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Therapeutic Potential of Naja Naja Atra Venom in A Rat Model of Diabetic Nephropathy 被引量:9
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作者 DAI Gui Li HE Jing Kang +3 位作者 XIE Yan HAN Rong QIN Zheng Hong ZHU Lu Jia 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2012年第6期630-638,共9页
Objective To study the protective effects of naja naja atra venom (NNAV) in a rat model of diabetic nephropathy (DN). Methods The rat diabetes model was induced by intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ... Objective To study the protective effects of naja naja atra venom (NNAV) in a rat model of diabetic nephropathy (DN). Methods The rat diabetes model was induced by intraperitoneal injection of streptozotocin (STZ). Thirty-two model rats were randomly divided into one DN group (n=8) and three treatment groups (n=8 each) that received NNAV at doses of 30, 90, or 270 I^g/(ks.day) via oral gavage, another eight rats as normal controls. After 12 weeks, all rats were sacrificed and the changes in serum and urine biological index levels were determined by colorimetric assay. Microalbumin (mALB), N-acetyl-13- glucosaminidase (NAG) and cystatin C (CysC) concentrations were measured by ELISA. Renal tissues were sliced for pathological and immunohistochemical observations. Results Comparied with the DN group, serum glucose was decreased by 31.04%, total cholesterol 21.96%, triglyceride 23.78%, serum creatinine 19.83%, blood urea nitrogen 31.28%, urinary protein excretion 45.42%, mALB 10.42%, NAG 20.65%, CysC 19.57%, whereas albumin increased by 5.55%, high-density lipoprotein-cholesterol 59.09%, creatinine clearance 19.05% in the treatment group by NNAV administration at dose of 90 μg/(kg-day). NNAV also reduced the levels of malondialdehyde in serum (22.56%) and kidney tissue (9.79%), and increased superoxide dismutase concentration in serum (15%) and decreased it in renal tissue (8.85%). In addition, under light microscopy kidney structure was improved and glomerular hypertrophy decreased by 8.29%. As shown by immunohistochemistry, NNAV inhibited transforming growth factorl by 6.70% and nuclear actor-KB by 5.15%. 展开更多
关键词 Diabetic nephropathy naja naja atra venom Renal function
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浙江眼镜蛇(Naja naja atra)蛇毒镇痛多肽的分离纯化及其性质的研究 被引量:8
