Na^+/H^+交换体与血管平滑肌细胞增殖

Na+ / H+ 交换体是存在于真核细胞的一种膜蛋白 ,调节细胞内 p H、Na+ 浓度 (p Hi、 [Na+ ]i) ,在血管平滑肌增生性疾病如高血压、血管成形术后等情况下活性增高 ,通过使细胞内碱化及细胞内 Na+浓度升高 ,起促进细胞增殖、减少细胞凋亡作用 ,从而促进血管平滑肌细胞增殖 ;多种血管活性因子通过激活 Na+ / H+交换体引起血管平滑肌细胞增殖 ,故推测 Na+ /

Na^+/H^+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制

[目的]探讨Na+/H+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制。[方法]通过观察糖尿病鼠单个心肌细胞在缺氧/复氧时细胞胞浆Ca2+浓度的动态变化以及Na+/H+交换体阻滞剂(EIPA)在不同时相(糖尿病单纯缺氧组即DM组,缺氧/复氧全程给药组即DM-EIPA组,复氧前给药1组即DM-EIPA 1组,复氧前给药2组即DM-EIPA2组)对Ca2+浓度的影响来研究Na+/H+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制。[结果]DM-EIPA组在180 min的缺氧期间Ca2+浓度的上升幅度显著低于DM组、DM-EIPA1组和DM-EIPA2组;在复氧期间DM-EIPA组和DM-EIPA2组Ca2+浓度的上升幅度显著低于DM组,而前两组之间差异无显著性意义。[结论]EIPA可以通过减轻钙超载而对缺血再灌注的糖尿病鼠心肌细胞起保护作用,可能对糖尿病心肌病的发生发展有预防作用。

尿NHE3在急性肾损伤早期诊断中的价值

目的探讨尿Na^+/H^+交换体亚型3(Sodium Hydrogen exchanger isoform 3,NHE3)在重症监护(ICU)患者急性肾损伤(acute renal injury,AKI)早期诊断中的价值。方法前瞻性选择入住ICU的100例患者,每天收集血、尿标本,用酶法测定血清肌酐(Scr),ELISA法测定尿NHE3水平,计算肾小球滤过率(GFR),根据有无合并AKI将患者分成AKI组和非AKI组,并与30例健康体检者作为正常对照组进行比较。采用ROC曲线评价尿NHE3诊断AKI的临床价值。结果三组尿NHE3基线水平无明显差异,非AKI组Scr、GFR、尿NHE3水平无明显变化,AKI组尿NHE3水平显著升高,升高时间较Scr提前24 h。尿NHE3与Scr呈正相关、与GFR呈负相关(r=0.457,-0.463,P均<0.05)。以Scr升高>50%或血肌酐升高绝对值≥26.4μmol/L作为AKI的诊断标准,NHE3灵敏度和特异度绘制ROC曲线,曲线下面积(AUC)为0.758,与完全随机情况下获得的AUC=0.5差异有统计学意义(P<0.05)。以NHE3升高>50%基础值作为AKI的诊断界限时,敏感度和特异度分别为67.9%和88.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为70.4%和87.7%。结论尿NHE3表达较Scr更早发生变化,可作为ICU患者AKI早期预测指标。

