Genetic Diversity of Lotus(Nelumbo nucifera Gaertn.) Cultivars Revealed by ISSR Analysis

[ Objectives ] This study was conducted to investigate the genetic diversity of 20 lotus （Nelumbo nucifera Gaertn） samples. [ Methods ] On this optimal ISSR amplification system, 16 primers were screened with good polymorphism, and the DNA was used to amplify the 20 plant samples. [ R^ults] The 16 primers produced 225 loci, of which 170 were polymorphic, and the polymorphic loci percentage was up to 75.56%. The genetic similarity coefficients between the 20 vari- eties ranged from 0. 577 8 to 0.951 1, which were calculated by POPGENE32. The 20 varieties by UPMGA analysis could be clustered into 2 groups, the first of which included Baiyangdian red lotus and Donggua lotus, and other varieties was included in the second group. [ Conchmions] ISSR molecular markers could be effectively used in genetic diversity and fingerprint analysis for different lotus varieties.

山东莲藕(Nelumbo nucifera Gaertn.)种质资源的RAPD鉴定和遗传多样性分析

山东莲藕(Nelumbo nucifera Gaertn.)栽培历史悠久,在中国北方具有重要影响。但是,山东莲藕种质资源研究一直没有开展。为收集和保存莲藕种质资源,本研究从山东省8个种植面积较大的地区采集了76份莲藕材料,并利用RAPD分子标记对这些材料进行了遗传相似性分析,共鉴定出38份种质资源。遗传多样性指数分析显示,38份种质资源的Nei's多样性指数(H)平均值为0.26,Shannon信息指数(I)平均值为0.41。研究数据表明,山东莲藕种质资源相对丰富,但要建立高质量的种质资源圃,仍需要加强种质资源的引进。

莲藕膨大过程中碳水化合物变化的初步研究

在莲藕膨大过程中,测定其干物质、淀粉、可溶性总糖、还原糖、可溶性蛋白质等含量,研究碳水化合物的变化规律。结果表明:干物质、淀粉和可溶性蛋白质含量在莲藕膨大过程中均逐渐上升,至膨大后期有一个急增过程;还原糖含量先有所上升,膨大中期迅速下降,至膨大后期维持较稳定水平;可溶性总糖含量从膨大始期至膨大中期平缓上升,至膨大后期则迅速增加。莲藕根状茎的储藏物质主要为淀粉。

莲藕部分种质资源数量性状的聚类分析与育种应用

对 17个不同地区、不同类型的莲藕资源进行了系统聚类分析 ,将莲藕分为野生资源类、地方品种资源类和改良品种类三大类群。品质性状野生资源最优 ,地方品种和改良品种相当 ;农艺性状改良品种最优 ,地方品种居中 。

不同干燥方式对莲藕脆片品质的影响

为明确休闲莲藕脆片的最佳干燥方式,采用热风干燥、真空微波干燥、热风-真空微波干燥、热风-气流膨化干燥、真空微波-气流膨化干燥、热风-真空微波-气流膨化干燥6种不同的干燥方式对莲藕片进行干燥后,对所得脆片的色泽、收缩率、硬度、脆度、VC保留率、多酚保留率以及微观结构等品质指标进行分析。结果表明:热风干燥对莲藕脆片色泽影响不大,但硬度过低,脆度差,VC和多酚损失最为严重;真空微波干燥莲藕脆片VC和多酚保留率高,脆性好,但硬度过高,产品皱缩严重,色差和褐变度高;4种不同联合干燥方式生产的莲藕脆片品质较单一干燥的产品均有所改善,其中,热风-真空微波-气流膨化干燥的莲藕片收缩程度和褐变程度较真空微波干燥显著降低,而VC和多酚保留率较热风干燥显著升高,硬度、脆度均适中,多孔性好。综上所述,热风-真空微波-气流膨化干燥是最适宜加工莲藕休闲脆片的方法。

莲子心脂溶性生物碱的分离、鉴定

为进一步分离并鉴定保健食品莲子心中活性脂溶性生物碱,根据脂溶性成分和酚性生物碱的化学性质,先将莲子心脂溶性成分提取、分离酚性和非酚性二个部位;再运用多种柱色谱技术分别对这二个提取部位进行分离纯化,并对所得化合物的理化性质和光谱数据(UV,IR,MS,~1H NMR、^(13)C NMR及其2D-NMR)进行分析归纳,最终确定它们的化学结构。从莲子心脂溶性部位共获得12个单体化合物,经鉴定其中10个成分为生物碱。酚性部位有6个化合物,分别为:l-薄荷醇(l-menthol,1),甲基莲心碱(neferine,2),亚美罂粟碱(amepavine,3),4'-甲氧基-N-甲基衡州(4'-methoxy-N-methyl coclaurine,4),异莲心碱(isoliensinine,5),莲心碱(liensinine,6);非酚性部位有6个化合物,分别为:谷甾醇(sitosterol,7),荷叶碱(nuciferine,8),前荷叶碱(pronuciferine,9),莲明碱(lysicamine,10),N-甲氧基头花千金藤二酮B(N-methoxycepharadione B,11)和N-甲基紫堇定(N-methylcordaldine,12)。其中1、4、10、11和12则为该植物中首次发现的化合物。

