9种Na^＋通道mRNA在5个不同发育阶段大鼠16种组织中表达及变化趋势

电压-门控Na^＋通道由1个可单独发挥作用的α亚单位和2～4个起辅助作用的β亚单位构成,在可兴奋细胞动作电位的产生及传导等过程中起重要作用.采用RT-PCR法对5个不同发育阶段（P1、P9、P40、P80、P120）Wistar大鼠16种不同组织的9种Na^＋通道α亚单位及1种β亚单位的mRNA进行检测发现：同种类型Na^＋通道mRNA在大鼠不同组织中的表达不同,不同类型Na^＋通道mRNA在大鼠同一组织中的表达不同.其中,神经系统和心肌组织中Na^＋通道mRNA的表达最高,随着日龄的增加,Na^＋通道mRNA在不同组织中表达的变化趋势不同.Na^＋通道在全身组织中的广泛分布及随发育周期的不同变化趋势,为离子通道病的研究及治疗提供了理论基础.

乌腺金丝桃含药血清对大鼠心肌细胞快Na^+通道电流的影响

目的:研究乌腺金丝桃含药血清对大鼠心肌细胞快Na^+通道电流的影响。方法:采用全细胞膜片钳方法,给药前后自身对照比较,阳性对照药为奎尼丁,通过对比I_(Na)的电流密度峰值、激活曲线、失活曲线分析乌腺金丝桃含药血清对大鼠心肌细胞快Na^+通道电流。结果:给予乌腺金丝桃含药血清及奎尼丁干预后,I_(Na)I-V曲线明显上移,I_(Na)稳态激活曲线和稳态失活曲线向去极化方向移动。结论:乌腺金丝桃含药血清对大鼠心肌细胞快Na^+通道有抑制作用,提示其抗心律失常机制可能与抑制快Na^+通道电流有关。

作用于电压门控Na^+通道的海洋生物毒素

电压门控Na+通道是神经、肌肉和心脏产生和传递快速电信号的基础。在海洋生态系统中,有许多毒素通过与电压门控Na+通道相互作用,从而产生一系列的药理作用和毒理效应。此文综合介绍了作用于电压门控Na+通道的代表性海洋生物毒素。

Na^+通道、K^+通道、Na^+—K^+泵的区别与应用

简要阐述了细胞膜上Na＋通道、K＋通道＼Na＋-K＋泵泵的区别以及在物质运输中的应用。

成熟型与幼稚型Nav 1.5Na^+通道变构体在神经损伤大鼠背根神经节细胞中的表达

目的:研究幼稚型和成熟型Nav1.5 Na^+通道变构体在选择性神经损伤(SNI)大鼠背根神经节细胞(DRG)中的表达情况。方法:建立SNI大鼠模型。采用RT-PCR、DNA测序、限制性酶切技术、免疫组化等方法检测幼稚型和成熟型Nav1.5 Na^+通道变构体在SNI大鼠DRG中的表达;采用Western blot法检测DRG神经元中蛋白激酶C(PKC)的表达。结果:成熟型和幼稚型Nav1.5 Na^+通道变构体在大鼠DRG神经元中的表达比例为2.5∶1。在SNI大鼠模型中,幼稚型和成熟型Nav1.5的m RNA和蛋白表达水平均降低50%左右,PKC-γ表达水平增加大约1倍。结论:幼稚型和成熟型Nav1.5 Na^+通道变构体在大鼠DRG中有表达,在疼痛模型中的表达水平显著降低;在SNI模型中,PKC-γ表达水平的上调直接或间接导致了Nav1.5亚型的低表达,此机制可能参与了神经病理性疼痛的发生发展过程。

胰岛β细胞Na^+通道的研究进展

Na+通道存在于胰腺胰岛β细胞上;相对其它可兴奋细胞上的Na+通道,有其特殊的生理特性和功能。研究发现β细胞上的Na+通道影响了β细胞的动作电位,并可能参与胰岛素的分泌调节。但是目前对于Na+通道在β细胞上的功能还存在着很大的争议。随着新的研究技术的发展,有必要为目前对β细胞Na+通道的研究进行综述,这对于进一步研究β细胞上Na+通道的功能具有重要的指导意义。

