慈苓化浊方对痛风大鼠滑膜组织环氧化酶-2、热休克蛋白70表达的影响

目的:分析慈苓化浊方对痛风大鼠滑膜组织中环氧化酶-2(COX-2)、热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法:选取50只SPF级SD大鼠,10只大鼠作为对照组,另外40只建立痛风模型,将30只建模成功的大鼠分为模型组、药物对照组、慈苓化浊方组,每组10只。观察各组大鼠组织病理学、关节肿胀度、COX-2、HSP70表达、炎症因子、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)通路相关因子及其mRNA表达量。结果:与对照组相比,模型组、药物对照组、慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、PI3K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量升高,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量降低(均P<0.05)。与模型组相比,药物对照组、慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6、PI3K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量降低,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量升高(均P<0.05)。与药物对照组相比,慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6、PI3K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量降低,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量升高(均P<0.05)。结论:采用慈苓化浊方干预痛风大鼠,可降低大鼠关节肿胀程度,降低滑膜组织COX-2、HSP70表达,抑制炎症反应,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT/FoxO1通路有关。

间充质干细胞外泌体调节哺乳动物雷帕霉素靶点/p70核糖体蛋白S6激酶/盘卷肌球蛋白样Bcl-2-相互作用蛋白通路改善糖尿病肾病大鼠肾损伤的机制研究

目的探讨间充质干细胞外泌体(MSC-EVs)通过调节哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(S6K1)/盘卷肌球蛋白样Bcl-2-相互作用蛋白(Beclin 1)通路改善糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的机制。方法采用高脂饮食联合腹腔链脲佐菌素(STZ)注射的方法建立SD大鼠DN模型,随机分为模型组、MSC-EVs组、MSC-EVs+MHY1485(mTOR激活剂)组,每组12只。另取12只SD大鼠以正常饲料喂养6周后,腹腔注射同等剂量柠檬酸钠溶液作为对照。以MSC-EVs和MHY1485分组处理后,检测大鼠血糖及肾功能指标[血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、尿微量白蛋白(UmALB)]水平。采用苏木精-伊红(HE)染色检测各组大鼠肾组织病理形态;采用免疫组化检测各组大鼠肾组织mTOR/S6K1/Beclin 1通路相关蛋白表达;采用蛋白免疫印迹法检测各组大鼠肾组织mTOR/S6K1/Beclin 1通路及自噬相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肾组织形态发生损伤,血糖、BUN、Scr、UmALB、p-mTOR及p-S6K1相对阳性表达、p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1显著升高(P<0.05),微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin 1蛋白表达、Beclin 1相对阳性表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,MSC-EVs组大鼠肾组织形态损伤减轻,血糖、BUN、Scr、UmALB、p-mTOR及p-S6K1相对阳性表达、p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin 1蛋白表达、Beclin 1相对阳性表达显著升高(P<0.05);与MSC-EVs组相比,MSC-EVs+MHY1485组大鼠肾组织形态损伤加重,血糖、BUN、Scr、UmALB、p-mTOR及p-S6K1相对阳性表达、p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1显著升高(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin 1蛋白表达、Beclin 1相对阳性表达显著降低(P<0.05)。结论MSC-EVs可增强自噬,降低DN大鼠血糖、SCr、BUN和尿蛋白水平,减轻肾组织损伤,其机制可能与抑制mTOR/S6K1/Beclin 1通路激活有关。