2
作者 王春晓 李新宇 +1 位作者 王起振 刘岩峰 《药物生物技术》 CAS CSCD 2003年第3期159-164,共6页
研究浙江眼镜蛇 (Najanajaatra)蛇毒的镇痛活性组分 ,为寻找镇痛效果好 ,而无成瘾性的新型镇痛药奠定基础。采用CM Sephadex离子交换色谱和SephadexG 5 0凝胶过滤色谱对浙江产眼镜蛇蛇毒中的镇痛活性组分进行分离纯化。采用PAGE IEF及H... 研究浙江眼镜蛇 (Najanajaatra)蛇毒的镇痛活性组分 ,为寻找镇痛效果好 ,而无成瘾性的新型镇痛药奠定基础。采用CM Sephadex离子交换色谱和SephadexG 5 0凝胶过滤色谱对浙江产眼镜蛇蛇毒中的镇痛活性组分进行分离纯化。采用PAGE IEF及HPLC等实验方法对产物纯度进行鉴定。采用SDS PAGE法和HPLC法测定产物的分子质量 ,用IEF法测定产物的等电点 ,用小鼠热板法与醋酸扭体法考察产物的镇痛活性。结果表明眼镜蛇毒经 3次柱色谱后 ,产物AAP经鉴定为单一组分。AAP经SDS PAGE法和HPLC法测定的分子质量分别是 7 2 8Mr 和 7 2 5Mr,等电点是 9 5 8。AAP的痛阈提高百分率和扭体抑制率分别为 91 3% ,77 2 %。眼镜蛇毒经 展开更多
关键词 眼镜蛇毒 镇痛多肽 理化性质 药理作用
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中华眼镜蛇(Naja naja atra)毒细胞毒素对动物急性及长期毒性研究 被引量:3
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作者 薛玲 刘广芬 +1 位作者 王晴川 李克华 《福建医学院学报》 1996年第2期109-113,共5页
目的探讨中华眼镜蛇毒中分离纯化的细胞毒素(ChineseCobroVenom-Cytotoxin,CV-CTX)对动物急性及长期毒性的作用。方法急性毒性:小鼠50只,尾静脉一次注入不同剂量的CV-CTX注射液,观察7... 目的探讨中华眼镜蛇毒中分离纯化的细胞毒素(ChineseCobroVenom-Cytotoxin,CV-CTX)对动物急性及长期毒性的作用。方法急性毒性:小鼠50只,尾静脉一次注入不同剂量的CV-CTX注射液,观察7d内死亡率。犬5只,戊巴比妥钠静脉麻醉后,分别静脉恒速注入不同剂量的CV-CTX,观察5h内血压、心电图及呼吸的变化。长期毒性:大鼠160只分别腹腔注射生理盐水20ml、CV-CTX250,500,1000μg/kg·d-1,连续40d。结果(1)小鼠急性LD50及其95%可信限为1158.7(1070~1254.6)μg/kg,中毒症状呈匍伏、毛松、懒动直到心跳停止,解剖未见重要脏器(心、肺、肝、脾、肾)明显变化。(2)犬静脉恒速注入100μg/kg间隔1h,共5次,呼吸、血压、心电图未见明显变化,一次超过500μg/kg,可使心律不齐而停搏,呼吸停止。(3)大鼠长期毒性实验,3个剂量组,连续用药40d,无一死亡,肝、肾功能及血液生化均无明显影响。病理检查高剂量组部分动物肝脏中度浊肿及水样变性和散在点状坏死,肺有散在性出血;中剂量组肝脏轻度浊肿,偶伴有水样变性,个别动物有小点状坏死,肺有点状出? 展开更多
关键词 中华眼镜蛇 蛇毒 细胞毒素 LD50 长期毒性试验
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线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分诱导KG1a细胞凋亡中的作用 被引量:12
4
作者 贺艳杰 李玉华 +3 位作者 卢会芳 黄宇贤 黄睿 郭坤元 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期356-360,共5页
目的研究线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)诱导KG1a细胞凋亡过程中的作用。方法以人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞为研究对象,采用Annexin V-FITC/PI荧光染色法进行凋亡细胞的形态... 目的研究线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)诱导KG1a细胞凋亡过程中的作用。方法以人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞为研究对象,采用Annexin V-FITC/PI荧光染色法进行凋亡细胞的形态学观察,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的活性,ELISA法检测胞质内细胞色素C的表达水平,流式细胞仪分析TRAIL死亡受体(DR4、DR5)和诱骗受体(DcR1、DcR2)的改变。结果 NNAVC作用后,荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞,细胞凋亡率随药物作用浓度的增加而升高;Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3蛋白被激活,胞质内细胞色素C的表达明显增加;流式细胞仪检测结果显示,NNAVC具有降低死亡受体DR4和诱骗受体DcR1的表达率,而提高DR5和DcR2的表达水平的作用。结论线粒体凋亡通路和死亡受体通路均参与NNAVC诱导KG1a细胞凋亡的过程,这可能是NNAVC发挥抗白血病作用的机制之一。 展开更多
