NaI裂解法提取微量全血DNA

人全血DNA提取,常用的方法是溶血剂裂解红细胞后,用蛋白酶K、SDS等消化蛋白质,随后用酚、氯仿、异戊醇等有机试剂抽提纯化DNA,此类方法取血量多,且酚等有机试剂对人体有害;重蒸酚预处理过程复杂。我们参照文献报道的方法并加以改良,摸索出一种适于限制性片段长度多态性(RFLP)分析的DNA制备法,现介绍如下。 1 材料和方法 1.1 血样品 EDTA·K_3抗凝全血取自临床确诊脑梗塞病人60例,非脑梗塞病人35例,各采血0.5ml。 1.2 试剂 1.2.1 DNA制备试剂裂解液:0.32mol/L蔗糖,1% TritonX-100,5 mmol/LMgCl_2,10mmol/L Tris-HCl(pH 7.5)。