超高效液相色谱-串联高分辨率质谱法同时测定猪毛发中12种吩噻嗪类药物的残留量

考虑到毛发样品取样方便、前处理简单,可实现动物源性农产品中违禁药物的持续动态监测,因此进行了题示研究。猪毛发样品于-40℃冷冻,清洗,氮气吹干,剪成小段,置于液氮冷冻研磨器中,设置撞子振荡频率至12次·s^(-1),研磨时间至3.5 min,稳定时间至5 min,将样品研碎成末。分取80 mg,加入4μL 1000μg·L^(-1)混合内标溶液以及10 mL含0.1%(体积分数,下同)甲酸的乙腈溶液,超声提取5 min,于4℃离心3 min。上清液过0.45μm滤膜,将全部滤液过Oasis PRIME HLB固相萃取柱。收集流出液,分取5 mL,于60℃氮吹至干。加入200μL甲醇复溶,于4℃离心1 min,上清液按照优化的仪器工作条件测定。在色谱分析中,以Waters Acquity BEH C_(18)色谱柱为固定相,不同体积比的0.1%甲酸溶液和甲醇的混合溶液为流动性进行梯度洗脱分离。在串联质谱分析中,以加热电喷雾离子源正离子模式电离,以母离子提取峰面积进行内标法定量,子离子的精确质量数进行定性。结果显示:氯丙嗪、氯丙嗪亚砜、异丙嗪、丙酰丙嗪、硫利达嗪、三氟拉嗪的质量浓度在1~200μg·L^(-1)内,异丙嗪亚砜、甲苯噻嗪、乙酰丙嗪、奋乃静、氟奋乃静、癸氟奋乃静在2~200μg·L^(-1)内和对应的峰面积比呈线性关系,检出限(3S/N)为2~4μg·kg^(-1)。按照标准加入法进行回收试验,回收率为84.6%~107%,测定值的相对标准偏差(n=5)为1.2%~13%。

利用高分辨率液相色谱串联质谱方法分析M1、M2型巨噬细胞的甘油三酯脂质谱组成

目的通过高分辨率液相色谱串联质谱方法分析M1、M2型巨噬细胞的甘油三酯脂质谱组成,揭示脂质代谢尤其是甘油三酯在巨噬细胞极化过程中的作用。方法采用小鼠骨髓细胞来源的巨噬细胞极化得到M1、M2型巨噬细胞,实时定量聚合酶链反应方法检测其极化标志基因的表达,使用高分辨率液相色谱串联质谱方法检测M0、M1、M2型巨噬细胞的甘油三酯脂质谱,对比分析不同极化状态巨噬细胞之间的差异。结果共检测到61种甘油三酯脂质分子。甘油三酯总体水平在M1型巨噬细胞中显著上调,而在M2型巨噬细胞中显著下调。在M0、M1、M2型巨噬细胞中检测到的甘油三酯分子绝大多数是长链甘油三酯。长链不饱和甘油三酯在M1型巨噬细胞中显著上调,在M2型巨噬细胞中显著下调。结论巨噬细胞极化导致其甘油三酯脂质谱组成显著改变。

液相色谱-串联高分辨质谱法测定土壤和沉积物中17种全氟化合物

建立了超声提取-固相萃取/液相色谱-串联高分辨质谱同时测定土壤和沉积物中17种全氟化合物的检测方法。通过设计提取溶剂、超声温度、超声时间和超声次数对全氟化合物提取效率的正交试验,确定最优前处理条件为:样品过80目筛,在30℃下用甲醇超声提取30min,分离上清液并浓缩至1~2mL,加纯水稀释至200mL后过PWAX固相萃取柱净化,再用0.05%氨水-甲醇溶液进行洗脱,洗脱液浓缩定容后用AcclaimTM VANQUISH C18柱以2mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相进行梯度分离,高分辨质谱全扫描定量分析。结果表明,17种全氟化合物在1.0~20.0μg/L质量浓度范围内线性良好,相关系数r在0.997~0.9999范围内,方法检出限为0.1~0.3μg/kg,测定下限为0.4~1.2μg/kg,样品的加标回收率为96.8%~127%,相对标准偏差为0.8%~9.1%。该方法具有高效、灵敏、准确等优点,可同时监测土壤和沉积物中17种全氟化合物。

