾进行灌注和保存,分别于24、48、72h后取皮质标本,进行组织病理学观察及检测Na+-K+ATPase的活性。结果:SMO液组所见组织病理学改变,48h和72h比HTK液组轻,在各时间点与UW液组基本相似。Na+-K+ATPase活性,保存各时点,SMO液组与UW液组无明显差异;保存24h和48h,SMO液组与HTK液组无明显差异;保存72h,SMO液组Na+-K+ATPase活性明显高于HTK液组,存在明显差异。结论:SMO保存液在减轻细胞形态学改变和减缓Na+-K+ATPase活性下降方面显著优于HTK保存液,与UW保存液相当。

贝科能对复苏后大鼠甲状腺组织MDA含量及SOD和Na^+-K^+-ATPase活力的影响

目的研究贝科能对心肺复苏后大鼠甲状腺的保护作用。方法建立心肺复苏大鼠模型,然后将24只大鼠随机分为对照组、常规复苏组、贝科能治疗组。大鼠复苏后24 h取甲状腺组织液氮冷藏。采用比色法测定复苏前后3组甲状腺组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及Na+-K+-ATPase活力。结果与对照组相比,复苏后大鼠甲状腺组织中MDA含量明显增高(t=16.75,P<0.01),SOD及Na+-K+-ATPase活力显著降低(t=6.25、8.85,P<0.01);与常规复苏组相比,贝科能治疗组MDA含量明显降低(t=2.60,P<0.05),Na+-K+-ATPase活力显著增高(t=2.60,P<0.05)。结论贝科能对复苏后大鼠甲状腺具有保护作用。

甲状腺激素对大鼠心肌Na^＋，K^＋-ATP酶α1亚基表达的影响

目的探讨不同甲状腺激素（TH）水平对大鼠心肌Na^＋，K^＋-ATP酶（钠泵）α1亚基mRNA表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为甲状腺功能减退（简称甲减）组和对照组，分别摄入含碘量为50、300mg／kg的饲料，并分别饮用去离子水和自来水，喂养24周后放射免疫法测定血清TH水平，RT—PCR法测定心肌组织钠泵α1亚基mRNA的表达水平。结果甲减组血清TH水平明显低于对照组（P〈0．01）；心肌钠泵α1亚基mRNA表达水平，甲减组（0．59±0．51）与对照组（0．97±0．27）相比明显降低，差异有统计学意义（t=2．57，P〈0．05）。结论低碘饮食可以诱发大鼠甲状腺功能减退，低TH水平导致心肌钠泵α1亚基mRNA表达下降。

大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞ATP酶活力的影响

目的:观察大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞膜ATP酶活力的影响,分析大枣的补气血作用的可能途径。方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成。①选用Wistar大鼠60只,体质量170～190g,雄性。随机选用50只采用以下方法造成气血双虚模型:分别于实验第1,3,5,7,9天,尾部放血1mL/180g,于第2天腹腔注射环磷酰胺生理盐水溶液40mg/kg,于第4,6,8,10,12天腹腔注射环磷酰胺20mg/kg,造气血双虚模型;其余10只大鼠为空白对照组(仅注射同体积生理盐水)。②将50只气血双虚模型大鼠随机分为5组:大、中、小剂量大枣多糖组[灌胃大枣多糖溶液,由河南中医学院药物化学学科提供。本品为鼠李科植物枣干燥成熟果实的提取精制物(经乙醇回流脱脂、水提取、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、醇沉、真空干燥等程序,得大枣多糖)溶液剂量为200,100,50mg/kg,灌胃体积为10mL/kg],当归补血口服液组[灌胃当归补血口服液(郑州市协和制药厂生产,剂量为2次/d,10mL/次,批号010301)3.3mL/kg,原药液稀释1.5倍]及模型组(灌胃等体积生理盐水)。空白对照组仅灌同体积生理盐水。每天给药1次,连续给药14d。③于第14天给药后2h,用库尔特细胞全自动分析仪测定血中红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白和血小板计数。ATP酶测定用定磷法,按南京建成生物工程研究所提供的ATP酶试剂盒说明书测定红细胞Na+-K+-ATP酶和Ca2-Mg2-ATP酶活性。④计量资料组间比较采用t检验,方差不齐者采用t’检验。结果:大鼠60只均进入结果分析。①空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及血红蛋白含量明显高于模型组(P<0.05～0.01)。②空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05～0.01)。空白对照组,大、中剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Ca2+-ATP酶活力明显高于模型组(P<0.05),小剂量大枣多糖组大鼠Ca2+-ATP酶活力与模型组相近。结论:大枣多糖可以改善气血双虚大鼠的造血功能和红细胞能量代谢,从而起到补血作用。