关键词 白血病 中华眼镜蛇毒 KG1a细胞 线粒体通路 死亡受体通路 凋亡
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中华眼镜蛇蛇毒组分C诱导白血病细胞凋亡作用的研究 被引量:15
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作者 郝玉书 应红光 +2 位作者 林振桃 管锦霞 张广森 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期272-275,共4页
研究眼镜蛇蛇毒组分C诱导白血病细胞凋亡的作用及机制。方法:应用光学显微镜、透射电镜、脱氧核糖核酸( DNA)电泳、流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察白血病细胞经过眼镜蛇蛇毒组分C处理后,形态学... 研究眼镜蛇蛇毒组分C诱导白血病细胞凋亡的作用及机制。方法:应用光学显微镜、透射电镜、脱氧核糖核酸( DNA)电泳、流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,观察白血病细胞经过眼镜蛇蛇毒组分C处理后,形态学、生物化学及BcI-2/Bax基因表达水平的变化。结果:眼镜蛇蛇毒组分C能诱导人粒细胞白血病细胞系(HL60)发生凋亡形态学和生物化学变化;流式细胞议分析发现眼镜蛇蛇毒组分C能使一定比例的人粒单细胞白血病细胞系(J6-1)、人红白血病细胞系(K562)、HL60。细胞及取自患者骨髓的白血病细胞发生凋亡,而且凋亡率随蛇毒浓度的增高而增加;RT-PCR方法检测发现眼镜蛇蛇毒组分C能使HL60细胞Bcl-2基因的表达下调,而Bax变化不明显。结论:眼镜蛇蛇毒组分C能诱导白血病细胞发生凋亡,此作用与Bcl-2基因的表达下调有关。 展开更多
关键词 眼镜蛇蛇毒 白血病 细胞凋亡 实验研究
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眼镜蛇毒素抗关节炎作用实验研究 被引量:9
6
作者 张黎明 杨光 陈志龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期597-597,共1页
关键词 眼镜蛇毒素 抗关节炎作用 实验研究 大鼠
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舟山眼镜蛇毒细胞毒素的分离纯化及其体外抗肿瘤活性 被引量:21
7
作者 许云禄 杨丽娟 刘广芬 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2003年第3期127-130,共4页
目的从眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 F(CTX F)并鉴定其活性。方法应用凝胶过滤、离子交换柱色谱及疏水柱色谱等方法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化CTX F ,以SRB法观察CTX F对体外培养癌细胞的杀伤作用。结果眼镜蛇毒粗毒经凝胶过滤获得 4个蛋... 目的从眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 F(CTX F)并鉴定其活性。方法应用凝胶过滤、离子交换柱色谱及疏水柱色谱等方法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化CTX F ,以SRB法观察CTX F对体外培养癌细胞的杀伤作用。结果眼镜蛇毒粗毒经凝胶过滤获得 4个蛋白峰 ,将CTX所在第Ⅳ峰用阳离子交换柱色谱获A、B、C、D、E、F和G等7个组分 ,其中E、F和G具CTX活性 ,将F组分再经凝胶过滤和疏水色谱进一步纯化得不含磷酯酶A2 (PLA2 )的CTX纯品 ,暂定名为CTX F ,它对多种癌细胞株有杀伤作用。结论应用凝胶过滤、离子交换和疏水色谱等方法可从眼镜蛇毒中获得不含PLA2 的CTX 。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒 细胞毒素 凝胶过滤 离子交换色谱 疏水色谱 抗肿瘤
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分离纯化眼镜蛇蛇毒因子的一种经济方法 被引量:6
8
作者 任先达 黄守坚 +1 位作者 吴楚坤 孙家钧 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期271-275,共5页
