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Fusion of Neo Gene-transferred Rabbit Reticulocytes and K562 Cells: a New Approach to Rapid Selection and Characterization of Cybrids
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作者 马文丽 薛社普 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1993年第21期1826-1832,共7页
By applying the technique of cybridization between reticulocytes and myeloma cells, we reported that the erythroid cell cytoplasms had some regulatory effects upon the malignancy of the myeloma. Though such a method p... By applying the technique of cybridization between reticulocytes and myeloma cells, we reported that the erythroid cell cytoplasms had some regulatory effects upon the malignancy of the myeloma. Though such a method produces reliable results, to establish inducible cytogenetic mutations in myeloma cells, to select the HGPRT^- mutants and finally to select the cybrids through HAT medium, however, still need a lot of time. Recently, by using gene transfer techniques, new selectable genetic markers could be introduced into cells directly, this provides an alternative new way to make cellular hybrids. Yet up to now, the host cells for gene transfer are all the kind of cells with nuclei. Here, by 展开更多
关键词 neo gene rabbit reticnlocytes K562 cell line gene transfer cellular HYBRIDIZATION
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通过胚胎干细胞途径获得的嵌合体小鼠中neo基因在各组织中的分布 被引量:2
2
作者 姚玉成 熊俊 +2 位作者 王新民 李建秀 胡以平 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1116-1119,T001,共5页
为探讨小鼠胚胎干细胞参与早期胚胎发育的潜能 ,以neo基因作为目的基因进行了胚胎干细胞的转染 ,经G41 8的筛选 ,获得表达neo基因的单克隆细胞 ,挑取部分克隆扩大 ,进行小鼠囊胚腔注射 ,再重新植入小鼠子宫 ,共注射了 60个囊胚 ,分别回... 为探讨小鼠胚胎干细胞参与早期胚胎发育的潜能 ,以neo基因作为目的基因进行了胚胎干细胞的转染 ,经G41 8的筛选 ,获得表达neo基因的单克隆细胞 ,挑取部分克隆扩大 ,进行小鼠囊胚腔注射 ,再重新植入小鼠子宫 ,共注射了 60个囊胚 ,分别回输到 5只假孕小鼠 ,在子代中得到了携带有neo基因的嵌合体小鼠。通过对嵌合体小鼠各组织PCR分析发现 ,neo基因可以在皮肤、肝脏。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 neo基因 嵌合体小鼠 组织分布
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内含子中正筛选标记neo基因在转录中的剪切研究 被引量:1
3
作者 孙世惠 周艳荣 +3 位作者 陈红星 林艳丽 黄培堂 邓继先 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期859-861,共3页
目的:研究插入内含子中的正筛选标记基因neo在转录中的剪切情况。方法:克隆了猪血清白蛋白基因5'端调控序列,以猪基因组DNA为模板,P10/P11为引物,PCR扩增猪血清白蛋白基因翻译终止密码子后2.9kb的3'端调控序列;以pEGFP-1为模板,... 目的:研究插入内含子中的正筛选标记基因neo在转录中的剪切情况。方法:克隆了猪血清白蛋白基因5'端调控序列,以猪基因组DNA为模板,P10/P11为引物,PCR扩增猪血清白蛋白基因翻译终止密码子后2.9kb的3'端调控序列;以pEGFP-1为模板,P400/P401为引物PCR扩增绿色荧光蛋白(EGFP)基因,插入猪血清白蛋白基因5'端调控区之后,在3'端调控序列的内含子中靠近N端的序列中插入正筛选标记基因neo,构建了表达EGFP的真核表达载体pEXp11。转染人肝癌细胞系HepG2,通过G418药物筛选获得稳定转染的抗药性细胞克隆。提取抗性细胞克隆基因组RNA并进行反转录,获得cDNA序列。结果:用引物D400/D401及分别位于neo基因和3'端调控序列上的一对引物D394/D357进行PCR检测,其中D394/D357并未扩增出目的条带。结论:插入内含子中的neo基因在转录过程中可随内含子一起被剪切。 展开更多
关键词 neo基因 猪血清白蛋白基因 RT-PCR
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逆转录病毒介导的标记基因neo导入恒河猴原代肌肉母细胞的实验研究
4
作者 高春记 赵华 《军医进修学院学报》 CAS 2003年第2期117-119,共3页