基于脂质组学探究辐照对冷鲜乳鸽风味的影响

采用顶空固相萃取-气相色谱-质谱法和超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨质谱分析辐照乳鸽中挥发性物质及脂类代谢物的变化,探究辐照乳鸽特征性风味物质并推测其可能的主要风味前体物质。结果表明:烃类和醛类物质是乳鸽中主要挥发性成分,乳鸽中共10种关键风味成分,其中壬醛、(E)-2-己烯醛、癸醛、己醛、(E)-2-辛烯醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、辛醛、2,4-癸二烯醛、1-辛烯-3-醇物质来源于脂质氧化,壬醛、癸醛、己醛等醛类可能是由油酸和亚油酸分解生成。脂肪酸、酰基肉碱(AcylCarnitine)、缩醛磷脂酰乙醇胺(plasmenylPE)、葡糖鞘氨醇神经酰胺(GlcCer_NDS)、酰基葡糖基二神经酰胺(AcyGlcADG)、溶血磷脂酰胆碱(lysoPC)、硬脂酰基鞘脂(Cer_BS)、溶血磷脂丝氨酸(lysoPS)是差异显著的脂质亚类。30种变量投影重要性值较高的脂质分子中,6种脂质分子的脂肪酸组成中含有油酸(C_(18:1)),10种脂质分子含有亚油酸(C_(18:2)),油酸和亚油酸作为形成乳鸽特征性风味物质的前体物质,可能由这16种脂质分子降解生成。

基于液相色谱-高分辨质谱非靶向筛查技术的食物中毒应急检测

目的对1起食物中毒样品中可疑致病因子进行应急筛查,并定性、定量测定。方法可疑物样品经提取净化处理后,采用液相色谱-高分辨质谱联用技术,基于质谱一级全扫描数据和二级扫描数据对样品进行筛查,发现可疑化合物后,利用标准物质进行确证,外标法定量测定。结果利用气相色谱质谱联用仪扫描得到SCAN图谱,通过NIST标准谱库定性检索,未见其他可疑致病化合物。液相色谱-高分辨质谱筛查技术在自制酱料、制成菜和病例呕吐物中检出可疑化合物为蟾蜍色胺,用液相色谱-串联三重四极杆质谱技术定量检测,该3类样品中蟾蜍色胺质量浓度分别为56.7、49.4、0.59μg/kg。结论液相色谱-高分辨质谱非靶向筛查技术可用于应急样品中可疑化合物的发现和确证,为现场处置提供实验室证据支持。

基于超高效液相色谱-串联高分辨质谱的血清代谢组学用于探索区分结直肠腺瘤和结直肠癌的生物标志物

结直肠腺瘤(Colorectal adenoma,CA)发展成为结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一个相对漫长而隐匿的过程,然而,目前仍缺乏微创且可靠的生物标志物来区分CA和CRC患者。该文采用超高效液相色谱-串联高分辨质谱(UHPLC-HRMS)技术结合多元统计分析方法对64例CA患者和84例CRC患者的血清样本进行代谢组学比较分析,结合P<0.05和倍数变化>1.50或<0.67筛选两者的血清差异代谢物,并通过受试者工作特征曲线(ROC)分析考察其对CA和CRC的鉴别能力。同时利用差异代谢物的通路及富集分析初步探索CA癌变的代谢机制。结果表明,两组的血清代谢谱存在差异,据此筛选并鉴定获得66种组间差异代谢物,主要涉及不饱和脂肪酸的生物合成、嘌呤代谢、亚油酸代谢,提示其可能与CA癌变有关。此外,PC 36∶3、腺嘌呤、鞘氨醇、PC 18∶0、PC 20∶4标志物组合的ROC曲线下面积为0.941,对CA和CRC表现出良好的判别效能,可为CRC的临床早期预防提供有价值的参考。

人参种植土壤中10种农药残留的高分辨质谱筛查方法

建立了一种能同时检测参地土壤中10种农药残留的超高液相色谱-高分辨质谱联用方法。土样加入乙腈提取,N-丙基乙二胺(PSA)萃取净化,C18柱分离富集得到待测液,经Accucore aQ色谱柱洗脱后,通过超高液相色谱-高分辨质谱进行快速筛查分析。检测结果表明,在0.01~1mg/L浓度范围内,10种农药均具有良好的线性相关性(r>0.9986),定量限为10μg/kg,RSD在2.3%~8.9%之间,平均回收率为71.0%~109.6%,符合要求。本方法灵敏度和准确度较好,可用于参地土壤环境中这10种农药残留量快速筛查。同时可以降低前处理时间,提高工作效率。

