Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1对过氧化氢诱导的晶状体上皮细胞凋亡与自噬的影响

目的探究Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1(NEIL1)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的晶状体上皮细胞(LECs)凋亡与自噬的影响。方法以年龄相关性白内障(ARC)患者、接受透明晶状体摘除术的黄斑前膜患者的晶状体前囊膜样本和晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞为研究对象,采用RT-PCR实验检测NEIL1 mRNA表达。将SRA01/04细胞随机分为对照组、OE-Vector组和OE-NEIL1组,采用RT-PCR和Western blot检测过表达效率;将细胞随机分为对照组、H_(2)O_(2)组、OE-Vector H_(2)O_(2)组、OE-NEIL1 H_(2)O_(2)组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测自噬相关蛋白(ATG7、P62、Beclin1、LC3-I和LC3-II)和凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达,荧光染色检测细胞凋亡与线粒体膜电位情况。结果ARC患者晶状体前囊膜样本中的NEIL1 mRNA表达显著低于黄斑前膜患者,且H_(2)O_(2)组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA的表达同样低于对照组(均为P<0.05)。RT-PCR与Western blot检测结果显示,OE-NEIL1组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA和蛋白表达均显著高于OE-Vector组(均为P=0.000)。与对照组相比,H_(2)O_(2)组SRA01/04细胞中细胞活力显著降低;Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调;Mito-Tracker标记活细胞数显著减少,Annexin V-FITC标记的凋亡细胞数显著增多,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与OE-Vector H_(2)O_(2)组相比,OE-NEIL1 H_(2)O_(2)组SRA01/04细胞中细胞活力显著升高;自噬相关蛋白(ATG7、P62、Beclin1、LC3-I和LC3-II)表达均显著上调;Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调;Mito-Tracker标记的活细胞数增加,Annexin V-FITC标记的凋亡细胞数减少,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论在H_(2)O_(2)诱导氧化应激条件下,NEIL1可通过促进LECs的自噬,维持LECs内环境稳定,增加其细胞活力从而减少LECs凋亡,参与ARC的发生发展。

糖蛋白96、Raf-1和Nei内切核酸酶Ⅷ样蛋白2表达与鼻咽癌患者放射治疗敏感性的相关性

目的探讨糖蛋白96(gp96)、Raf-1及Nei内切核酸酶Ⅷ样蛋白2(NEIL2)在鼻咽癌(NPC)组织中的表达及其与放射治疗敏感性的相关性。方法选择2017年12月至2019年12月河南科技大学附属许昌市中心医院收治的125例疑似NPC患者为研究对象,根据病理组织学检查结果确诊为NPC 65例,鼻咽炎60例(对照组)。65例NPC患者确诊后均行放射治疗,放射治疗后根据治疗效果将患者分为放射治疗敏感组(n=48)和放射治疗抵抗组(n=17)。采用免疫组织化学法检测NPC组织和鼻咽炎患者鼻咽部黏膜组织中gp96、Raf-1及NEIL2蛋白的表达,采用Kendall分析gp96、Raf-1及NEIL2蛋白与NPC患者放射治疗敏感性的关系。结果放射治疗敏感组和放射治疗抵抗组患者NPC组织中gp96、Raf-1、NEIL2蛋白表达显著高于对照组,放射治疗抵抗组患者NPC组织中gp96、Raf-1、NEIL2蛋白表达显著高于放射治疗敏感组(P<0.05)。Kendall相关分析结果显示,gp96、Raf-1及NEIL2蛋白表达与NPC患者的放射治疗敏感性均呈显著负相关(r=-0.323、-0.618、-0.396,P<0.01)。结论NPC组织中gp96、Raf-1和NEIL2蛋白高表达,且gp96、Raf-1和NEIL2蛋白表达水平与NPC的放射治疗敏感性呈负相关,抑制gp96、Raf-1和NEIL2蛋白表达有望提高NPC的放射治疗敏感性。

Nei内切核酸酶Ⅷ样蛋白3在肝细胞癌中过表达提示免疫浸润水平增高和预后不良

目的通过癌症基因组图谱数据库评估Nei内切核酸酶Ⅷ样蛋白3(NEIL3)在肝细胞癌(HCC)中的作用及其分子机制。方法先用HCC样本的RNA测序数据分析基因NEIL3在正常组织和肿瘤中的表达水平。再通过基因本体论、京都基因与基因组百科全书、基因富集分析、免疫细胞浸润分析以对NEIL3进行功能和通路富集分析。根据NEIL3在肝癌组织的中位表达水平,将样本分为高表达组和低表达组,通过logistic回归分析、Kaplan-Meier分析、单因素和多因素Cox回归分析以及列线图预后模型探讨NEIL3在HCC中的临床及预后意义。结果与正常样本相比,NEIL3在包括HCC在内的大部分恶性肿瘤中高表达(P<0.05)。NEIL3高表达与细胞周期、DNA复制和细胞受体途径有关。此外,NEIL3高表达与辅助性T细胞2(Th2)的浸润水平呈显著正相关(R=0.670,P<0.001)。和NEIL3低表达组相比,NEIL3高表达患者肿瘤组织Th2细胞浸润水平更高(P<0.001)。Logistic回归分析显示NEIL3过表达与HCC的高T分期、高病理分期、高组织学分级、甲胎蛋白>400μg/L和血管浸润有关。Kaplan-Meier分析结果显示:NEIL3高表达患者的总体生存期[风险比(HR)=2.53,P<0.001]、疾病特异性生存期(HR=2.52,P<0.001)、无进展间隔期(HR=1.82,P<0.001)显著缩短,提示NEIL3高表达HCC患者预后更差。Cox回归分析结果显示:NEIL3高表达是HCC患者不良预后的一个独立危险因素(P=0.002)。列线图及校准图进一步说明NEIL3高表达是HCC患者预后不良危险因素之一。结论NEIL3表达升高与HCC不良预后和免疫细胞比例增加相关,其有望作为评估HCC预后和免疫浸润水平的潜在生物标志物。