低氧习服过程中肺组织一氧化氮水平及钠-钾-ATP酶活性的变化

目的:探讨低氧习服过程肺组织一氧化氮水平和Na-K-ATP酶活性++的变化及其对模拟高原低氧性肺水肿的影响。方法:将32只3月龄Wistar大鼠随机分成常氧对照组、急性低氧组、3000m低氧习服组、5000m低氧习服组,习服完成后,置于模拟海拔6000m急性低氧24h,检测动物肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP++酶活性的变化及肺超微结构的变化。结果:急性低氧组肺组织超微结构出现明显的间质性肺水肿,而经过低氧习服后间质性肺水肿则明显减轻;急性低氧组大鼠肺组织一氧化氮水平犤(17.09±3.62)μmol/L犦显著低于常氧对照组犤(60.55±4.27)μmol/L犦(q=31.642,P<0.01),经过3000m和5000m低氧习服后肺组织一氧化氮水平逐渐接近于常氧对照组,明显高于急性低氧组(q=25.540,43.625,P<0.01);急性低氧组肺组织Na-K++-ATP酶活性明显低于常氧对照组q=15.347,P<0.01),经过3000m(和5000m低氧习服后Na-K-ATP酶活性显著高于常氧对照组(q++=8.290,28.563,P<0.01)。结论:低氧习服后肺组织一氧化氮水平及Na-K-ATP酶活性的提高有++利于减轻大鼠低氧性肺水肿。

兔海水淹溺性肺水肿与钠钾-ATP酶的关系及不同剂量地塞米松对其影响

目的:探讨海水淹溺性肺水肿与肺钠钾-ATP酶的关系及不同剂量地塞米松对其影响。方法:将40只家兔随机分为4组:对照组(CG)、海水淹溺组(SG)和不同剂量地塞米松治疗组(DG1:0.2mg/kg、DG2:1mg/kg)。SG组兔给予气管内灌注3ml/kg海水,DG1、DG2组在CG组的基础上分别静注0.2mg/kg、1mg/kg地塞米松。于淹溺前及淹溺后30min、60min、120min进行动脉血气分析,淹溺后120min测定肺湿/干重比、肺泡通透指数及钠钾-ATP酶,观察各组兔肺脏在治疗前后光镜、电镜下的改变并计算肺损伤病理评分。结果:与SG组比较,DG1、DG2组在淹溺后60min、120min PO2明显升高(P<0.01),在淹溺后120min肺湿/干重比、肺泡通透指数及肺损伤病理评分明显下降(P<0.05),但DG1组与DG2组之间比较无显著性差异(P>0.05)。使用地塞米松干预后,DG1、DG2组钠钾-ATP酶活性明显增高,与CG及SG组比较均有明显差异(P<0.05)。从形态学上观察,SG,DG1及DG2组动物均可见肺毛细血管淤血,肺泡型、型上皮细胞受损,但SG组动物损伤相对较重。结论:地塞米松可改善兔海水淹溺性肺水肿的缺氧及减轻肺水肿,但增加剂量(1mg/kg)并不能增加治疗效果,其机制可能与地塞米松上调肺组织钠-钾-ATP酶有关。