超重/肥胖合并2型糖尿病患者血清ANGPTL4、HSP70、IL-34水平与胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨超重/肥胖合并2型糖尿病(T2DM)患者血清血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、热休克蛋白(HSP)70、白细胞介素-34(IL-34)水平与胰岛素抵抗的相关性。方法 选取2020年5月—2022年5月保定市第一中心医院T2DM患者182例(T2DM组)。参考相关诊断标准,将T2DM患者分为超重/肥胖T2DM组(90例)和体重正常T2DM组(92例)。另选取同期健康体检者90名作为正常对照组,其中超重/肥胖者40名(超重/肥胖对照组)、体重正常者50名(体重正常对照组)。检测所有研究对象血清ANGPTL4、HSP70、IL-34、胰岛素和血糖水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。T2DM患者治疗3个月后,再次检测其血清ANGPTL4、HSP70、IL-34水平和HOMA-IR。采用Pearson相关分析评估血清ANGPTL4、HSP70、IL-34与HOMA-IR的相关性。结果 与正常对照组和体重正常T2DM组比较,超重/肥胖T2DM组血清ANGPTL4和HSP70显著降低(P<0.05),血清IL-34和HOMA-IR显著升高(P<0.05)。与正常对照组比较,体重正常T2DM组血清ANGPTL4和HSP70显著降低(P<0.05),血清IL-34和HOMA-IR显著升高(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清ANGPTL4、HSP70与HOMA-IR呈负相关(r值分别为-0.733、-0.758,P<0.001),IL-34和HOMA-IR呈正相关(r=0.705,P<0.001)。治疗后,超重/肥胖T2DM组和体重正常T2DM组血清ANGPTL4和HSP70均明显升高,血清IL-34和HOMA-IR明显降低;且相对于超重/肥胖T2DM组,体重正常T2DM组血清ANGPTL4和HSP70升高更显著(P<0.05),血清IL-34和HOMA-IR降低更显著(P<0.05)。结论 超重/肥胖合并T2DM患者ANGPTL4、HSP70和IL-34与胰岛素抵抗显著相关,或可作为超重/肥胖合并T2DM的疗效监测指标。

热休克蛋白70联合白介素--2对小鼠肝癌细胞株移植瘤的影响

目的:研究肿瘤热休克蛋白70联合应用IL-2对小鼠肝癌的治疗作用,为两种免疫制剂联合应用治疗人类恶性肿瘤提供参考依据。方法:应用细胞培养、蛋白提纯、电泳、Western-blot、毛细管电泳、动物实验等方法。小鼠分别用HSP70 10μg、5μg和IL-2 50kU、100kU、2kU(维持量)按设计的方案进行治疗试验。结果:单纯应用或联合应用HSP70和IL-2均能明显地延缓小鼠移植肝癌的生长并能不同程度地延长生存期,与对照组相比(除IL-250kU组外)差异显著(P<0.025-0.05)。但获长期存活(>90d)者仅见于接受HSP70 10μg治疗组,40％(2/5)的HSP70 10μg组及HSP70 10μg联合应用IL-2 50kU组小鼠,和60％(3/5)的HSP70 10μg联合应用IL-2 100kU组小鼠,获长期生存的小鼠其肿瘤最终全部消退。与无长期生存小鼠的其他组相比差异十分显著(P<0.025-0.05)。IL-2 100kU与HSP70 5μg的作用相当。结论:肿瘤来源的HSP70较IL-2具有更强的治疗作用,在联合应用实验的治疗组中HSP70对延缓和消除肿瘤起主要作用。更重要的是,合适剂量的HSP70与IL-2联合应用(本研究中HSP70 10μg与IL-2 100kU)能明显地提高对荷瘤小鼠的治疗作用。

健心平律丸对心房颤动患者金属基质蛋白酶-2、血清热休克蛋白70表达的影响

目的研究院内制剂健心平律丸对房颤患者血清金属基质蛋白酶-2(MMP-2)及心肌热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将80例房颤患者按照随机数字表法分为2组,对照组(常规西药治疗)40例,治疗组(加用健心平律丸)40例;12个月为一个治疗周期,12个月后统计疗效;治疗前后分别测量记录2组患者MMP-2、HSP70水平的变化,同时检测治疗前后心律、心率、血压、心电图、心脏彩超、三大常规、肝肾功能、电解质凝血功能等安全性指标的变化。结果治疗后2组MMP-2较治疗前均降低(P<0.05),治疗后治疗组MMP-2较对照组下降明显(P<0.05),治疗后2组HSP70较治疗前均增高(P<0.05),治疗后治疗组HSP70水平较对照组增高明显(P<0.05)。结论治疗组治疗后MMP-2水平显著下降、HSP70水平明显上升,提示健心平律丸可能通过下调MMP-2表达及上调HSP70表达改善心房重构,从而改善心房颤动的维持。