缴获物中2-(2-氯苯基)-2-硝基环己酮的检验鉴定

本文通过高分辨质谱–液相色谱质谱联用(UHPLC-HRMS)、核磁共振(NMR)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)等多种技术,对近期缴获的疑似毒品黄色粉末进行检验分析。将该样品主要成分的谱图与现有数据库比对后发现,该物质并不在数据库中。UHPLC-HRMS分析得到其精确分子质量和主要特征离子峰。通过比对特征离子峰,该物质与氯胺酮有较高的相似度。15N-NMR确定了硝基的存在;核磁分析确定了其化学结构,并对各峰进行了指认;IR确定了羰基、硝基、C–Cl化学键等官能团的存在。该黄色粉末确定为一种可被用于合成氯胺酮的新型前体2-(2-氯苯基)-2-硝基环己酮,为国内首次在疑似毒品中检出。氯胺酮在全球范围内滥用,中国已经进行管制,而其作为药用有其独特的优势,合成工艺在不断发展,制毒工厂可能采用新的制毒工艺而逃避监管,2-(2-氯苯基)-2-硝基环己酮可能为不法分子为逃避打击使用新的合成氯胺酮工艺中的重要前体。在缴获物中发现该物质为以后易制毒化学品的管制和相关案件的检验提供参考。

乳制品中A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白检测方法研究进展

随着消费者对A2β-酪蛋白的关注度提升,A2β-酪蛋白相关产品不断更新换代。A2β-酪蛋白常用检测方法有反相高效液相色谱法(RP-HPLC)、液相色谱-高分辨串联质谱法、毛细管区带电泳法、试剂盒检测法等。本文对β-酪蛋白遗传变体A1β-酪蛋白和原始形态A2β-酪蛋白的功能特点、检测方法、定量分析进行综述,说明检测方法的原理和试剂药品的作用机理,加强对A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白检测方法的改进与优化,为A2β-酪蛋白应用于功能性食品、婴幼儿配方食品提供理论依据。

基于特征肽段结合超高效液相色谱-串联质谱法的乳制品真实性鉴别方法研究

目的基于超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)建立乳制品中乳铁蛋白、乳桥蛋白、奶牛A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白、水牛A2β-酪蛋白的检测方法,开展市售乳制品中功能性蛋白质检测和乳制品真实性鉴评分析。方法乳蛋白经酶解后,应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(ultra performance liquid chromatography-triple quadrupole-Orbitrap high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/Orbitrap HRMS)和UPLC-MS/MS筛选获得可用于定性定量分析的特征肽段,基于UPLC-MS/MS建立同时检测LF、LPN、奶牛A1β-CN、奶牛A2β-CN和水牛A2β-CN的方法并应用于乳制品检测。结果5种待测蛋白在相应的浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.99),加标回收率在82.1%~105.5%之间,相对标准偏差均小于5%,78份乳制品的检测结果表明同类样品LF含量差异较大,不同类液体乳中LPN均值差异不大。结论本方法性能良好,适用于乳制品中乳桥蛋白等功能性蛋白的同时检测,也可以实现乳制品中乳蛋白物种来源的鉴别。

柱前衍生-高效液相色谱串联高分辨质谱法检测谷氨酸钠注射液中谷氨酸钠的含量

目的建立基于超高效液相色谱串联高分辨质谱法测定谷氨酸钠注射液中谷氨酸钠含量的高灵敏和高选择性新方法。方法色谱柱为Kinetex C18(2.0×100mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水和甲醇溶液,样本中谷氨酸以3-溴丙基三苯基磷(3-BMP)进行衍生化反应,流速为0.40μL/min,谷氨酸衍生化物母离子和特征碎片分别为450.18→320.16。使用非数据依赖型扫描模式绘制标准曲线。结果谷氨酸钠在0.024~1000pmol范围线性关系良好(R 2=0.9999),最低检出量为4.00fmol,最低定量限为24.25fmol,平均加标回收率为91.71%,日内日间精密度RSD分别为1.67%~2.64%和1.66%~4.55%。结论该方法简便、灵敏、准确,样品处理简单,适用于产品质量检测和实验室中测定谷氨酸钠注射液中谷氨酸钠的含量。

快速高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中5类33种药物残留

建立了快速高效液相色谱-串联质谱法(RRLC-MS/MS)同时测定水产品中四环素类、喹诺酮类、磺胺类、磺胺增效剂和三苯甲烷类共5大类33种药物残留的方法。样品用Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液及乙腈提取,正己烷脱脂后,用RRLC进行分离。在电喷雾正离子模式下,以动态多反应监测(Dynamic MRM)方式采集数据进行定性与定量分析。33种药物在相应的浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.99;在3个不同浓度添加水平下,平均回收率为63.6%～115.2%;相对标准偏差(RSD)为4.6%～14.6%;检出限(LOD,S/N=3)和定量限(LOQ,S/N=10)分别为0.1～2.0μg/kg和0.5～5.0μg/kg。本方法简便快速、灵敏可靠,适用于水产品中药物多残留的同时快速定性与定量测定。