Na-K-2Cl联合转运子-1和α_2 Na,K-ATP酶在耳蜗钾离子循环中的作用及与听觉功能的关系

目的应用 Na-K-2Cl 联合转运子-1(Na-K-2Cl Co-transporter 1,NKCC1)^(-/-)、NKCC1^(+/-)、α_2,Na,K-ATP 酶^(+/-)和 NKCC1^(+/-)/α_2Na,K-ATP 酶^(+/-)等不同基因型小鼠作为实验平台,对耳蜗钾离子循环模式与听觉功能进行研究,检验 NKCC1 和α_2Na,K-ATPase 在耳蜗钾循环中的地位和作用。方法应用 NKCC1^(-/-)、NKCC1^(+/-)和α_2Na,K-ATPase^(+/-)等基因敲除和转基因小鼠,同时培育 NKCC1^(+/-)/α_2Na,K-ATPase^(+/-)双半拷贝基因小鼠,采用听性脑干反应和耳蜗内电位检测技术对小鼠的听觉功能进行检测。应用 NKCC1 通道阻断剂速尿和 Na,K-ATP 酶通道阻断剂哇巴因,对 Castel鼠系进行通道阻断-听觉功能实验,进一步在小鼠体内检测耳蜗钾循环模式,对内耳钾循环与听觉生理之间的关系进行印证。结果 NKCC1^(+/-)小鼠和α_2Na,K-ATP 酶^(+/-)小鼠的听性脑干反应短声阈值(声压级)分别为(38.49±12.29)dB 和(53.32±7.62)dB,与野生型小鼠的(23.13±3.78)dB 比较均有提高,差异有统计学意义(t 值分别为3.559和10.267,P<0.05)。NKCC1^(+/-)小鼠和α_2Na,K-ATP 酶^(+/-)小鼠的耳蜗内电位值分别(78±7)mV 和(71±14)mV,分别低于野生型小鼠的(98±16)mV。NKCC1^(+/-)/α_2Na,K-ATP 酶^(+/-)小鼠听性脑干反应短声阈值为(24.14±8.83)dB,低于α_2Na,K-ATPase^(+/-)小鼠和 NKCC1^(+/-)小鼠,差异有统计学意义(t 值分别为6.128和2.255,P<0.05)。注射速尿后的 Castel 小鼠听性脑于反应听阈明显升高,与注射前比较其差异有统计学意义(t=12.162,P<0.05);注射哇巴因后的 Castel 小鼠也出现听阈升高(t=7.644,P<0.05)。而次序注射哇巴因和速尿后,Castel 小鼠听性脑干反应听阈明显低于单独注射速尿(t=4.515,P<0.01)。结论 NKCC1和α_2,Na,K-ATP 酶是耳蜗钾循环中的关键通道,任何一通道蛋白出现功能失衡均可影响内淋巴钾离子浓度及耳蜗内电位的维持,进而影响听觉功能。NKCC1 和α_2Na,K-ATP 酶在耳蜗钾循环诸通道中处于一种限制性动态平衡关系,在内耳钾代谢和耳蜗听觉功能的发挥中具有重要意义。本实验在小鼠实体中验证了 NKCC1和α_2Na,K-ATP 酶在内耳钾循环径路中的重要作用,同时也模拟了内耳钾循环模式。

高良姜素对缺血性脑卒中大鼠脑线粒体代谢相关酶的影响

目的:观察高良姜素对缺血性脑卒中大鼠脑线粒体能量代谢相关ATP酶的影响,探讨高良姜素通过干预线粒体能量代谢障碍发挥缺血性脑卒中保护作用的可能机制。方法:将120只雄性SD大鼠随机分成两大组,即术前给药组和术后给药组,每大组中又分为假手术组、模型组、阳性药银杏叶提取物EGb761组(mg·kg-1)及高良姜素高、中、低剂量组(100,50,25 mg·kg-1),每组10只。大鼠行中动脉栓塞手术前15 min或者术后6 h灌胃给药或给予等量生理盐水,于手术后24 h进行神经功能学评分,制备缺血侧脑组织线粒体悬液,并对其Na+-K+ATP酶,Ca2+-ATP酶,Mg2+-ATP酶,Ca2+-Mg2+ATP酶活性进行检测。结果:高良姜素中剂量和高剂量组,Na+-K+ATP和Ca2+-Mg2+ATP酶活性均有明显提高(P<0.05),低剂量组酶活性无明显改变;相比较,Ca2+-ATP酶,Mg2+-ATP酶活性各组之间没有明显的差别。结论:高良姜素能明显提高缺血性脑卒中大鼠脑线粒体Na+-K+ATP酶和Ca2+-Mg2+ATP酶活性,缓解缺血脑细胞的能量代谢障碍,是其发挥脑缺血保护作用的可能机制之一。

