鼻咽癌上皮细胞凋亡有关癌基因表达的变化

用DNA拓扑异构酶I抑制剂-喜树硷体外诱导人低分化鼻咽癌上皮细胞系（CNE－2Z）细胞发生凋亡，并用流式细胞仪检测了有关癌基因表达的变化情况。结果：4μmol／L喜树俭作用24h后，c－myc、bcl－2及p53表达均较对照组明显降低，提示CNE－2Z细胞发生凋亡时或许会受c－myc、bcl－2和p53等癌基因的影响。

几种生化因素对喜素碱诱导鼻咽癌细胞凋亡的影响

目的 研究有关生化因素对喜树碱（ＣＰＴ）诱导人鼻咽癌细胞凋亡的影响。方法 在ＣＰＴ诱导人鼻咽癌ＣＮＥ－２Ｚ 细胞凋亡的基础上，采用流式细胞仪及二苯胺反应等方法，观察了多胺、Ｃａ２＋、Ｍｇ２十依赖性内切酶活性抑制剂及ＰＡＲＰ活性抑 制剂对ＤＮＡ片段化形成的影响。结果 多胺可明显抑制ＣＰＴ诱导的ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡，使片段化ＤＮＡ明显降低，Ｐ＜０．０５。内 切酶及ＰＡＲＰ活性抑制剂与ＣＰＴ共同作用ＣＮＥ－２Ｚ细胞后测得片段化ＤＮＡ与单用ＣＰＴ相比无显著性差异，Ｐ＞０．０５。结论 喜树碱诱导的 ＣＮＥ－２Ｚ细胞凋亡可能与一种非 Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋依赖性内切酶活性有关，且受多胺的调节。

白杨素联合喜树碱促进鼻咽癌细胞CNE2凋亡作用研究

目的研究白杨素联合喜树碱对鼻咽癌细胞CNE2凋亡的影响,并对其分子机制做初步探讨。方法白杨素以不同浓度(10、20、40μmol/L)单独/联合喜树碱(1μg/mL)处理CNE2细胞后,于普通及荧光倒置显微镜下观察细胞形态变化,获得细胞死亡的定性资料;MTT法分析细胞活性,获得细胞死亡的定量资料;并以Western blotting方法检测凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的变化情况及凋亡抑制蛋白Bcl-xL随时间的变化规律。结果形态学观察发现,与对照组比较,白杨素联合喜树碱处理CNE2细胞后,细胞出现明显的死亡量增加,而单独白杨素、喜树碱和未处理的对照组则未观察到细胞的明显减少;MTT法分析的定量资料也支持这一结果,联合处理组细胞存活率随着白杨素剂量增加而下降,与未处理的对照组比较均有统计学意义(P<0.05),而且与单独白杨素及单独喜树碱组比较均有统计学意义(P<0.05);Hochest 33342荧光染色在联合处理组可观察到明显的核固缩细胞增加;Western blotting检测到凋亡标志蛋白caspase-3和PARP原蛋白减少、相应的活化裂解片段出现;全caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可有效抑制联合处理引起的CNE2细胞凋亡,阻止凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的活化降解;喜树碱引起的凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达量增加,随联合处理时间延长而明显下调。结论白杨素联合喜树碱具有促进CNE2细胞凋亡的能力,凋亡抑制蛋白Bcl-xL表达下调是其重要的分子机制。

鼻咽癌细胞系CNE-2Z放射敏感性的异质性及其机理探讨

目的 进一步证实人鼻咽癌细胞系CNE 2Z确实存在着放射敏感性的异质性 ,并探讨其有关机理。方法 观察人鼻咽癌细胞系CNE 2Z亚克隆株H5和S1的裸鼠移植瘤放射敏感性的不同 ;用流式细胞仪、荧光显微镜、Western blot检测H5和S1凋亡能力的不同及凋亡相关蛋白表达的差异 ;用3H掺入法说明DNA合成抑制率与放射敏感性的不同 ;用RT PCR观察相关癌基因 (fas、p5 3)的表达与放射敏感性的关系。结果 鼻咽癌细胞系CNE 2Z中确实存在放射敏感性的异质性 ,H5、S1两种细胞的凋亡率都随着照射后时间的延长而增加 ,但H5比S1高且差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。两种细胞的DNA合成率于放射前无差别 ;照射后都较放射前受到抑制 (P <0 0 5 ) ,H5受抑制程度大 (P <0 0 5 )。H5与S1细胞fas、p5 3基因的表达差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 本实验再次证实了鼻咽癌细胞系CNE 2Z确实存在放射敏感性异质性 ,并证实了其异质性的机理与细胞受射线照射后引起凋亡的能力不同有关、与DNA合成的抑制率成正相关、与癌基因fas、p5 3的表达无关。