固相萃取-液相色谱质谱法测定稻米中乙虫腈对映体残留

在3种不同的纤维素手性柱上,对亚砜类手性杀虫剂乙虫腈对映体进行了反相高效液相色谱拆分研究,通过优化手性色谱柱和流动相,实现了乙虫腈对映体基线分离,结合液相色谱-圆二色检测器分析,柱流出顺序为(+)-、(-)-对映体,并在此基础上建立了稻米中乙虫腈对映异构体残留量的高效液相色谱-串联质谱分析方法。稻米样品加水浸润,乙腈高速匀浆、盐析,上清液旋转浓缩后经氨基固相萃取柱净化,洗脱液经氮气吹干后定容。采用纤维素-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)(Lux Cellulose-2)手性色谱柱,以甲醇-水(60∶40,V/V)为流动相,液相色谱-串联质谱电喷雾负离子扫描进行分析,外标法定量。以精米和糙米为基质进行3个添加水平和5次重复性实验,结果表明:添加浓度为0.01～0.2 mg/kg,样品中乙虫腈单一对映体平均添加回收率为87.4%～97.8%,相对标准偏差(RSD,n=5)为3.1%～9.3%,方法检出限(LOD)为0.001mg/kg,定量限(LOQ)为0.003 mg/kg。

固相萃取-超快速液相色谱-串联质谱法同时测定化妆品中9种抗过敏药物残留

建立了固相萃取-超快速液相色谱-串联质谱法(SPE-RRLC-MS/MS)同时测定化妆品中9种抗过敏药物残留(多西拉敏、美沙吡林、曲吡那敏、溴苯那敏、苯海拉明、赛克利嗪、二苯拉林、羟嗪和氯苯沙明)的方法。试样经三氯乙酸溶液超声提取、离心、Plexa PCX柱净化后,以甲醇-0.1%甲酸溶液(含5 mmol/L甲酸铵)为流动相,用RRLC进行分离。在电喷雾正离子模式下,以选择反应监测(SRM)方式采集数据进行定性与定量分析。9种药物在1.0～50.0!g/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99;在2.0,5.0和20.0!g/kg3个浓度加标水平下的平均回收率为90.6%～103.5%;相对标准偏差(RSD,n=6)为2.5%～6.0%;检出限为0.3～0.6!g/kg,定量限为1.0～2.0!g/kg。

气相色谱-离子阱二级质谱对照高分辨质谱对食品中二噁英类多氯联苯的测定

确定了气相色谱-离子阱二级质谱在分析食品中12种二噁英类多氯联苯残留的定性参数；优化了分析过程的质谱条件；研究了实际样品（河豚、鳗鱼、甜虾、鸡脂肪、奶粉、猪肠衣）离子阱串联质谱测定值与高分辨质谱值的准确度差异。样品采用加速溶剂萃取方法提取、流体控制系统净化及离子阱二级质谱和高分辨质谱测定。两种方法测定值之间的回归方程和相关系数分别为：4种非邻位取代二噁英类多氯联苯，y=0．7815x，r=0．9331；8种邻位取代二噁英类多氯联苯，y=0．8073x，r=0．996；样品中12种多氯联苯总毒性当量（Total TEQ）：y=0．5181x＋0．1255，r=0．992。离子阱二级质谱和高分辨质谱的检出限分别为0．5ng/kg和0．1ng／kg，样品中同位素内标的回收率为41％～102％。

快速高分辨率液相色谱-串联质谱法测定牛肉中24种镇静剂类兽药残留量

建立了牛肉中24种镇静剂类药物残留量的检测方法。样品经氨水-乙腈溶液（体积比10∶90）和30μLβ-葡糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶提取后,用HLB固相萃取小柱净化,采用快速高分辨率液相色谱-串联质谱（RRLC-MS/MS）检测,以信噪比（S/N）分别为3和10时测定药物的检出限（LODs）和定量限（LOQs）。各药物在添加浓度水平范围均有良好的线性关系,相关系数（r^2）在0.963 9～0.999 8之间,LODs为0.2～2.5μg/kg,LOQs为0.5～5μg/kg,平均添加回收率为74.1%～123.9%,日内相对标准偏差（RSD）为2.6～9.9%,日间相对标准偏差（RSD）为2.9～9.9%。该方法灵敏度高、回收率高,为镇静剂类药物残留量检测提供了基础方法,可满足同类实验室的检测需求。