热处理对回收血中肿瘤株细胞的杀伤作用和对红细胞Na^+-K^+-ATP酶活性的影响

目的探讨不同温度热处理对回收血中肿瘤细胞的杀伤作用和对红细胞Na+-K+-A1P 酶活性的影响。方法将培养好的SGC-170胃癌细胞株和LOVO大肠癌细胞株分别加入浓缩红细胞中,采用水浴法加温处理。根据加温温度不同分为5组:37℃组、42℃组、43℃组、45℃组、47℃组,加热时间均为40min。采用密度梯度离心法分离肿瘤细胞,台盼蓝染色计数存活肿瘤细胞;测定肿瘤细胞的克隆形成、DNA BrdUrd标记情况,测定红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性。结果与37℃组比较,42℃ -47℃组存活肿瘤细胞数均减少,肿瘤细胞克隆形成率减少,肿瘤细胞DNA BrdUrd标记率降低,43℃～47℃组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性降低(P<0．01),42℃组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性差异无统计学意义(P>0．05)。结论42-47℃温度加热40 min不能完全杀灭肿瘤细胞,43-47℃温度加热40 min对红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性还有明显抑制作用。

丙泊酚对大鼠单肺通气时代谢酶的影响

目的:观察丙泊酚对大鼠单肺通气时肺代谢酶的影响,为丙泊酚在胸科麻醉中的应用提供实验研究的数据。方法:40只健康清洁级SD大鼠随机分成四组:P1组:空白组(灌注液中无丙泊酚);P2组:含36mg/L丙泊酚;P3组:含24mg/L丙泊酚;P4组:含12mg/L丙泊酚,每组10只。按随机顺序取大鼠进行实验,称量体重,麻醉,气管切开插管接呼吸机行单肺机械通气1h。然后取出肺组织。-70℃保存,以备统一作Ca2+-ATPase、Na+-k+ATPase测定。结果:肺组织Na+-K+ATPase活力:P1组通气侧活力显著低于P2、P3、P4组通气侧(P<0.01);P1组非通气侧活力显著低于P2、P3、P4组非通气侧(P<0.01)。各组非通气侧均低于同组通气侧(P<0.01或0.05)。肺组织Ca2+-ATPase活力:P1组通气侧显著低于P2、P3、P4组通气侧(P<0.01);P1组非通气侧显著低于P2、P3、P4组非通气侧(P<0.01)。各组非通气侧均显著低于同组通气侧(P<0.01)。结论:通过对大鼠单肺通气时的灌注实验研究发现,丙泊酚对单肺通气时的肺代谢酶有保护作用,其程度与丙泊酚浓度在一定范围内无关。