将较大批量的眼镜蛇粗毒依次通过SephadexG75,DEAE-celluloseDE52和Bio-GelP200柱层析可高效地分离纯化眼镜蛇蛇毒因子(CVF),50g粗毒可制备电泳纯CVF960mg,产率大大高于既... 将较大批量的眼镜蛇粗毒依次通过SephadexG75,DEAE-celluloseDE52和Bio-GelP200柱层析可高效地分离纯化眼镜蛇蛇毒因子(CVF),50g粗毒可制备电泳纯CVF960mg,产率大大高于既往文献报道,整个制备过程仅需时数日。通过SDS聚内烯酰胺凝胶电泳测得其分子量为226000,其溶血活性从抗补体活性均与文献报道相近。所以,本实为一种经济,高效的实验室大量制备CVF的方法。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒液类 中华眼镜蛇 补体 色谱法
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中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子生物活性和理化性质测定 被引量:5
9
作者 董跃伟 徐天瑞 +1 位作者 熊郁良 徐康森 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2000年第2期59-62,共4页
目的:控制中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子产品质量,研究其理化性质及生物学活性的定性和定量。方法:通过离子交换色谱、凝胶过滤及FPLC色谱分高纯化得到中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子,按国家新药审批有关要求对其进行了SDS-PAGE电泳,N... 目的:控制中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子产品质量,研究其理化性质及生物学活性的定性和定量。方法:通过离子交换色谱、凝胶过滤及FPLC色谱分高纯化得到中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子,按国家新药审批有关要求对其进行了SDS-PAGE电泳,N端蛋白质序列规定,HPLC色谱分析,UV光谱图谱扫描,并利用PC12细胞培养法和鸡胚背根神经节培养法检测其生物活性。结果:电泳为一条带,亚基分子量为13500,N端蛋白质序列测定后确证为神经生长因子(NGF),HPLC为单峰,相对百分含量为95%以上,279.6nm处呈现出蛋白质样特征吸收峰。生物活性测定为,PC12细胞培养法灵敏度可达1ng/ml,鸡胚背根神经节培养法需30ng/ml的浓度梯度才能在神经节上有所反应。结论:此实验样品为具有较高生物活性的高纯度NGF多肽。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇毒 神经生长因子 鉴定 理化性质测定
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广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达 被引量:4
10
作者 宋慧 张学荣 +2 位作者 周元聪 江涛 舒雨雁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期265-270,共6页
目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL... 目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。 展开更多
关键词 眼镜蛇 蛇毒 神经生长因子 蛋白表达
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中华眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞株的影响 被引量:2
11
作者 李红良 任先达 +2 位作者 罗英儒 叶春玲 张海伟 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2001年第6期1-5,共5页
目的 :了解中华眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞的影响。方法 :采用体外细胞培养的方法 ,观察蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞及人胚肺成纤维细胞的细胞毒作用 ,对细胞生长及分裂数的影响。结果 :蛇毒灌胃后的兔血清能够明显抑... 目的 :了解中华眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞的影响。方法 :采用体外细胞培养的方法 ,观察蛇毒灌胃后的兔血清对人肺腺癌细胞及人胚肺成纤维细胞的细胞毒作用 ,对细胞生长及分裂数的影响。结果 :蛇毒灌胃后的兔血清能够明显抑制肺腺癌细胞的生长 ,且其抑制效应随剂量的增加而增加 ,但该血清对正常人胚肺成纤维细胞的生长却没有明显影响。结论 :中华眼镜蛇毒灌胃后的兔血清对肺腺癌细胞的生长有明显的抑制作用 ,且有高度的选择性。 展开更多
关键词 抗癌活性 细胞分裂数 肺腺癌 中华眼镜蛇毒 兔血清 灌胃 癌细胞 治疗
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眼镜蛇毒素抗类风湿性关节炎实验研究 被引量:10
12
