卡立泊来德对离体肺缺血再灌注损伤的初步实验研究

目的研究选择性钠/氢离子(Na+/H+)交换阻断剂卡立泊来德(Cariporide)对离体大鼠肺缺血/再灌注损伤的防治效果。方法建立离体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。18只SD成年大鼠随机分为3组,每组6只:对照组:采用含5%羟乙基淀粉的KHHB(Krebs-Henseleit hydroxyethylamylopectine buffer)灌注液持续平衡灌注、通气120 min;缺血再灌注组:平衡30 min后,缺血60 min、再灌注30 min;Cariporide组:平衡15 min,给予Cariporide预处理15 min,缺血60 min、再灌注30 min。持续监测并记录肺动脉压(PAP);留取再灌注末灌注液,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;再灌注结束,测肺湿/干重比(W/D);光、电镜观察肺病理学改变。结果缺血再灌注组PAP、MDA含量、SOD活性和W/D较对照组明显升高(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05)。Cariporide能明显减少PAP、MDA和W/D的增加,提高SOD活性(P<0.05),显微、超微结构证实Caripo-ride组肺血管内皮及肺泡上皮的病理变化明显减轻。结论Cariporide能降低离体大鼠肺缺血再灌注损伤。

卡立泊来德对缺血-再灌注大鼠肺组织钠氢交换蛋白-1表达及炎症损伤的影响

目的探讨缺血-再灌注(IR)对肺钠氢交换蛋白-1(NHE-1)表达的影响,及卡立泊来德(cariporide)预处理能否通过抑制NHE-1表达减轻肺组织的炎症损伤。方法 20枚离体灌注的大鼠肺随机分为四组:对照组(C组)、IR组、NHE-1激活剂LiCl预处理组(LiCl组)和cariporide预处理+缺血-再灌注组(CIR组)。再灌注结束后,免疫组化检测肺组织中NHE-1蛋白表达,HE染色观察肺组织病理学改变并行病理评分。结果与C组和CIR组比较,IR组和LiCl组NHE-1表达明显增加(P<0.05),CIR组和C组差异无统计学意义。IR组和LiCl组肺组织病理切片均观察到明显炎症损伤,病理评分明显高于C组和CIR组(P<0.05),CIR组病理评分和C组差异无统计学意义。结论离体的IR大鼠肺组织,NHE-1表达增加,选择性NHE-1抑制剂cariporide能减轻IR导致的肺组织炎症损伤。

卡立泊来德预处理减轻离体大鼠肺热缺血再灌注损伤机理的研究

探讨选择性Na+/H+交换抑制剂卡立泊来德预处理对离体大鼠肺热缺血/再灌注损伤(WI/RI)的保护机理。建立离体大鼠肺灌流模型,30只大鼠随机分为正常对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和卡立泊来德组(CP组),连续监测平均肺动脉压(mean pulmonary artery pressure,MPAP)和气道峰值(peak airway pressure,pAwP);再灌注结束进行右支气管肺泡灌洗,记录支气管肺泡灌洗液(bronchoaveolar lavage fluid,BALF)回收率(BALF re-covery rate,BALFRR),测定其总蛋白和白蛋白含量;取左肺组织测定肺组织含水量(lung water content,LWC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,并进行肺组织病理学观察。与IR组比较,CP组的BALF总蛋白、肺组织MDA含量、LWC以及再灌注后MPAP明显降低,肺组织SOD活性明显增高,组织病理形态学变化明显减轻。缺血前经离体肺动脉灌注卡立泊来德,可能通过抑制离子耦联机制降低再灌注过程细胞内钙超载,减轻钙依赖的黄嘌呤氧化酶途径的氧自由基释放,同时促进内源性抗氧化途径,增强组织抗氧化能力,从而有效减轻肺热缺血再灌注损伤。

脂多糖诱导大鼠急性肺损伤中钠氢交换体的表达

目的:建立脂多糖诱导大鼠急性肺损伤实验模型,观察实验模型中大鼠肺组织上钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平变化情况。方法:40只(250~350g)雄性清洁级SD大鼠随机均分成空白对照组(C组)、脂多糖2h组(L-2h组)、脂多糖4h组(L-4h组)和脂多糖6h组(L-6h组)。监测各组大鼠基本生命体征;光学显微镜下观察大鼠肺组织病理改变;计算急性肺损伤评分和肺组织湿/干重比值;检测支气管肺泡灌洗液中总蛋白、肿瘤坏死因子-α和巨噬细胞炎性蛋白的浓度;测定肺组织髓过氧化物酶活性;免疫组化、RT-PCR和Western Blot检测肺组织钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平。结果:空白对照组大鼠肺组织肺泡结构正常,肺泡腔无渗出物;脂多糖各组大鼠肺组织病理改变明显,肺泡间隔增厚,肺泡腔内可见较多的炎性细胞,肺泡腔内有血性渗出液。和空白对照组比较,脂多糖各组大鼠支气管肺泡灌洗液中总蛋白、肿瘤坏死因子-α和巨噬细胞炎性蛋白的浓度均依次明显增高(FTP=31.67、FTNF-α=275.33、FMIP-2=239.26,均P<0.05);肺组织急性损伤评分、湿/干重比、髓过氧化物酶活性、钠氢交换体1的免疫组化表达水平、钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平均依次明显增高(F=85.27;F=63.92;F=67.35;F=71.39;F=57.38;F=49.56;均P<0.05)。结论:以6mg.kg-1的剂量给予大鼠静脉注射脂多糖后4h就产生了明显的急性肺损伤,表现为大鼠基本生命体征的内毒素休克症状出现;大鼠组织学炎症病理改变;肺组织含水量增加;肺组织及支气管肺泡灌洗液中相关炎性因子增加;与此同时,脂多糖各组大鼠肺组织钠氢交换体1mRNA和蛋白的表达水平也随着急性肺损伤炎症反应的加重而明显增加。

卡立泊来德预处理对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨选择性Na+/H+交换-1拮抗剂卡立泊来德预处理对兔肺缺血再灌注损伤的作用。方法将24只新西兰大白兔随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、低钾右旋糖酐组(LPD组)和卡立泊来德组(HOE组),每组6只。麻醉后开胸,游离左肺门绕过阻断带,分别于30min内经静脉泵入等量生理盐水、LPD液或含卡立泊来德的新型器官保护液,除Sham组观察180 min外,余3组均结扎左肺门60 min后,再开放观察120min,建立在体兔肺缺血再灌注损伤模型。于结扎前(即缺血期前),开放即刻(即再灌注即刻),再灌注后15、30、60、90和120min分别抽取股动脉血进行血气分析。再灌注结束后取左肺组织测定肺含水量(lung water content,LWC)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)活性、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量和钠氢转运体-1(natrium hydrogen exchanger-1,NHE1)表达量,并进行肺组织病理学观察。结果同IR组相比,LPD组和HOE组氧合指数(再灌注开始后)和肺组织SOD活性升高,肺组织LWC、MDA含量、IL-6含量、TNF-α含量、NHE1表达量(P<0.05)和肺组织病理学评分降低(P<0.008);除肺组织病理学评分外(P>0.008),HOE组余各项指标均较LPD组改善明显(P<0.05),但仍未恢复至Sham组水平(P<0.05)。结论卡立泊来德可通过减少NHE1蛋白表达以减轻缺血再灌注期间氧化应激和炎症反应,并同时增强组织抗氧化能力,从而有效减轻在体兔肺缺血再灌注损伤。