脂氧素A4对缺血再灌注大鼠心肌组织Na＋-K＋-ATP酶的影响及意义

目的探讨大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）前、后使用脂氧素A4（LXA4）对心肌组织Na^＋-K^＋-ATP酶的影响及意义。方法72只SD大鼠随机分成假手术一组（C1组）、假手术二组（C2组）、MIRI一组（I／R1组）、MIRI二组（I／R2组）、MIRI前用药组（LX，组）、MIRI后用药组（LX2组），每组12只。建立大鼠MIRI模型，各组于开胸前取血（T1）、实验结束后取血（T2）测血清cTnI浓度。检测Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白、mRNA的表达及活性改变；同时检测心肌细胞凋亡率，测定SOD活性、MDA含量，电镜下观察各组超微结构的改变。结果I／R1、LX1与C1相比，I／R2、LX2与C2相比，Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白（α1：0．19±0．03，0．29±0．05比0．46±0．06，0．21±0．03，0．36±0．05比0．48±0．07，α2：0．20±0．02，0．32±0．04比0．54±0．05，0．23±0．03，0．38±0．04比0．56±0．06，α3：0．24±0．03，0．35±0．04比0．61±0．04，0．26±0．03，0．4l±0．04比0．59±o．04，β1：0．22±o．03，0．33±0．04比0．56±0．04，0．24±0．03，0．39±0．04比0．54±0．04），mRNA的表达下降[（0．21±0．07）×10^6，（0．55±0．28）×10^6比（5．73±1．97）×10^6，（0.20±0．09）×10^6，（1．78±0．86）×10^6比（6．21±2．22）×10^6]，活性（mmol／gprot）降低（0．73±0．04，0．95±0．11比1．38±0．15，0．75±0．04，1．19±0．12比1．37±0．13）；血清cTnI浓度（ng／L）（T2）（580．93±43．92，292．95±21．99比151．53±14．00，592．80±60．83，207．13±28．54比155．18±14．92），凋亡指数（52．52±6．36，34．55±5．65比7．48±2．09，54．75±6．29，26．53±4．60比8．54±2．76）以及SOD活性（U／mgprot）（196．84±31．82，293．59±43．10比102．55±24．77，202．48±35．40，411．71±60．44比113．36±26．95）、MDA含量（nmol／gprot）（2402．94±438．56，1548．57±238．08比472．48±190．77，2422．28±517．74，1055．48±237．44比483．26±172．05）显著增高（P〈0．05）。LX1与I／R1，LX2与I／R2相比，Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白（α1：0．29±0．05比（0.19±0．03，0．36±0．05比0．21±0．03，0．2：0．32±0．04比0．20±0．02，0．38±0．04比（0．23±0．03，α3：0．35±0．04比0．24±0．03，0．41±0．04比0．26±0．03，β1：0．33±0．04比0．22±0．03，0．39±0．04比0．24±0．03）、mRNA的表达[（0．55±0．28）×10^6比（0．21±0．07）×10^6，（1．78±0．86）×10^6，比（0．20±0．09）×10^6]明显增加，Na^＋-K^＋-ATP酶活性（mmol／gprot）（0．95±0．11比0．73±0．04，1．19±0．12比0．75±0．04）与SOD的活性（U／mgprot）（293．59±43．10比196．84±31．82，411．7l±60．44比202．48±35．40）明显增强；同时凋亡指数（34．55±5．65比52．52±6．36，26．53±4．60比54．75±6．29）、血清cTnI浓度（ng／L）（T2）（292．95±21．99比580．93±43．92，207．13±28．54±592．80±60．83）、MDA含量（nmol／gprot）（1548．57±238．08比2402．94±438．56，1055．48±237．44比2422．28±517．74）也明显降低（P〈0．05）。LX气对缺血再灌注后心肌超微结构有明显的保护作用。结论在MIRI前、后应用LXA4能明显减轻心肌氧化损伤，上调Na^＋-K^＋-ATP酶蛋白、mRNA的表达，增强Na^＋-K^＋-ATP酶的活性，保护心肌超微结构，减少细胞凋亡，发挥其心肌保护作用。

硫酸镁对脊髓损伤后钠离子-钾离子-三磷酸腺苷酶活性和丙二醛浓度与含水量的影响

目的:硫酸镁用于脑损伤的治疗已取得了较满意的疗效,探讨硫酸镁对脊髓损伤后Na+-K+-ATP酶活性、丙二醛浓度与含水量的影响。方法:改良Allen's法建立SD大鼠急性脊髓损伤模型,随机分损伤组和硫酸镁治疗组(脊髓损伤后30min一次性腹腔注射300mg/kg硫酸镁),在伤后6,12和24h检测伤段脊髓Na+-K+-ATP酶活力、脊髓组织含水量及丙二醛浓度,与正常对照组(n=8)比较。结果:损伤组与对照组比较,Na+-K+-ATP酶活力降低,丙二醛浓度与脊髓含水量升高,差异有非常显著性意义(P<0.01);治疗组与损伤组比较,Na+-K+-ATP酶活力增加、丙二醛浓度及含水量降低,差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:硫酸镁能提高大鼠急性脊髓损伤后伤段脊髓Na+-K+-ATP酶活力,降低丙二醛浓度及含水量,对脊髓损伤有保护作用。

兔角膜内皮细胞Na^+-K^+-ATP酶活性检测及其意义

目的:探讨角膜内皮细胞上Na+-K+-ATP酶的活性。方法:运用接膜联合组织块法获得原代及传代培养的兔角膜内皮细胞(RCECs),使用考马斯亮蓝试剂盒及超微量ATP酶测试盒分别测定即兴揭取组、原代7 d组、传二代5 d组的Na+-K+-ATP酶活性。结果:即兴揭取组Na+-K+-ATP酶活性平均为(0.595±0.010)U/mgprot、原代7 d组及传二代5 d组分别为(0.572±0.007)U/mgprot和(0.333±0.011)U/mgprot,任意两两组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:原代RCECs更接近在体细胞。Na+-K+-ATP酶活性定量检测,可作为评价体外培养RCECs的功能指标。