离子对反相HPLC法测定10个产地莲子心中莲心碱的含量

目的 建立用离子对反相 HPL C法测定莲子心药材中莲心碱含量的方法。方法 选用 ODS色谱柱 ,流动相为甲醇 -水 -冰醋酸 -辛烷磺酸钠 -乙酸钠 (5 5∶ 45∶ 0 .6∶ 10 m mol/ L∶ 5 m mol/ L ) ,检测波长 2 82 nm ,流速为1.0 m L/ min,柱温为 40℃。结果 莲心碱在 0 .0 0 5～ 0 .146 m g/ m L范围内 ,线性关系良好 (r=0 .9999) ;平均回收率为 10 0 .6 % ,RSD为 1.2 1% (n=6 )。结论 该法准确 ,快速 ,灵敏 ,重现性好 。

钾素营养对莲藕生长和干物质累积的影响

采用大盆试验研究了钾素营养对莲藕生长和干物质累积的影响,结果表明,钾素营养明显增加莲藕立叶数量和立叶面积、提高立叶相对叶绿素值和组织器官含水量、延缓叶片衰老、增强立叶抗逆性,从而促进莲藕生育前期光合产物的累积和健康生长;钾素营养还适当延长莲藕成熟期,促进干物质从叶片转移并贮存到产品中,使莲藕增产20.4%。

乳状液膜分离提取荷叶中3种生物碱

建立了用W/O型乳状液膜分离提取荷叶中3种生物碱——N-去甲基荷叶碱、O-去甲基荷叶碱和荷叶碱的方法。通过对迁移时间、表面活性剂Span 80用量、载体D2EHPA浓度、油内比、乳水比和内水相盐酸浓度的优化,获得了高效的液膜体系,为:迁移时间2.5 min,表面活性剂Span 80的质量分数为3.0%,载体D2EHPA的浓度为0.01 mol/L,油内比为10∶6,乳水比为10∶60,内水相盐酸浓度为0.2 mol/L。在优化的实验条件下,对荷叶中3种生物碱N-去甲基荷叶碱、O-去甲基荷叶碱和荷叶碱的萃取率分别达到了95.6%、100%和97.9%,相应的富集因子依次为8.73、8.50和8.04。说明该乳状液膜体系能够很好地分离提取荷叶中的N-去甲基荷叶碱、O-去甲基荷叶碱和荷叶碱。

荷花SRAP-PCR反应体系的优化与确立

以荷花(Nelumbo nucifera Gaertn)品种‘新红’叶片为材料,采用L16(45)正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物和模板DNA用量5因素进行了优化,并确立了适用于荷花SRAP-PCR的最佳反应体系。结果表明:荷花的SRAP-PCR最佳反应体系为:反应总体积10μL,包含2.0 mmol.L-1 Mg2+、300μmol.L-1 dNTPs、0.5 UTaqDNA聚合酶、4μmol.L-1上下游引物、50 ng DNA及10×PCR Buffer。各因素水平变化对反应体系影响由大到小依次为:TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs、DNA。用48个荷花品种对优化的SRAP-PCR反应体系进行验证,均获得了条带清晰、多态性丰富的扩增图谱,证实了该体系的稳定性和适应性。

LC/MS/MS鉴定莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物

目的：应用LC/MS/MS鉴定去甲乌药碱、莲心碱、异莲心碱、荷花碱4种莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物,推测其代谢途径。方法：100μmol/L生物碱作用Caco-2细胞3～12 h后收集并纯化样品,采用LC/MS/MS分析鉴定代谢产物。结果：去甲乌药碱的代谢产物有甲基化去甲乌药碱和去甲乌药碱葡萄糖醛酸苷;莲心碱和异莲心碱的代谢产物分别是去甲基莲心碱和去甲基异莲心碱;荷花碱的主要代谢物为莲心碱、异莲心碱和它们的进一步去甲基产物。结论：LC/MS/MS操作简便,可快速鉴定Caco-2细胞中的莲子心生物碱的代谢产物。莲子心生物碱主要代谢途径有甲基化、去甲基化和葡萄糖醛酸化。