酸中毒致大鼠离体冠状动脉收缩的机制

目的:探讨细胞外酸中毒(pH_(ex)6.8)致大鼠离体冠状动脉(RCA)收缩的机制。方法:采用离体微血管张力法,通过观察Na^+-H^+交换体1(NHE-1)选择性抑制剂cariporide(HOE-642)或Na^+-HCO_3^-共同转运体(NBC)抑制剂S0859预孵对pH_(ex)6.8所致RCA收缩的影响,探讨酸碱转运体在酸中毒收缩RCA中的作用;通过观察氯通道抑制剂NPPB和尼氟酸(NFA)预孵及细胞外去除氯离子对pH_(ex)6.8所致RCA收缩的影响,探讨氯离子通道在酸中毒收缩RCA中的作用。结果:pH_(ex)6.8引起RCA静息张力升高,最大张力为(3.90±0.95)mN。30μmol/L HOE-642和100μmol/L S0859均抑制pH_(ex)6.8引起的RCA收缩(P<0.01)。NPPB和NFA均呈浓度依赖性地抑制pH_(ex)6.8引起的RCA收缩和KCl(60 mmol/L)引起的收缩。100μmol/L的NPPB和NFA均抑制U46619(1μmol/L)引起的RCA收缩(P<0.01)。等摩尔NaBr代替细胞外液中NaCl后,几乎完全抑制pH_(ex)6.8引起的RCA收缩(P<0.01),但是对KCl(60 mmol/L)或U46619(1μmol/L)引起的RCA收缩无显著影响。结论:细胞外液酸化所致的RCA收缩与激活NHE-1和NBC及促进氯离子跨细胞膜运动有关。

连续性肾脏替代治疗治疗对脓毒症急性肾损伤患者尿ALR、NHE3及血IL-18水平的影响

目的观察脓毒症急性肾损伤治疗中连续性肾脏替代治疗(CRRT)的应用效果及对患者血白细胞介素-18(IL-18)、尿Na/H交换体亚型3(NHE3)、肝再生增强因子(ALR)水平的影响。方法前瞻性选取2015年1月至2019年11月长江大学附属仙桃市第一人民医院收治的95例脓毒症急性肾损伤患者,按照随机平行分组法将其分为两组:对照组(n=47)和研究组(n=48)。对照组采用常规抗脓毒症治疗,研究组在常规抗脓毒症的基础上采用CRRT治疗。比较两组患者治疗前后脓毒症指标(降钙素原、中性粒细胞比率、白细胞计数)、IL-18、NHE3、ALR与治疗后ICU住院时间、心血管事件发生率、尿量恢复时间。结果治疗后,研究组患者的降钙素原、中性粒细胞比率、白细胞计数、IL-18、NHE3、ALR、ICU住院时间、心血管事件发生率、尿量恢复时间依次为(8.14±1.95)ng/mL、(88.03±3.14)%、(16.52±2.04)×109/L、(43.08±6.14)ng/L、(124.82±15.45)pg/mL、(159.14±25.46)pg/mL、(9.27±3.41)d、10.42%、(7.86±2.61)d,对照组依次为(4.15±1.62)ng/mL、(78.42±3.35)%、(12.97±2.31)×109/L、(60.11±7.52)ng/L、(200.67±13.93)pg/mL、(220.76±27.08)pg/mL、(13.08±5.95)d、29.79%、(10.95±3.82)d。与对照组相比,研究组患者的治疗后降钙素原、中性粒细胞比率、白细胞计数、IL-18、NHE3、ALR水平与心血管事件发生率明显更低,且ICU住院时间、尿量恢复时间更短,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论脓毒症急性肾损伤治疗中CRRT的应用效果显著,可有效抑制脓毒症急性肾损伤进程,降低IL-18、NHE3、ALR水平,还可减少心血管事件,促使其快速康复。

Amiloride对离体自发高血压大鼠心肌肥厚的影响

目的:观察amilorid(阿米洛利)对自发高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心肌细胞内pH值(pHi)的影响。方法:胶原酶灌流分离得到单个心室肌细胞,以pH荧光染色剂BCECF/AM染色后,在激光共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)下,测量细胞内的荧光强度。结果:SHR对照组心肌细胞内荧光强度比正常SD大鼠对照组显著升高(P<0.01);高剂量、低剂量amiloride组和enalapril组心肌细胞内的荧光强度与SHR对照组比较,均明显下降(P值均<0.01);amiloride组低于enalapril给药组(P<0.01)。结论:SHR心肌细胞内pHi明显升高。amiloride,enalapril可以降低SHR心肌细胞内pHi,amiloride的作用比enalapril更明显。