热休克蛋白70及基质金属蛋白酶-7和EHD2蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和EHD2蛋白在结直肠癌(CRC)组织中的表达及意义。方法选择2012年3月至2013年8月齐齐哈尔医学院附属第二医院收治的63例CRC患者的癌组织和癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学染色法检测CRC组织和正常结直肠组织中HSP70、MMP-7和EHD2蛋白的表达,并分析HSP70、MMP-7和EHD2蛋白表达与CRC临床病理特征及患者5 a生存率的关系。结果 CRC组织中HSP70、MMP-7、EHD2蛋白阳性表达率分别为66.67%(42/63)、73.02%(46/63)、19.05%(12/63),正常结直肠组织中HSP70、MMP-7、EHD2蛋白阳性表达率分别为11.11%(7/63)、14.29%(9/63)、77.78%(49/63); CRC组织中HSP70、MMP-7阳性表达率显著高于正常结直肠组织(χ~2=40.909、44.173,P<0.05),CRC组织中EHD2阳性表达率显著低于正常结直肠组织(χ~2=43.504,P<0.05)。HSP70、MMP-7和EHD2蛋白表达与CRC患者的性别、年龄、肿瘤直径及肿瘤部位无相关性(P>0.05); HSP70、MMP-7和EHD2蛋白表达与CRC分化程度、Duke分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05),CRC分化程度越低、Dukes分期越差及有淋巴结转移,HSP70和MMP-7阳性表达越高,EHD2阳性表达越低。63例患者均获得5 a随访,生存43例(68.3%),病死20例(31.7%)。HSP70阳性表达患者5 a生存率为59.52%(25/42),HSP70阴性表达患者5 a生存率为85.71%(18/21); MMP-7阳性表达患者5 a生存率为60.87%(28/46),MMP-7阴性表达患者5 a生存率为88.24%(15/17); EHD2阳性表达患者5 a生存率为100.00%(12/12),EHD2阴性表达患者5 a生存率为60.78%(31/51); HSP70和MMP-7阳性表达患者5 a生存率低于阴性表达患者(χ~2=4.260、3.902,P<0.05),EHD2阳性表达患者5 a生存率高于阴性表达患者(χ~2=5.893,P<0.05)。结论HSP70、MMP-7和EHD2的表达可能与结直肠癌的发生发展有关,可作为判断结直肠癌预后的指标。

热休克蛋白70-2和肿瘤坏死因子α基因多态性与儿童过敏性紫癜相关性研究

目的观察热休克蛋白70-2(HSP70-2)和TNF-α基因多态性与儿童过敏性紫癜(HSP)的相关性。方法纳入2008年9月至2009年5月在南京儿童医院诊断为HSP的患儿为HSP组,健康查体儿童为对照组。采用PCR-RFLP法检测两组HSP70-2基因1267A/G和TNF-α基因-380G/A多态性,并分析其与HSP和肾损害的相关性。结果 HSP组纳入205例,对照组纳入53名。①HSP组和对照组HSP70-2基因1267位点GG基因型频率分别为22.9%和9.4%,差异有统计学意义(χ2=4.764,P<0.05);非肾损害亚组和肾损害亚组AA、AG、GG基因型频率差异无统计学意义。②HSP组和对照组TNF-α基因-308位点AA基因型频率分别为8.3%和1.9%,差异有统计学意义(χ2=6.447,P<0.05);A等位基因频率HSP组高于对照组(24.4%vs12.3%,χ2=7.241,P<0.05);非肾损害亚组和肾损害亚组GG、GA、AA基因型和A等位基因频率差异均无统计学意义。结论 HSP70-2基因1267位点GG基因型、TNF-α基因-308位点AA基因型可能是HSP发病的遗传学易感因素,但与肾损害发展可能无明显相关性。