百日咳毒素对棉铃虫神经细胞电压门控钠、钙通道的调节作用

用膜片钳技术研究了百日咳毒素对离体培养的棉铃虫幼虫中枢神经细胞电压门控钠、钙通道的影响。结果表明,对照组细胞钠通道在-50^-40mV激活,在-20mV左右电流达到最大值,在记录的20min内,电流-电压关系曲线(I-V)和电流幅值未有明显变化;细胞与百日咳毒素预孵后,钠通道在-40mV左右激活,电流在0mV左右达到最大值,在记录过程中,激活电压和峰值电压继续向正方向移动约10mV,电流持续下降。对照组钙通道在-40^-30mV激活,在0mV左右电流达峰值;经百日咳毒素处理后,I-V曲线向负电位方向移动约10mV,在记录过程中,I-V曲线继续向负电位方向移动,电流的衰减(rundown)现象比对照组严重,此外,百日咳毒素处理引起钙电流达到峰值的时间显著延长。结果提示,百日咳毒素敏感的G蛋白(Gi)可能通过直接途径或间接途径调节棉铃虫神经细胞钠、钙通道的电压敏感性和开放几率以及钙通道由备用态向激活态转化的速度。同时,经百日咳毒素处理后钠通道的I-V曲线与抗性棉铃虫I-V曲线非常相似,可能暗示Gi蛋白在棉铃虫抗药性形成中发挥作用。

功能性腹泻脾虚证模型大鼠肠组织钠离子通道蛋白的变化

目的观察功能性腹泻脾虚证模型大鼠肠组织NHE3、Na+-K+-ATPase、ENaC等离子通道蛋白的表达变化。方法采用随机数字表法将24只3周龄雄性Wistar大鼠分为正常组和模型组,利用小平台站立法联合高乳糖饲料喂养建立功能性腹泻脾虚证模型,造模14 d后取材,采用Western blot检测肠组织中的各指标蛋白表达变化。结果造模后1 d,两组大鼠体重均显著重于造模前1 d(P<0.01),但模型组显著轻于正常组(P<0.01)。模型组大鼠腹泻率为100%。造模后,模型组大鼠结肠NHE3、Na+-K+-ATPase相对表达量均低于正常组(P<0.05或P<0.01),NHERF2、PKAR2相对表达量均高于正常组(P<0.05或P<0.01)。结论Na+-K+-ATPase、NHE3等Na+通道蛋白的表达下调可能是功能性腹泻脾虚证发生的分子生物学基础,值得进一步研究证实。

nNav1.5在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

目的:研究nNav1.5 mRNA及蛋白在人脑星形细胞瘤组织和正常脑组织中的表达差异。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及western blot法分别检测nNav1.5 mRNA及蛋白在30例人脑星形细胞瘤组织和8例正常脑组织中的表达水平。结果:人脑星形细胞瘤组织中nNav1.5基因及蛋白的表达值显著高于正常脑组织(P<0.01),且随病理级别的增高而升高。结论:nNav1.5 mRNA及蛋白在人脑星形细胞瘤组织中的表达水平显著升高,这可能与星形细胞瘤细胞增殖活跃及侵袭性生长等生物特性有关。