匹那地尔合用卡立泊来德对离体大鼠心肌梗死范围的影响

三磷酸腺苷（ATP）敏感性钾通道（KATP通道）是受细胞内ATP浓度等多因素调节的钾通道,KATP通道在缺血及再灌注损伤的发生和发展中起很重要的作用。匹那地尔可开放KATP通道,对心脏有保护作用[1]。Na^＋/H^＋交换蛋白是一种存在于细胞膜上的糖蛋白,在生理状态下受很多因素的调节[2]。

阿米洛利抑制NHE-1减轻低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖

目的:研究Na+/H+交换抑制剂阿米洛利对低氧刺激的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,以及Na+/H+交换体-1(NHE-1)活性和表达的变化。方法:常氧(21%O2)或低氧(2%O2)条件下培养PASMCs,并分别给予浓度为1.653、3.125、6.25、12.5、25和50μmol/L等不同浓度的阿米洛利,培养24h,采用MTT比色实验和免疫组化检测PCNA阳性细胞率的方法反映细胞增殖情况,同时采用激光共聚焦检测细胞内pH以反映Na+/H+交换体-1活性,RT-PCR法检测Na+/H+交换体-1mRNA的表达量。结果:低氧培养的PASMCs细胞内pH升高,NHE-1mRNA的表达增多,而阿米洛利可以降低细胞内pH,减少NHE-1mRNA的表达量。同时低氧较常氧培养MTT光吸收值较常氧培养明显升高。PCNA阳性细胞率明显增高,而给予阿米洛利时上述两个指标随药物浓度增加而逐渐下降。结论:低氧可以激活PASMCs细胞膜上的E-1,增加其mRNA水平表达量,使细胞内碱化,促进细胞增殖,而Na+/H+交换抑制剂阿米洛利可以抑制其活性,减少mRNA水平的表达,导致细胞内酸化,从而抑制细胞增殖,并且此抑制作用在3.125～50μmol/L浓度范围内呈现明显的浓度依赖性。

N-端结构域决定拟南芥KEA1和KEA2的亚细胞定位及定位与功能的关系

采用转基因技术,分析了AtKEA1和AtKEA2N-端结构域的生物功能。亚细胞定位分析显示,完整的AtKEA1和AtKEA2定位于叶绿体,只含有AtKEA1和AtKEA2的N-端100个氨基酸的多肽片段也分布在叶绿体;然而,缺失N-端结构域的AtsKEA1和AtsKEA2则分布在细胞质中。转基因植株生长表型分析发现,完整的AtKEA1和AtKEA2能很好地恢复kea1kea2双突变体叶片发黄、生长受阻的表型。而缺失N-端结构域的AtsKEA1和AtsKEA2却不能恢复kea1 kea2双突变体的表型。研究结果表明,N-端结构域决定AtKEA1和AtKEA2的亚细胞定位;并且正确的亚细胞定位对于AtKEA1和AtKEA2参与调节植物生长发育的生物功能至关重要。

急性肾损伤相关生物标志物的研究进展

急性肾损伤(AKI)是一种临床常见且严重的病症。目前临床上常用血清肌酐(SCr)、血尿素氮和尿量等指标来评价肾功能的下降,但它们的改变仅在严重肾脏损伤后才有意义,且易受非肾因素影响。寻找特异性、敏感性的早期诊断标志物对于AKI的治疗、降低患者死亡率和改善预后至关重要。AKI早期诊断标志物,主要涉及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)、Klotho、肾损伤分子1(KIM-1)、白细胞介素-18(IL-18)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、高半胱氨酸蛋白61(Cyr 61)、TIMP-2、IGFBP-7、尿Na^+/H^+交换器-3(NHE3)、miRNA、组织蛋白酶(Cats)和肾动脉阻力指数(RRI)等。由于目前还没有一种能够同时具备高灵敏性和高特异性的理想AKI标志物,所以组合标志物将是AKI生物标志物研究的方向。