棉花黄萎病拮抗细菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的理化性质和抑菌机理

【目的】旨在研究棉花黄萎病拮抗细菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的抑菌谱、理化性质以及抑菌机理,为棉花黄萎病生物农药的研制与开发奠定理论基础。【方法】采用抑菌圈法测定该抗菌蛋白的抑菌谱,以及温度、pH、无机离子、有机溶剂、蛋白酶对其稳定性的影响,并通过无菌小瓶等方法研究抗菌蛋白对大丽轮枝菌菌丝和孢子的抑制作用,测定了抗菌蛋白的纤维素酶和几丁质酶活力。【结果】棉花黄萎病拮抗细菌B.subtilis ZL2-70抗菌蛋白抑菌谱广,对19种植物病原菌表现出抑菌活性;该蛋白理化性质相对稳定,耐高温,在pH 5.0~10.0范围内抑菌活性较稳定,经EDTA处理后活性变化不大,对Fe3+敏感,对蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶不敏感;该抗菌蛋白对大丽轮枝菌的菌丝生长和孢子萌发有双重抑制作用,能使病原菌菌丝胞壁消融、原生质凝集渗漏、菌丝细胞泡囊化,并可抑制病菌孢子的萌发;抗菌蛋白具有纤维素酶和几丁质酶活性,且酶活力与抑菌活性有关。【结论】初步推断该抗菌蛋白通过多糖酶活力破坏大丽轮枝菌的细胞壁和抑制病原菌的孢子萌发而起到抑菌作用。

热休克蛋白70-2在精子发生及精卵识别中的研究进展

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）是所有生物细胞在理化和生物等应激原刺激后,发生热休克反应时所产生的一类伴随细胞内功能性蛋白的伴侣蛋白分子。热休克蛋白根据分子量大小,主要分为4个家族：HSP90家族（83-90kD）、HSP70家族（66-78kD）、HSP60家族及小分子HSP家族（15-30kD）。

2型糖尿病合并乙型肝炎肝硬化相关肝细胞癌患者血清TNF-α、HSP70、sPD-1的水平及意义

目的探讨2型糖尿病合并乙型肝炎肝硬化相关肝细胞癌患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、热休克蛋白70(HSP70)、可溶性程序性细胞死亡蛋白1(sPD-1)的水平及意义。方法采用前瞻性研究方法,选取2022年1月至2023年6月98例2型糖尿病合并乙型肝炎肝硬化患者作为观察组,同时选取81例单纯性乙型肝炎肝硬化患者、单纯2型糖尿病患者60例、健康志愿者60名作为对照。根据是否合并肝细胞癌将观察组分为肝细胞癌组31例、非肝细胞癌67例组。检测所有研究对象血清TNF-α、HSP70和sPD-1水平。结果观察组血清TNF-α、HSP70明显高于乙肝肝硬化组、2型糖尿病组和健康志愿者,差异有统计学意义(P<0.05);观察组SPD-1明显低于乙肝肝硬化组、2型糖尿病组和健康志愿者,差异有统计学意义(P<0.05)。肝细胞癌组患者血清TNF-α、HSP70明显高于非肝细胞癌组,差异有统计学意义(P<0.05);肝细胞癌组患者血清SPD-1明显低于非肝细胞癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清TNF-α、HSP70和sPD-1诊断2型糖尿病合并乙型肝炎肝硬化肝细胞癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.812、0.749、0.848(P<0.01)。结论2型糖尿病合并乙型肝炎肝硬化相关肝细胞癌患者血清TNF-α、HSP70、sPD-1水平明显升高,在疾病诊治中可能有一定应用价值。

血清中热休克蛋白70-2及TLR-4的含量与气阴两虚型老年房颤患者的相关性研究

目的：探讨HSP70-2及TLR-4在气阴两虚型房颤的发生和维持中的作用及临床意义。方法：选入3个年龄段的房颤患者（气阴两虚型）共90例,分别为A组（60~69岁）,B组（70~79岁）,C组（80~89岁）,正常对照组30例。取空腹静脉血,用酶联免疫法（ELISA）测定血清中热休克蛋白70-2（HSP70-2）和TLR-4的含量,比较各个年龄组房颤与正常组患者血清中HSP70-2和TLR-4的含量。结果：1A、B、C组患者血清中HSP70-2含量均低于正常组,且有显著差异。2A、B、C组患者血清中TLR-4含量均高于正常组,其中A、B有显著差异,C组无显著差异。3各年龄组房颤患者的HSP70-2和TLR-4的含量无统计学差异。4正常组患者血清中HSP70-2的含量与TLR-4的含量呈负相关,房颤患者血清中HSP70-2的含量与TLR-4的含量呈正相关。结论：老年患者血清中HSP70-2、TLR-4的浓度对房颤的发生和维持有重要影响。

