C57BL/6小鼠的血循环DNA的定量研究

目的探讨循环DNA的定量检测在荷瘤C57BL/6小鼠中的应用价值。方法以异位接种法在C57BL/6小鼠中建立B16黑色素瘤肝转移模型,以”微量基因组抽提试剂盒”抽提血清DNA,用SYBR Green I斑点荧光染色法对DNA进行定量。结果在正常小鼠中,血循环DNA为(62.4±25.52)ng/mL、荷瘤伴有肝转移小鼠为(241±73.7)ng/mL(P<0.01);小鼠的血循环DNA水平与小鼠肝转移的分期相关,I期、Ⅱ期肝转移小鼠分别为(131.11±54.32)ng/mL和(170±10.96)ng/mL, Ⅲ期、Ⅳ期小鼠为(235±85.54)ng/mL和(271±65.76)ng/mL。用健脾理气中药抑制肿瘤生长和转移的同时,荷瘤小鼠血循环DNA也同步下降。结论循环DNA定量检测能客观反应小鼠荷瘤程度,并能动态反应药物的疗效,是一具有应用前景的肿瘤标志物。

足跟部黑素瘤手术切除游离植皮治疗2例

对2例足跟部的恶性黑素瘤进行的手术治疗方式采取了病灶切除后植皮，切除范围距病灶25～3cm，深度为切除所有皮下组织，移植皮肤取自大腿部，术后移植区皮肤完全存活，随访无复发。

吐温80合并温热对小鼠实体瘤及腹腔主要脏器结构的影响

目的:研究质膜作用药物吐温80合并温热对荷瘤鼠的抑瘤效果及主要腹部脏器的影响。方法:小鼠腹腔接种B16黑色素瘤细胞,建立实体瘤瘤模型,经尾静脉给予吐温80和进行腹部41℃60分钟加温处理,观测荷瘤动物存活时间、实体瘤及重要脏器的光镜、超微结构和组织化学的变化。此外,对琥珀酸脱氢酶(SDH)及5-核苷酸酶(5-NPasc)进行了活性检测。结果:吐温80与41℃温热合并可明显提高小鼠存活时间。可致肿瘤组织血管阻塞,肿瘤细胞广泛坏死;形态学表现与程序性细胞死亡的形态学描述相似。对肝、肾、脾等正常组织的结构和SDH、5-核苷酸酶活性影响较轻,且可恢复。41℃温热或吐温80单独无显著作用。结论:吐温80合并温热具有明显协同杀伤肿瘤效应。并对肿瘤显示选择性作用。

经绿色荧光蛋白基因修饰的人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1-gfp的生物学行为与基因表达

目的研究经绿色荧光蛋白(GFP)基因修饰的人脉络膜黑色素瘤细胞株OCM-1-gfp在小鼠体内的生长过程、转移规律,以及可能影响肿瘤生长和转移的因素。方法用脂质体将GFP基因导入人脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1,建立稳定、高水平表达GFP的克隆;分别接种到Balb/c裸鼠视网膜下和后大腿皮下,建立原位和异位肿瘤模型。眼内肿瘤生长情况用荧光显微镜直接观察,皮下肿瘤大小用游标卡尺测量;采用免疫组织化学方法对肿瘤内13种基因的表达进行检测。结果稳定表达GFP的脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1-gfp基本保持了亲代细胞的特征;能在裸鼠体内形成肿瘤并继续生长和转移;在基因表达方面,肿瘤抑制基因p16染色呈阴性,p53染色呈强阳性。其他的肿瘤抑制基因:视网膜母细胞瘤易感基因(Rb)、p21,转录调控因子(E2F)、核因子κB(NFκB),细胞增生相关基因细胞周期素D1(cyclin D1)、增生细胞核抗原(PCNA),细胞凋亡相关基因bcl-2、bcl-XL/S和bax,以及表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)呈现不同程度的阳性表达。结论GFP为直接观察脉络膜黑色素瘤在体内的生长和转移提供了标记;脉络膜黑色素瘤原位与异位移植瘤模型在成瘤率和生长情况方面无明显差异;由OCM-1-gfp生长形成的肿瘤p16、p53及NFκB、cyclin D1、PCNA及EGF和EGFR等多种基因表达异常。