作者 张黎明 陈志龙 +1 位作者 赵杰 孙结 《药学实践杂志》 CAS 2000年第4期209-211,共3页
目的 :观察眼镜蛇 (Najanaja)毒素的抗炎作用。方法 :采用大鼠佐剂性关节炎和大鼠棉球肉芽肿模型。结果 :眼镜蛇毒素对佐剂性关节炎模型大鼠的踝关节肿胀程度无明显影响 ,但使大鼠棉球肉芽肿重量显著减轻 (P <0 0 5 )。结论 :眼镜... 目的 :观察眼镜蛇 (Najanaja)毒素的抗炎作用。方法 :采用大鼠佐剂性关节炎和大鼠棉球肉芽肿模型。结果 :眼镜蛇毒素对佐剂性关节炎模型大鼠的踝关节肿胀程度无明显影响 ,但使大鼠棉球肉芽肿重量显著减轻 (P <0 0 5 )。结论 :眼镜蛇毒素对关节滑膜增生可能有一定保护或逆转功能。 展开更多
关键词 眼镜蛇(najanaja)毒素 大鼠 类风湿性关节炎
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中华眼镜蛇毒组分F的体外抗血管生成活性研究 被引量:3
13
作者 刘晓颖 余清声 +1 位作者 覃媛 黄劭 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2005年第5期273-275,共3页
目的研究中华眼镜蛇毒组分F对血管内皮细胞黏附功能的抑制作用和体外的抗血管生成活性。方法MTT快速测定法测定组分F对原代培养的血管内皮细胞对纤维蛋白原(Fg)、纤连蛋白(Fn)、Matrigel的黏附作用的影响;采用平面拟毛细血管生成培养法... 目的研究中华眼镜蛇毒组分F对血管内皮细胞黏附功能的抑制作用和体外的抗血管生成活性。方法MTT快速测定法测定组分F对原代培养的血管内皮细胞对纤维蛋白原(Fg)、纤连蛋白(Fn)、Matrigel的黏附作用的影响;采用平面拟毛细血管生成培养法,观察组分F对血管生成的抑制效应。结果组分F可抑制血管内皮细胞的黏附功能,对细胞黏附Fn、Fg和Matrigel 3种物质的作用从1.2μg/ml浓度起即有抑制效应(P<0.05),且均呈浓度依赖性,组分F对细胞黏附Fg和Matrigel的抑制作用较其对Fn的作用强(P<0.05);组分F可抑制内皮细胞在培养基质中生成血管样网状结构的反应,并且随浓度的不同抑制程度有明显不同。结论中华眼镜蛇毒组分F具有体外抗血管生成活性。 展开更多
关键词 蛇毒 中华眼镜蛇毒 体外 血管生成 抑制
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中华眼镜蛇毒对K562和难治性白血病细胞体外作用的研究 被引量:4
14
作者 吴穗晶 杜欣 +6 位作者 蒋文玲 张建军 周茂华 黄志新 耿素霞 林伟 黄梓伦 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第3期428-430,共3页
目的:探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Actra Venom,NNAV)抗白血病作用。方法:应用不同剂量NNAV和阿霉素(THP)于人红白血病细胞株(K562)和难治性白血病细胞株,观察NNAV直接或协同THP的细胞毒性及采用流式细胞仪进行凋亡检测。结果:NNAV对K56... 目的:探讨中华眼镜蛇毒(Naja Naja Actra Venom,NNAV)抗白血病作用。方法:应用不同剂量NNAV和阿霉素(THP)于人红白血病细胞株(K562)和难治性白血病细胞株,观察NNAV直接或协同THP的细胞毒性及采用流式细胞仪进行凋亡检测。结果:NNAV对K562有明显的细胞毒及促进细胞凋亡作用,并剂量依赖地增强THP杀伤作用。但对难治性白血病细胞株作用不一:单用NNAV有细胞毒性25%(5/20);单用无效联合THP有效55%(11/20),以NNAV 100μg/ml+THP 5μg/ml作用最强;凋亡百分率增多60%(12/20)。临床对比研究结果,体外实验THP及NNAV无效的9例病人,含蒽环类全部无效(其他机制药物有效3例);THP及NNAV有效的5名病人,含蒽环类缓解2例,1例其它药物缓解;双相吻合率超过60%。结论:NNAV体外对难治性白血病细胞株有一定杀伤作用,和适当剂量THP合用有效率及杀伤作用明显增加,提示蛇毒中可能含有特殊抗难治性白血病的组分。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇毒 难治性白血病 人红白血病细胞株
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眼镜蛇毒组分抑制人神经胶质瘤U251细胞增殖及其机制研究 被引量:4
15
作者 卢康荣 孔天翰 董伟华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1309-1314,共6页