木犀草素通过调节上皮钠通道影响肺上皮离子转运

目的探究木犀草素(luteolin,Lut)对H441细胞和小鼠肺组织上皮钠通道(epithelial sodium channels,ENaC)的影响及相关机制。方法通过CCK-8毒性实验检测Lut对H441细胞的最佳处理浓度;将生长状态良好的H441细胞分为空白组、脂多糖(LPS)模型组(10μg·mL^-1)、Lut组(10μmol·L^-1)、Lut+LPS组,将各组进行对应处理后,以Western Blot法检测各组H441细胞α-、γ-ENaC蛋白表达情况;将16只雄性BALB/c小鼠随机分为空白组、LPS模型组(5 mg·kg^-1)、Lut组(20 mg·kg^-1)、Lut+LPS组,其中LPS模型组和Lut+LPS组用LPS复制急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,模型复制前、后12 h Lut组及Lut+LPS组给予腹腔注射Lut治疗,模型复制24 h后,处死小鼠,取小鼠肺组织及血清,应用组织切片HE染色技术观测ALI小鼠肺组织病理变化以及Lut对其的治疗作用;以Western Blot法检测各组α-、γ-ENaC蛋白在小鼠肺组织中的表达;用ELISA技术检测各组小鼠血清中环磷酸鸟苷(cGMP)蛋白表达的变化。结果CCK-8实验结果表明,与空白组相比,5、10μmol·L^-1Lut能促进H441细胞增殖(P<0.05),但当Lut浓度达到25μmol·L^-1后,Lut抑制H441细胞增殖(P<0.01)。组织切片HE染色结果说明,LPS诱导小鼠ALI模型复制成功,Lut能改善ALI模型小鼠肺组织病理变化。Western Blot实验结果表明,与空白组比较,模型组的H441细胞以及小鼠肺组织α-、γ-ENaC蛋白表达均下降(P<0.01);与模型组比较,Lut+LPS组的H441细胞及小鼠肺组织α-、γ-ENaC蛋白表达水平升高(P<0.01)。ELISA结果表明,与空白组比较,LPS能降低小鼠血清中cGMP水平(P<0.01);与模型组比较,Lut+LPS组小鼠血清中cGMP表达水平升高(P<0.01)。结论木犀草素能通过提高急性肺损伤中肺ENaC蛋白表达来调节肺上皮离子转运,其机制可能与调节c GMP水平有关。

心肌阳离子通道与心肌缺血再灌注损伤的研究进展

心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)是缺血心肌在恢复血流后常见的并发症。大量研究表明,分布于心肌细胞膜和相关细胞器的一些阳离子通道参与MIRI的相关病理生理过程:早期研究发现主要有Na^+、K^+和Ca^(2+)离子通道参与MIRI过程,而近期最新发现瞬时受体电位(transient receptor potential,TRP)也参与MIRI过程,并可能成为新的MIRI药物干预靶点。本文拟对目前与MIRI密切相关的心肌细胞上Na^+、K^+和Ca^(2+)及TRP等阳离子通道在MIRI病理生理中的作用作一综述。

β_2-受体激动剂增强肺泡Na^+及水肿液吸收机制的研究进展

本文从β2-肾上腺素受体激动剂(以下简称β2-激动剂)对肺泡上皮Na+通道的作用机制、信号转导调控和相关蛋白转录翻译的调控方面,综述了肺水肿液清除机制的研究进展。

A型肉毒素治疗三叉神经痛的作用机制研究及进展

三叉神经痛的特征表现为单侧阵发性的面部疼痛,疼痛性质通常为针刺或电击样,疼痛范围局限在三叉神经支配区的一支或多支。经典的三叉神经痛被认为由于三叉神经受到血管慢性压迫后出现脱髓鞘或者髓鞘化不良,受损的神经纤维自发异常放电引起烧灼样的痛觉,然而其具体的发病机制仍存在争议。临床试验表明A型肉毒素可以安全有效治疗三叉神经痛,然而其作用机制仍不清楚,与其肌肉麻痹的作用机制相比,其镇痛机制似乎更加复杂。本篇综述回顾了三叉神经痛的发病机制、A型肉毒素的结构、镇痛作用机制以及注射可能带来的不良反应,作用机制部分包括在外周抑制炎性介质的释放、Na通道的失活、抑制瞬时感受器电位(TRP)通道在细胞膜上的表达、逆向轴突转运和转胞吞作用。

囊性纤维化治疗的研究进展

囊性纤维化病(CF)是一种致命的常染色体隐性疾病,由囊性纤维化跨膜转录调节因子(CFTR)突变引起。这一突变导致CFTR功能不全,从而导致肺功能等严重损伤。在CF患者的气管中可以观察到氯离子分泌减少,盐吸收增加,氯离子分泌降低可能是CFTR损伤直接导致的,然而,盐吸收的增多可能是因CFTR损伤对钠离子通道限制引起的。