细胞外HSP70/HSP70-PCs对人肝癌HepG2细胞上皮-间充质转化的影响及机制研究

目的:探讨细胞外热休克蛋白70(HSP70)/HSP70肽复合物(HSP70-PCs)对肝癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响和可能机制。方法:将HepG2细胞分为3组:正常对照组、HSP70/HSP70-PCs组(终浓度2mg/L)和LY294002+HSP70/HSP70-PCs组。应用real-time RT-PCR与Western blotting法检测上皮细胞表面标志Ecadherin和间质细胞表面标志α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化,以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和缺氧诱导因子1α(HIF1-α)的表达变化。结果:细胞外HSP70/HSP70-PCs可以促进HepG2细胞EMT的发生。HepG2细胞的EMT过程伴随HIF-1α和PI3K表达增加。应用LY294002阻断PI3K后,HepG2细胞没有发生EMT,同时细胞外HSP70/HSP70-PCs上调HIF-1α表达的作用消失。结论:细胞外HSP70/HSP70-PCs可以通过PI3K/HIF-1α促进肝癌细胞发生EMT。

烟草Hsc70-2的克隆及对马铃薯Y病毒侵染烟草的促进作用

【目的】马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是危害烟草、马铃薯、番茄、辣椒等主要农作物的重要病毒,给农业生产带来巨大损失。论文旨在克隆Hsc70-2蛋白在本氏烟(Nicotiana benthamiana)中的基因序列并分析其生物学信息,研究NbHsc70-2蛋白对PVY侵染烟草的影响,为进一步解析PVY的侵染机制提供理论依据。【方法】以本氏烟为材料,克隆NbHsc70-2蛋白的基因编码序列(coding sequence,CDS),利用MEGA 6.0进行多序列比对并构建系统进化树;利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析NbHsc70-2在本氏烟各组织中的表达水平;采用在线软件BaCeILo和SignalP 4.0对NbHsc70-2进行生物信息学分析;构建NbHsc70-2-RFP融合蛋白确定该蛋白的亚细胞定位;研究PVY处理对本氏烟叶片中NbHsc70-2的影响;利用激光共聚焦观察PVY-GFP处理对NbHsc70-2-RFP定位的影响;构建NbHsc70-2 VIGS沉默体系及瞬时表达载体,采用qRT-PCR比较NbHsc70-2在沉默/过表达后对PVY表达的影响。【结果】NbHsc70-2编码649个氨基酸,系统进化树分析表明,NbHsc70-2与普通烟NaHsc70-2序列相似性最高,亲缘关系最近,属于热激蛋白家族,C端具有热激蛋白家族的高度保守基序结构;qRT-PCR分析表明,NbHsc70-2在叶中表达量最高,在根和茎中的表达量较低;BaCeILo预测及激光共聚焦显微镜观察均显示NbHsc70-2定位在细胞质中,并且PVY-GFP侵染本氏烟后NbHsc70-2-RFP部分转移至细胞核,与PVY-GFP共定位在细胞质及细胞核中;将NbHsc70-2基因沉默载体pTRV::NbHsc70-2导入本氏烟中7 d后相比于对照组,沉默组出现心叶皱缩及矮化现象;接种PVY-GFP 7 d后通过手持紫外灯观察到沉默组中无明显绿色荧光出现,而对照组中PVY-GFP系统侵染使得非接种叶片呈现荧光现象,沉默组荧光点数约为对照组28%;接种PVY后,利用qRT-PCR检测沉默NbHsc70-2后1、3、5 d的PVY CP基因积累量,结果表明沉默NbHsc70-2后PVY CP基因积累量下降,其中3 d和5 d与对照相比差异显著,基因表达水平分别为对照的14%和0.004%;将NbHsc70-2过表达载体pEarleyGate100::GWC::NbHsc70-2与PVY同时导入本氏烟后,结果表明相比于对照组,过表达组48 h和72 h其PVY CP基因积累量显著上升,基因表达水平分别为对照组的2.31、2.56倍。【结论】PVY侵染会引起NbHsc70-2表达量上升;NbHsc70-2是PVY侵染本氏烟重要的组成成分,沉默该基因显著抑制PVY的表达,过表达NbHsc70-2则显著提高PVY的表达,即NbHsc70-2的表达水平与PVY复制呈正相关,NbHsc70-2蛋白促进PVY对烟草的侵染。