经低温锻炼后荷花不同品种对低温胁迫的生理响应差异分析

以荷花（Nelumbo nucifera Gaertn.）品种‘太湖红莲’（‘Taihu Honglian’）和‘荷塘情深’（‘Hetang Qingshen’）为实验材料,以MDA含量、相对电导率、脯氨酸含量、可溶性糖含量、SOD活性和POD活性为指标,对经过5℃低温锻炼10 h后2个品种地下茎对0℃低温胁迫（0、2、4、6、8和10 h）的生理响应差异进行了分析,并比较了低温锻炼对2个荷花品种抗寒性的影响。结果表明：在低温胁迫条件下,随低温胁迫时间的延长（0~10 h）,经低温锻炼的荷花品种‘太湖红莲’和‘荷塘情深’地下茎的MDA含量和相对电导率总体上呈逐渐升高的变化趋势,可溶性糖含量均呈“升—降—升”的变化趋势,SOD活性基本呈“升—降—升—降”的变化趋势,而POD活性则呈先上升后微幅波动的变化趋势;二者的脯氨酸含量变化趋势有一定差异,其中,前者的脯氨酸含量逐渐上升,而后者的脯氨酸含量则先升后降。经低温锻炼后,在低温胁迫条件下2个荷花品种的6项生理指标均与对照组（未进行低温锻炼）有一定差异;其中,品种‘太湖红莲’地下茎的MDA含量和相对电导率在低温胁迫的4~10 h均显著低于对照组,品种‘荷塘情深’地下茎的相对电导率在低温胁迫的2~8 h显著低于对照组,但其MDA含量则与对照组无显著差异;2个品种地下茎的脯氨酸含量和可溶性糖含量总体上显著高于对照组,而二者的SOD活性和POD活性也总体上高于对照组。综合分析结果显示：低温锻炼有助于减轻低温胁迫对荷花地下茎膜系统的伤害、增加细胞内渗透调节物质的含量、提高抗氧化酶活性,在一定程度上提高了荷花的抗寒性;经低温锻炼后品种‘太湖红莲’抗寒性的增幅大于品种‘荷塘情深’。

7个荷花品种光合特性的研究

使用LCpro+便携式植物光合测量系统对7个荷花品种的光合特性日变化及其光合-光响应曲线进行研究。结果表明:7个荷花品种的光合特性日变化没有明显的"午休"现象,其光补偿点在3.99～12.45μmol/(m2.s),光饱和点在699.37～855.00μmol/(m2.s),表观量子效率在0.034 2～0.043 3μmol/(m2.s)。品种间光合特性存在一定差异。

大孔吸附树脂分离纯化荷叶中阿朴啡类生物碱

目的优化大孔吸附树脂分离纯化荷叶中阿朴啡类生物碱的洗脱条件。方法采用大孔吸附树脂柱色谱法,以不同体积分数甲醇水溶液进行洗脱,分离富集阿朴啡类生物碱,并配以HPLC进行同步监控。结果基于不同体积分数甲醇水洗脱液对各种阿朴啡类生物碱洗脱能力不同,采用70%、80%、95%甲醇水溶液进行梯度洗脱,荷叶中3种主要的阿朴啡类生物碱得到了分离富集。70%甲醇水溶液洗去目标物以外的杂质后,75.58%的N-降荷叶碱和65.03%的O-降荷叶碱富集于80%甲醇水洗脱液中,69.46%荷叶碱富集于95%甲醇水洗脱液中。各洗脱液分别蒸干后得固体,N-降荷叶碱和O-降荷叶碱在相应的固体中质量分数分别为44.01%、7.61%。荷叶碱在相应的固体中质量分数为68.52%。结论此方法操作简单、重复性好,能有效分离富集荷叶中阿朴啡类各种生物碱。

莲心碱对心肌慢反应动作电位及慢内向电流的影响

莲心碱(Lien)10～100μmol/L可浓度依赖性地降低离体兔窦房结(SAN)起搏细胞慢反应动作电位幅度(APA)及零相最大上升速率((?)_(max)),延长窦性周长(SCL),并可明显拮抗Bay K 8644增大SAN起搏细胞及高K^-诱发的豚鼠乳头肌慢反应动作电位的APA和((?)_(max))作用。Lien 1～100 μmol/L还可浓度依赖性地抑制犬浦氏纤维慢内向电流(I_(si)),3和100μmol/L分别使I_(si)峰值下降14和88%。结果表明Lien具有抗钙作用。