体外暴露900MHz射频磁场对小鼠神经元电压门控Na^+通道的影响

[目的]研究手机900 MHz射频磁场对小鼠脑皮质神经元Na+通道的影响。[方法]选取7～10 d鼠龄的昆明小鼠(乳鼠),取其活脑组织切片,经酶解消化、孵育后,采用酶解和机械相结合的分离方法制备小鼠脑皮质神经元。对照组及3个暴露组均记录10个细胞。采用900 MHz、发射功率为398.1 mW的射频磁场作用3个磁场暴露组5、10和15 min后,应用全细胞膜片钳技术观测各组细胞膜电压门控Na+通道,与对照组比较,探究其对神经元动作电位的影响。[结果]900 MHz磁场暴露使神经元Na+通道激活电位向超极化方向移动,Na+电流峰值增大,使得Na+通道激活和失活曲线向超极化方向移动:对照组与磁场暴露组半数激活电压分别为(-34.983±0.34)mV和(-43.137±0.56)mV(P<0.05),斜率因子k分别为(2.334±0.15)mV和(2.339±0.36)mV(P>0.05);半数失活电压分别为(-55.809±0.189)mV和(-63.64±0.627)mV(P<0.05),斜率因子k分别为(4.40±0.147)mV和(5.737±0.54)mV(P>0.05)。[结论]900 MHz磁场暴露小鼠皮层神经元可改变Na+通道的跨膜离子电流-电压(I-V)特性、激活和失活特性,从而使得动作电位的开启提前和加速快速上升阶段,使得神经元细胞更加兴奋并且促进动作电位的传导,影响神经元的生理功能。

280 mT静磁场对成肌细胞Na＋通道特性的影响

目的 研究磁场对成肌细胞Na＋通道特性的影响.方法 实验分为空白对照和280 mT磁场作用组,将成肌细胞暴露于由磁铁产生的280 mT恒定磁场强度中,每组分别于12、36、60h后,应用全细胞膜片钳技术记录成肌细胞钠电流的激活、失活以及恢复曲线.结果 空白对照组中,Na＋通道开放的数目并不会随细胞培养时间的增加而发生改变.280 mT磁场作用组中,作用36 h,60h后峰电流密度值与其他组差异有统计学意义（n=10,P＜0.05）,280 mT 36 h组的半数最大激活电压为-25.39±0.37 mV、半数最大失活电压数值为-64.88±2.38 mV（n=10,P＜0.05）,280 mT 36 h,60 h失活后恢复时间常数减少,分别为8.49±0.16 ms和8.98±0.25ms（n=10,P＜0.05）.结论 磁场未改变Na＋内向电流具有快速激活和快速失活的特性.磁场作用下,Na＋通道开放的数目随时间的增加而增加,稳态激活曲线右移,Na＋通道难激活,但通道激活的速率没有改变.失活电压（绝对值）减小,通道不容易失活.通道从失活到恢复的过程加快.从动力学角度看,随着加磁时间的增加,磁场作用促进Na＋内流,Na＋开放和关闭的形式发生了改变.

印防已毒素和蛇毒、蝎毒对中枢神经系统的作用机制

印防已毒素、蛇毒和蝎毒广泛存在于自然界,因其对神经系统的毒性作用而在神经科学研究中得到广泛应用。本文介绍了这三种天然的动植物神经毒素对中枢神经系统的作用机制,并就它们与神经细胞膜上离子通道、实触的GABA受体、Ach受体等的相互作用来分析其对神经细胞的电活动的影响。

烟蚜抗药性机制的研究进展

烟蚜是世界上危害最为严重的农业经济害虫之一,主要在夏季危害,不仅通过直接取食植物汁液造成农产品产量和品质下降,还能传播150多种可寄生不同植物的病毒,分泌蜜露滋生杂菌在植物表面形成霉污,从而造成严重的经济损失。为进一步探明其抗性机制,笔者立足生物化学和分子生物学知识,从基因E4、FE4和CYP6CY3扩增引起的代谢抗性,乙酰胆碱酯酶基因、Na+通道结构基因和烟碱型乙酰胆碱受体基因等突变引起的靶标抗性,及体壁角质层渗透性降低引起的体壁抗性等3个方面对烟蚜的抗性机制进行了概述。

Dravet综合征分子遗传学研究进展

Dravet综合征（Dravet syndrome，DS），1978年由法国医生Dravet等首次报道，当时命名为婴儿严重肌阵挛性癫痫（SMEI）。在Dravet首次报道以后，很多病例都被先后报道。1989年国际抗癫痫联盟（ILAE）修订的分类标准将其确立为一种独立的癫痫综合征，并命名为Dravet综合征。