PTEN,Bcl-2及HSP70在星形细胞瘤中表达与肿瘤分化及预后的关系

目的分析PTEN,Bcl-2,HSP70在星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤分化和预后的关系。方法应用免疫组化S-P法对54例脑原发性星形细胞瘤中PTEN,Bcl-2,HSP70的表达进行观察,对其中41例取得随访资料的肿瘤患者存活因素进行分析。结果PTEN,Bcl-2,HSP70的表达在星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤和多形性胶质母细胞瘤中差异有显著性(F=14.79,P<0.01;F=4.25,P<0.05;F=23.12,P<0.01)。PTEN在星形细胞瘤中标记指数高时,预后较好;Bcl-2和HSP70在星形细胞瘤中标记指数高时,预后较差。结论PTEN,Bcl-2,HSP70异常表达与星形细胞瘤分化与预后相关,能够客观反映肿瘤的增殖速度、分化和恶性程度,可以作为判断星形细胞瘤分化和预后有价值的参考指标。

五味子乙素对HepG2细胞凋亡及Hsp-70基因表达的影响

目的探讨五味子乙素(Sch B)对人肝癌HepG2细胞的抑制作用,并研究其可能机制。方法 10、25、50、75、100μmol/L Sch B作用于HepG2细胞,通过MTT法筛选低毒性的Sch B浓度,梯度浓度Sch B作用HepG2细胞48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态;MTT法检测细胞活性;Western blot法检测Sch B作用HepG2细胞48 h后不同浓度组热休克蛋白-70(Hsp-70)的表达情况;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期改变。结果Sch B能够抑制HepG2细胞的生长,并呈浓度依赖性;流式细胞术结果显示10、25μmol/L Sch B组细胞在SubG1期明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论 Sch B促凋亡机制可能与下调Hsp-70蛋白的表达有关;如做免疫调节剂与其他抗癌药物联合使用最佳给药浓度为10μmol/L。

慢性高原病骨髓细胞环氧化酶2和热休克蛋白70表达及细胞凋亡研究

目的研究慢性高原病(chronic mountain sickness,CMS)患者骨髓单个核细胞环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)的表达及骨髓细胞凋亡变化,探讨它们在CMS发生发展过程中的作用。方法采集20例CMS患者(CMS组)骨髓标本,用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,采用RT-PCR方法半定量检测CMS患者骨髓单个核细胞表面COX-2mRNA和HSP70mRNA的表达,同时用TUNEL技术定量研究CMS患者骨髓单个核细胞凋亡指数,并与20名健康成人(对照组)骨髓标本研究结果比较分析。结果 CMS组骨髓单个核细胞COX-2mRNA表达量0.97±0.45明显高于对照组0.32±0.15(P<0.05)。CMS组骨髓单个核细胞HSP70mRNA表达量为0.60±0.19,而在对照组中无表达。TUNEL技术研究发现CMS组骨髓单个核细胞凋亡指数(10.41±3.78)%明显低于对照组(21.12±8.16)%,差异有统计学意义(P<0.05)。CMS组中,COX-2mRNA、HSP70mRNA表达量分别与血红蛋白浓度间呈正相关(r值分别为0.51及0.58,均P<0.05),COX-2mRNA与HSP70mRNA间呈正相关(r=0.81,P<0.05),而在对照组中COX-2mR-NA表达量与血红蛋白浓度间无明显相关性(P>0.05)。在CMS组和对照组中,骨髓单个核细胞凋亡指数与COX-2mRNA及HSP70mRNA表达量之间均未发现明显相关性(均P>0.05)。结论 CMS患者骨髓细胞COX-2和HSP70表达升高,而骨髓细胞凋亡减少,可能在慢性高原病发病过程中发挥着一定的作用。