分散固相萃取-超高效液相色谱-串联高分辨质谱法测定新疆苹果中7种农药残留

为快速得到新疆苹果中痕量农药信息,考察新疆苹果种植过程中常用的7种农药,并针对这7种常见农药建立了分散固相萃取-超高效液相色谱-串联高分辨质谱的分析方法,旨在快速筛查出可能的农药并同时定量。结果表明:7种农药线性关系良好,相关系数均大于0.99。方法检出限为0.003～0.1 mg/kg,定量限为0.02～0.5 mg/kg,平均回收率为95%～119%之间,相对标准偏差小于10%(n=3)。该方法能够排除假阳性结果,快速高效地完成出口前新疆苹果中多农药残留的分析。

快速高分离液相色谱-串联质谱法检测原乳中活性β-内酰胺酶

建立了原乳中活性β-内酰胺酶拮抗剂的快速高分离液相色谱-串联质谱(RRLC-MS/MS)检测方法。利用活性β-内酰胺酶能够酶解青霉素族药物的特性,在原乳中加入适量氨苄青霉素,酶解1h后,检测原乳中氨苄青霉素酶解率,定性检测活性目标物。试样中氨苄青霉素经乙腈溶液提取,HLB固相萃取柱净化和浓缩后,RRLC-MS/MS多反应监测模式定性与定量分析。本方法对活性β-内酰胺酶检出限为4U/mL;对原乳中添加1mg/kg水平氨苄青霉素的加标回收率为92.3%～95.5%;相对标准偏差RSD≤10%(n=6)。本方法的定性结果与生物杯碟法完全一致。

我国某城市市售食品中PCDD/Fs污染水平和人群二噁英膳食暴露量研究

The status of PCDDs and PCDFs content in retail foods from a certain area by Isotope Dilution HRGC-HRMS was surveyed and the local population PCDD/Fs exposure from diverse foods and health risk was evaluated.PCDD/Fs was extracted from samples by Soxhlet extraction,concentrated and purified by FMS column chromatograph,carbon column enrichment.Confirmation and quantitative analysis at pg/g level of PCDD/Fs was performed by HRGC/HRMS using multiple ion detection mode(MID).TEQ concentration was calculated by WHO-TEF multiplying by concentration of seventeen PCDD/Fs congener.Median of PCDD/Fs concentration for fish,livestock,poultry,egg,vegetable oil,milk,vegetable totally 100 samples for ten diverse foods didn’t exceed the limit standards by EU.The level of PCDD/Fs for different food in the certain area was lower or comparable to the data reported by developed country in the world.The total weekly intake and monthly intake for local population or national population was 3.44,14.8 WHO-TEQ/kg BW and 1.5,6.42 pg WHO-TEQ/kg BW respectively,the value was lower than the Tolerable Weekly Intake of 14 pg WHO TEQ/kg BW for PCDDs,PCDFs and dioxin-like PCBs established by EU Scientific Committee for Food.The dietary PCDD/Fs intake for local people was higher than national population.And animal food was the dominant contributor to the total dietary intake,which accounted for more than 70 percent.These levels of consumption of diverse food containing typical levels of PCDD/Fs doesn’t present a risk to the health of the local population.But integrative dietary intake could be evaluated including of PCBs intake for population in the future.

超高效液相色谱-四极杆/飞行时间高分辨质谱测定保健食品及其原料中洛伐他汀及类似物的含量

目的利用超高效液相色谱-四极杆/飞行时间高分辨质谱(ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole/time-of-flight high resolution mass spectrometry,UPLC-Q/TOF HRMS),建立同时鉴别和定量测定保健食品及其原料中的洛伐他汀及其类似物的分析方法。方法样品用Agilent Eclipse Plus C_(18)(50mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,电喷雾正离子模式离子化,全扫描模式检测。结果当称样量为1 g时,酸式洛伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、辛伐他汀、去羟基洛伐他汀和洛伐他汀羟酸钠盐的检出限分别为40、25、25、25、25和50 ng/g;洛伐他汀、美伐他汀、辛伐他汀、去羟基洛伐他汀在25~200μg/L范围、洛伐他汀羟酸钠盐在100~800μg/L范围内线性关系良好(R≥0.99);5种成分在保健食品及原料中均有较好的回收率和稳定性。结论该方法简便、快速、灵敏、准确,适合于保健食品及原料中的洛伐他汀及其类似物的鉴别和定量测定。