目的:探讨眼镜蛇毒组分对人神经胶质瘤U251细胞增殖抑制作用及其机制。方法:采用MTT法比较各种蛇毒组分对U251细胞增殖的抑制效果并筛选出高效组分,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,激光共聚焦显微镜和电子显微镜观察蛇毒组分作用U... 目的:探讨眼镜蛇毒组分对人神经胶质瘤U251细胞增殖抑制作用及其机制。方法:采用MTT法比较各种蛇毒组分对U251细胞增殖的抑制效果并筛选出高效组分,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,激光共聚焦显微镜和电子显微镜观察蛇毒组分作用U251细胞后的形态学变化。结果:11种眼镜蛇毒组分对体外培养的神经胶质瘤细胞U251均有不同程度的生长抑制作用,其中组分KDⅡ-3对肿瘤细f胞的抑制作用呈现剂量和时间依赖性。不同浓度(1、3.75、7.5、15 mg/L)KDⅡ-3作用细胞24 h后,其凋亡率分别为13.3%、17.7%、20.0%、22.4%,且可见到"亚G1期"峰。KDⅡ-3还将U251的细胞周期阻滞在G0/G1期。7.5 mg/L KDⅡ-3作用U251细胞24h后激光共聚焦显微镜观察显示细胞膜皱缩,染色质浓缩、碎裂,透射电镜观察显示细胞核固缩,染色质凝聚。结论:眼镜蛇毒组分KDⅡ-3可抑制神经胶质瘤细胞U251的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇毒 神经胶质瘤 细胞增殖 凋亡
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中华眼镜蛇毒神经生长因子的研究 被引量:6
16
作者 雷丹青 李晓飚 舒雨雁 《广西科学》 CAS 1997年第1期48-52,56,共6页
采用CM-SepharoseCL-6B和SephosilC8以及HPLC层析方法,自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子(NGF),此NGF经8d鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经HPLC及... 采用CM-SepharoseCL-6B和SephosilC8以及HPLC层析方法,自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子(NGF),此NGF经8d鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经HPLC及聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组成,经SDSPAGE及HPLC测定分子量分别为24.1KD和24.9KD,等电聚焦电泳测得pI为8.2,氨基酸组分分析表明NGF含酸性氨基酸较少,通过125|标记NGF测定出NGF在生物体内主要分布于肾、肺。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇毒 神经生长因子 电泳 蛇毒
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中华眼镜蛇毒活性组分抑血管内皮细胞增殖和黏附实验研究 被引量:5
17
作者 刘晓颖 余清声 覃嫒 《血栓与止血学》 2004年第1期19-21,共3页
目的:研究眼镜蛇毒在抗血管生成方面的生物活性。方法:采用Sephadex阳离子交换柱和分子筛分离中华眼镜蛇毒原毒,以MTT法评价和筛选分离各蛋白峰对培养内皮细胞的抑生长活性;MTT快速测定法测定活性峰对内皮细胞与纤维蛋白原(Fbg)、纤连蛋... 目的:研究眼镜蛇毒在抗血管生成方面的生物活性。方法:采用Sephadex阳离子交换柱和分子筛分离中华眼镜蛇毒原毒,以MTT法评价和筛选分离各蛋白峰对培养内皮细胞的抑生长活性;MTT快速测定法测定活性峰对内皮细胞与纤维蛋白原(Fbg)、纤连蛋白(Fn)、Matrigel的黏附作用的影响。结果:经两步分离后从中华眼镜蛇毒中获得一可特异性抑制内皮细胞生长的活性蛋白峰,该活性组分可抑制内皮细胞的黏附功能,对细胞黏附Fn、Fbg和Matrigel等3种物质的作用从1.2μg/ml浓度起即有抑制效应(P<0.05),且均呈浓度依赖性;组分对细胞黏附Fbg和Hatrigel的抑制作用较其对Fn的作用强(P<0.05)。结论;眼镜蛇毒中可能含有可抑制血管生成的活性物质,在抗血管生成方面有良好的研究价值。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇 毒活性组分 血管内皮细胞 细胞增殖 黏附实验 细胞培养
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中华眼镜蛇毒膜毒素诱导膀胱癌细胞凋亡的检测 被引量:3
18
作者 颜汝平 王剑松 +3 位作者 李翀 谢蜀生 王婉瑜 徐鸿毅 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2006年第5期255-258,共4页