HSP70调控Bcl-2表达抑制脓毒症大鼠肺血管内皮细胞损伤的机制研究

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)调控B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达抑制脓毒症大鼠肺血管内皮细胞损伤的机制。方法 SD大鼠30只随机分为对照组、脓毒症组、干预组,每组10只,脓毒症组腹腔注射20 mg/kg内毒素,干预组尾静脉注射溶于15 mL林格液的800μg重组质粒pcDNA3.1-HSP70,48 h后腹腔注射20 mg/kg内毒素;对照组腹腔注射等量生理盐水。24 h后采血检测各组大鼠血清IL-6、TNF-α水平,采血后将各组大鼠处死取其肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,检测各组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率,检测各组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达水平。结果 HE染色结果显示干预组大鼠肺组织病理改变较模型组明显改善。脓毒症组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及血清IL-6、TNF-α水平显著高于对照组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及血清IL-6、TNF-α水平显著低于脓毒症组(P<0.05);脓毒症组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bax、Bcl-2蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞中HSP70、Bcl-2蛋白表达水平显著高于脓毒症组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞中Bax表达水平显著低于脓毒症组(P<0.05);干预组大鼠肺血管内皮细胞凋亡率及IL-6、TNF-α、HSP70、Bax、Bcl-2水平较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP70可能通过下调Bax及上调Bcl-2表达,减轻脓毒症大鼠炎症反应,减少肺血管内皮细胞凋亡,抑制肺血管内皮细胞损伤,从而起到保护肺血管内皮细胞的作用,这可能成为脓毒症肺损伤治疗的新靶点。

HSP70-1基因多态性与2型糖尿病易感性关系研究

目的探讨HSP70-1（＋190G/C）基因多态性与2型糖尿病易感性关系。方法收集2013年1月~2015年1月在河南省上蔡县人民医院内分泌科住院及健康体检的人群资料,依照纳入与排除标准,确定研究对象共480例,其中2型糖尿病患者（病例组）240例,男132例,女108例;健康人群（对照组）240例,男124例,女116例。对研究对象进行问卷调查、体格检查和实验室指标的测定,并采用PCR-RFLP技术检测HSP70-1基因＋190位点多态性。结果 2型糖尿病病例组和对照组的HSP70-1各基因型及等位基因频率差异无统计学意义（χ2=1.386,P〉0.05;χ2=1.260,P〉0.05）;C/C基因型携带者的体质指数明显高于G/G基因型携带者,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 HSP70-1基因＋190位点基因多态性可能与糖尿病易感性无关;C/C基因型增加了携带者患肥胖病的风险。

血清sST2、Caspase-3、HSP70与ACMP患者病情和迟发性脑病的关系

目的探讨血清可溶性致癌抑制因子2(sST2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、热休克蛋白70(HSP70)与急性一氧化碳中毒(ACMP)患者病情和迟发性脑病(DEACMP)的关系。方法选取2020年10月至2022年1月盘锦市中心医院收治的110例ACMP患者作为ACMP组,根据一氧化碳中毒程度分为轻度组、中度组、重度组;另选取同期52例体检健康志愿者作为对照组。随访6个月后,根据ACMP患者是否发生DEACMP分为DEACMP组和非DEACMP组。收集ACMP患者临床资料,采用酶联免疫吸附试验检测血清sST2、Caspase-3、HSP70水平。采用多因素Logistic回归分析ACMP患者发生DEACMP的影响因素,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sST2、Caspase-3、HSP70对ACMP患者发生DEACMP的诊断效能。结果ACMP组血清sST2、Caspase-3、HSP70水平均高于对照组(P<0.05)。重度组血清sST2、Caspase-3、HSP70水平高于中度组、轻度组(P<0.05),中度组血清sST2、Caspase-3、HSP70水平高于轻度组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄增加、高血压、意识障碍时间>48 h、血CO暴露时间延长、血碳氧血红蛋白(COHb)饱和度升高及血清sST2、Caspase-3、HSP70水平升高是ACMP患者发生DEACMP的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清sST2、Caspase-3、HSP70联合检测诊断ACMP患者发生DEACMP的AUC为0.913,大于sST2、Caspase-3、HSP70单项检测诊断ACMP患者发生DEACMP的AUC(分别为0.783、0.788、0.785),差异有统计学意义(P<0.05)。结论ACMP患者血清sST2、Caspase-3、HSP70水平升高,与中毒程度和DEACMP发生有关,血清sST2、Caspase-3、HSP70水平联合检测诊断ACMP患者发生DEACMP的价值较高。