低洼田湿地“植-鱼”种养结合模式对莲藕、菱生长发育及品质的影响

本研究通过对＂藕-鱼＂、＂菱-鱼＂共生种养结合模式下莲藕、南湖菱生长发育、品质及食品安全性的比较,研究了不同种养结合模式下水生蔬菜的生长发育、品质等的差异。结果表明：低洼田湿地农业＂藕-鱼＂共生种养结合模式莲藕的生长发育、产品商品性较单种藕对照有所提高,＂莲藕-鲫鱼、黄颡＂、＂莲藕-黄颡、泥鳅＂和＂莲藕-乌鳢＂3种种养模式较单种对照莲藕叶片长增加1.2%~38.2%,叶片宽增加-8.6%~30.9%,叶柄长增加10.1%~33.2%;莲藕的产品商品性较单种对照明显提高,全藕重较单种对照增加19.0%~77.8%,最大藕节重增加22.0%~77.5%;营养品质中,3种模式种养结合后莲藕产品淀粉含量较单种藕对照增加23.3%~34.0%,＂莲藕-鲫鱼、黄颡＂和＂莲藕-黄颡、泥鳅＂两种模式中粗蛋白含量分别较单种对照提高5.4%和47.3%,氨基酸总量分别较对照提高11.3%和48.7%,但＂莲藕-乌鳢＂模式中,莲藕产品的粗蛋白含量和氨基酸总量均较单种对照略有降低。＂菱-鳖＂种养结合模式中,虽然南湖菱的营养品质较鱼塘单种菱对照略有下降,但南湖菱的生长发育性状和商品性均有提高,＂菱-乌鳢＂种养结合对南湖菱生长发育虽有一定抑制作用,但产品商品性、营养品质较对照也均有所提升。＂植-鱼＂共生种养结合,对莲藕和南湖菱的食品安全性指标包括农药残留以及有毒重金属含量等均无明显影响。

10个藕莲品种SSR指纹图谱的构建与品种鉴别

在开发出莲基因组SSR引物对的基础上,采用SSR分子标记技术尝试鉴别10个藕莲推广品种。筛选出16对SSR有效引物进行PCR扩增,其中6对引物CL1、CL2、CL4、CL9、CL14、CL16共扩增出15条多态性条带,对所得到的10个藕莲品种的SSR指纹图谱进行组合和综合分析,可以将供试的10个品种区分开来。表明利用SSR技术进行藕莲品种鉴定是可行而有效的。

莲藕片真空微波联合气流膨化干燥工艺

为优化莲藕片真空微波-气流膨化联合干燥工艺,本试验在单因素试验的基础上,采用三因子二次正交旋转组合设计,探讨了单位质量微波功率、转换点含水率和膨化温度对产品的亮度、硬度、脆度和水分含量的影响,并对变量进行了响应曲面分析。结果表明:单位质量微波功率、转换点含水率和膨化温度对莲藕脆片的品质指标有显著影响。真空微波联合气流膨化干燥莲藕片工艺的最优参数组合为:单位质量微波功率12.48W·g-1,转换点含水率48.73%,膨化温度86.56℃。优化莲藕片的生产工艺可为莲藕片工业化生产提供参考。

湖北省莲藕品种演变及栽培利用特点

湖北省是莲藕起源地之一,亦为我国莲藕重要产区。其品种演变历史可划分为传统品种阶段(1980年以前)、新品种选育的起步和奠基阶段(1980～1990年)、传统品种更新和新品种快速推广与持续选育时期(1990年以后)。不仅拥有许多传统品种,而且选育了多个新品种,是我国莲藕新品种的主要选育地区。在莲藕茬口配置、设施栽培、种藕繁殖、采挖以及莲藕产品开发利用等方面具有明显的地方特色。

广昌白莲微生物发酵产物多肽的抗氧化活性研究

广昌白莲(Nelumbo nucifera Gaertn)具有高蛋白、低脂肪、氨基酸含量丰富等特点,蛋白降解后的小分子多肽既利于吸收且具有新的功能。本实验主要利用菌种发酵中产生的蛋白酶水解白莲蛋白质,以水解度作为指标,对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵白莲的条件进行了优化,经葡聚糖凝胶G-25对发酵产物进行分离并检测多肽对羟自由基的清除活性。结果表明,在白莲粉4%、麸皮1%、接种5%、37℃、120r/min、发酵48h的条件下,水解度可达49.2%。此时发酵液对羟自由基的清除率为65.6%。此发酵液经凝胶层析后各吸收峰具有不同羟自由基的清除能力,吸收峰3具最高羟自由基的清除率,达85.2%。实验证明,广昌白莲多肽具有较高的羟自由基清除活性,在食品和医药上均具有应用前景。