目的研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT-12)诱导膀胱癌细胞的凋亡作用,比较检测凋亡的几种方法。方法MT-12作用于体外培养的人膀胱癌(BIU-87)细胞,HE染色、Hoechest33342荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片... 目的研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT-12)诱导膀胱癌细胞的凋亡作用,比较检测凋亡的几种方法。方法MT-12作用于体外培养的人膀胱癌(BIU-87)细胞,HE染色、Hoechest33342荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测凋亡率。结果3种形态学检测方法均能观察到细胞凋亡的形态学变化。3μg/mLMT作用2、4、8、12、24h和36h,双染法流式细胞术检测的细胞凋亡率分别是46.94%、51.2%、28.85%、20.43%、6.03%和5.19%,阴性对照组凋亡率为0.77%。DNA电泳未能检测到细胞凋亡的DNAladder。结论MT-12能诱导体外培养的BIU-87细胞凋亡,且具有时间依赖性。透射电镜观察凋亡细胞的形态特征最可靠。AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡,其特异性、敏感性、重复性和准确性高。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 膜毒素 凋亡
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眼镜蛇毒中降压因子的提取及生物活性的研究 被引量:2
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作者 韦世秀 刘成军 +2 位作者 万瑞融 李牡艳 吴华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期37-41,共5页
目的:从广西眼镜蛇蛇毒中分离纯化血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI),命名为降压因子(hypotensive factor,HF),并测定其生物活性。方法:采用Sephacryl S-100凝胶过滤,CM Sepharose F.F.离子交换层... 目的:从广西眼镜蛇蛇毒中分离纯化血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI),命名为降压因子(hypotensive factor,HF),并测定其生物活性。方法:采用Sephacryl S-100凝胶过滤,CM Sepharose F.F.离子交换层析分离纯化HF,高效液相鉴定纯度,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定其分子量,紫外分光光度法测定HF对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制活性。用离体兔子十二指肠平滑肌测定HF增强缓激肽(bradykinin,BK)的效应。结果:纯化的广西眼镜蛇蛇毒HF经SDS-PAGE检测显示单一条带,测得其相对分子量约为8.2kDa,由12种氨基酸组成,蛋白回收率为5.70%。HF对ACE有明显的抑制作用,其抑制作用与剂量呈正相关。IC50为1.02μg/ml。HF能增强BK对离体兔子十二指肠平滑肌的收缩效应。结论:成功地从广西眼镜蛇蛇毒中纯化出降血压成分。该成分与血管紧张素转换酶抑制剂作用相似,对血管紧张素转换酶有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇 蛇毒 分离纯化 血管紧张素转换酶抑制剂 降压因子
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眼镜蛇毒组份在动物体内外的抗氧化作用研究 被引量:1
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作者 侯力强 何泉华 +3 位作者 赵路宁 孔天翰 管锦霞 江中喜 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期845-848,共4页
目的 :以大鼠组织匀浆及红细胞为材料 ,研究中华眼镜蛇毒组份F和H的抗脂质过氧化作用 ;探讨组份F/H对小鼠体内抗氧化酶活性的影响。方法 :以MDA为指标 ,观察组份F/H对组织匀浆体外脂质过氧化及红细胞自氧化溶血体系脂质过氧化产物MDA生... 目的 :以大鼠组织匀浆及红细胞为材料 ,研究中华眼镜蛇毒组份F和H的抗脂质过氧化作用 ;探讨组份F/H对小鼠体内抗氧化酶活性的影响。方法 :以MDA为指标 ,观察组份F/H对组织匀浆体外脂质过氧化及红细胞自氧化溶血体系脂质过氧化产物MDA生成量的影响 ;观察组份F/H对邻苯三酚自氧化产生的O ·2 及Cu2 + VitC自由基产生系统产生的·OH的清除作用 ;连续 15天腹腔注射组份F/H ,测定小鼠体内SOD、CAT的活性。结果 :组份F/H均能抑制红细胞自氧化 ,显著减少红细胞自氧化过程中MDA的含量 ;组份F/H均可抑制正常大鼠心、肝、脑组织匀浆体外过氧化脂质生成 ,并能对抗Fe2 + Cys激发的过氧化脂质生成增加 ;组份F/H均能清除超氧阴离子 (O ·2 )和羟自由基 (·OH) ,组份H的作用更强 ;组份F/H均能不同程度地增加小鼠体内多种抗氧化酶的含量。结论 :组份F和H具有一定的抗氧化作用 ,能直接清除活性氧自由基 ,提高SOD的活性。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒 抗氧化作用 抗氧化酶 氧自由基 脂质过氧化
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