基于生物信息学分析NEIL3在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:基于生物信息学分析Nei核酸内切酶Ⅷ样3(Nei endonucleaseⅧ-like 3,NEIL3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达和临床意义。方法:利用TCGA数据库的mRNA数据和临床数据分析NEIL3在肝细胞癌中的表达和临床意义。使用GEPIA和Kaplan-Meier数据库分析NEIL3表达对HCC患者预后的影响。使用UALCAN和cBioPortal数据库分析NEIL3在HCC中的甲基化水平。使用STRING、Metascape和LinkedOmics探索NEIL3在HCC中的潜在作用机制。结果:与正常组相比,NEIL3在HCC显著高表达。临床相关性分析结果显示,NEIL3表达与患者的病理分期及肿瘤大小呈负相关。Kaplan-Meier生存曲线显示,NEIL3高表达与HCC患者较差的总体生存期、无病生存期、无进展生存期、无复发生存期有关。表观遗传学研究发现,NEIL3基因的低甲基化可能是NEIL3在HCC中表达上调的原因之一。功能富集分析发现,NEIL3可能通过参与细胞周期、DNA复制、同源重组、错配修复、p53信号通路、碱基切除修复、剪接体和乙型肝炎相关等信号通路促进HCC发生发展。结论:生物信息学分析显示,NEIL3在HCC组织中显著高表达,且与患者的不良临床结局相关,可作为HCC的潜在治疗靶点和预后生物标志物。

湖北和河南地区汉族人群NEIL3 rs12645561多态性与冠状动脉硬化严重程度的相关性研究

目的评估湖北和河南两地区汉族人群Nei核酸内切酶VIII样蛋白3(NEIL3)基因rs12645561多态性位点与冠状动脉硬化严重程度的相关性。方法以947例经冠状动脉造影病例为研究对象,采用病变支数得分和Gensini得分评估冠状动脉硬化严重程度;采用高分辨率熔解曲线进行rs12645561基因分型;ELISA法检测血浆NEIL3蛋白水平。结果 rs12645561 T风险等位可增加冠心病风险(χ2=12.165,P<0.05),并与病变支数得分和Gensini得分明显相关(χ2分别为14.745和15.615,P<0.05);rs12645561 CT+TT风险基因型、体重指数>25 kg/m2、高脂血症和吸烟是Gensini得分增高的独立危险因素(OR分别为1.50、1.54、2.01、1.42,P<0.05);血浆NEIL3蛋白表达水平与rs12645561基因型分布、病变支数得分和Gensini得分呈负相关(P<0.05)。结论 rs12645561与湖北和河南地区冠状动脉硬化严重程度密切相关,并可影响NEIL3蛋白表达。

结直肠癌MRI、CT诊断及其与IGFBP-3、APE1-AAbs联合诊断的价值研究

目的探讨MRI/CT与血清胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin-like growth factor binding protein 3, IGFBP-3)、脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1自身抗体(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1autoantibodies, APE1-AAbs)联合应用在结直肠癌诊断中的价值。方法选取2015年4月-2018年2月在我院行手术治疗127例经手术病理证实的结直肠癌患者作为研究对象,患者行MRI/CT检查,选择同期在我院进行健康体检的75例健康体检者为对照组,检测并比较血清IGFBP-3、APE1-AAbs水平,分析MRI/CT结果,根据血清IGFBP-3、APE1-AAbs检测水平将所有患者进行分组,比较MRI/CT在不同分组中的诊断效能。结果结直肠癌组患者血清IGFBP-3为(2.86±1.31)μg/ml,APE-AAbs为2.79(1.14～9.61);对照组研究对象血清IGFBP-3为(4.72±1.14)μg/ml,APE-AAbs为1.91(0.78～5.52),结直肠癌组患者血清IGFBP-3水平显著低于对照组,APE-AAbs水平显著高于对照组(P<0.05)。根据血清IGFBP-3、APE1-AAbs检测水平将所有患者分为IGFBP-3/APE1-AAbs异常组(45例)和IGFBP-3/APE1-AAbs正常组(82例),IGFBP-3/APE1-AAbs正常组中MRI/CT诊断准确度为66.67%;IGFBP-3/APE1-AAbs异常组中MRI/CT诊断准确度为89.02%,比较差异具有均具有统计学意义(P<0.05)。结论结直肠癌患者血清IGFBP-3呈低表达,APE1-AAbs呈高表达,两者血清水平检测对结直肠癌均具有辅助诊断价值,此外,MRI/CT在IGFBP-3降低或APE1-AAbs升高组结直肠癌的诊断中准确性更高,MRI/CT影像学检查和血清IGFBP-3、APE1-AAbs水平检测联合应用可提高结直肠癌的诊断效能。