目的 :探索逆转录病毒介导的neo基因导入恒河猴原代肌肉母细胞的转染条件和方法。方法 :逆转录病毒上清在不同条件下与肌肉母细胞共同培养 ,观察肌肉母细胞体外增殖情况 ;用免疫荧光染色和流式细胞仪分析在转染过程中肌肉母细胞的表型Th... 目的 :探索逆转录病毒介导的neo基因导入恒河猴原代肌肉母细胞的转染条件和方法。方法 :逆转录病毒上清在不同条件下与肌肉母细胞共同培养 ,观察肌肉母细胞体外增殖情况 ;用免疫荧光染色和流式细胞仪分析在转染过程中肌肉母细胞的表型Thy 1,NCAM和Desmin的变化 ;克隆PCR分析不同情况下导入基因的转染率和评价导入靶细胞标记基因的稳定性。结果 :含有 2 0 %FCS ,5 %鸡胚液的F10细胞培养液培养肌肉来源的干细胞能获得高纯度的肌肉母细胞Thy 1(85 0± 5 0 ) % ,NCAM (96 7± 5 8) % ,Desmin (95 7± 2 1) % ,而且这些表型不受转染的影响 ;持续暴露于病毒载体上清抑制肌肉母细胞的体外增殖 ;每天肌肉母细胞暴露于病毒载体上清 6h ,可获得 (6 3 9± 7 3) %的转染率 ,而且细胞体外增殖不受影响 ,转染后继续体外培养 2个月 ,转染率不下降。结论 :逆转录病毒介导的neo基因能高效率的导入肌肉母细胞 ,而且能稳定地整合到细胞DNA内 。 展开更多
关键词 逆转录病毒介导 标记基因neo 恒河猴 原代肌肉母细胞 实验研究
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纯合子NEO^r转基因小鼠品系的建立及鉴定 被引量:3
5
作者 曲玉秀 汤家铭 +2 位作者 连安 刘铁铮 成国祥 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2004年第2期76-80,共5页
目的 建立清洁级Neor 转基因小鼠纯合子品系。方法 通过胚胎移植生物净化方法获得 1 0只清洁级NeorF1 小鼠 ,按孟德尔遗传法则交配 ,用PCR、Southernblot杂交和交配实验检测相结合的方法筛选纯合子。结果 选育出 4只纯合子 ,并建系... 目的 建立清洁级Neor 转基因小鼠纯合子品系。方法 通过胚胎移植生物净化方法获得 1 0只清洁级NeorF1 小鼠 ,按孟德尔遗传法则交配 ,用PCR、Southernblot杂交和交配实验检测相结合的方法筛选纯合子。结果 选育出 4只纯合子 ,并建系。该纯合转基因小鼠与野生型小鼠交配制备的胎儿成纤维细胞具有G4 1 8抗性 ,可作为ES细胞基因打靶培养中的饲养层细胞。结论 通过微生物学和遗传学上对Neor 转基因小鼠进行质量控制 ,使Neor 转基因小鼠达到了清洁级 ,并建立纯合子品系。 展开更多
关键词 纯合子 neo^r 转基因 小鼠 品系 生物净化 聚合酶链反应
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转基因猪中抗生素标记基因neo漂移风险评估
6
作者 王庆庆 高鹏飞 +5 位作者 李和刚 马德尊 蔡春波 钱丽丽 姜声旺 崔文涛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第10期2720-2725,共6页
本试验旨在研究转基因猪中抗生素标记基因neo漂移的可能性。利用Southern blotting鉴定F1代仔猪的显隐性,结果发现6头仔猪中有3头为转基因仔猪,3头为阴性仔猪。通过PCR技术对试验仔猪血液和消化道组织中neo基因进行检测,结果发现neo基... 本试验旨在研究转基因猪中抗生素标记基因neo漂移的可能性。利用Southern blotting鉴定F1代仔猪的显隐性,结果发现6头仔猪中有3头为转基因仔猪,3头为阴性仔猪。通过PCR技术对试验仔猪血液和消化道组织中neo基因进行检测,结果发现neo基因没有在血液水平和消化道组织中发生漂移。通过PCR技术对试验仔猪肠道细菌中neo基因进行检测,在肠道细菌基因组中没有检测到neo基因的存在。检测结果表明,仔猪血液、肠道细菌和消化道组织等都没有发生neo基因的漂移。 展开更多
关键词 转基因仔猪 neo基因 基因漂移
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青藏高原东北缘若尔盖盆地晚新近纪沉积的岩石地层学 被引量:7
7
作者 盛海洋 《地质科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期445-472,共28页
通过野外地质填图和系统取样,以岩石地层特征为基础,以新构造运动为背景,按照多重地层划分观点,本文首次对若尔盖盆地晚新近纪岩石地层的对比和划分做了深入的研究。对黄河干流、白河支流和黑河支流水系的河道堆积岩石的典型剖面的研究... 通过野外地质填图和系统取样,以岩石地层特征为基础,以新构造运动为背景,按照多重地层划分观点,本文首次对若尔盖盆地晚新近纪岩石地层的对比和划分做了深入的研究。对黄河干流、白河支流和黑河支流水系的河道堆积岩石的典型剖面的研究,表明更新-全新世的不同发展阶段具有不同的特征;相同时期不同水系的沉积物也不尽相同,反映出盆地晚新近纪地层的发育过程及空间上的差异。对冰川堆积终碛垄测年等研究反映出末次盛冰期和全新世中几次较强的寒冷事件,并划分出4套冰碛层。综合前人的古脊椎动物化石和14C、TL、OSL和ESR等同位素测年资料,将为进一步提出研究区晚新近纪年代地层的划分奠定基础。 展开更多
关键词 岩石地层学 河道堆积 冰川堆积 新构造运动 晚新近纪 若尔盖盆地
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山羊Myostatin基因打靶载体的构建 被引量:2
8
作者 潘求真 孙书锋 +5 位作者 陆泉枝 王海 连正兴 杨宁 李宁 谭景和 《中国草食动物》 2006年第3期10-13,共4页
根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列,设计引物,通过PCR方法扩增了山羊的Myostatin基因的3′臂、5′臂,其长度分别为1·4kb、4·5kb。将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已知发表的Myostatin序列进行同源性比... 根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列,设计引物,通过PCR方法扩增了山羊的Myostatin基因的3′臂、5′臂,其长度分别为1·4kb、4·5kb。将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已知发表的Myostatin序列进行同源性比较,同源性为100%。对目的片段与载体进行酶切后定向连接形成转基因结构,经序列测定后,证明其插入方向和位置完全正确,构建表达Neo、Tk基因的哺乳动物双标记转基因载体,并命名为ploxp-M。 展开更多
关键词 neo基因 TK基因 ploxP质粒 聚合酶链式反应
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猪Myostatin同源重组载体的构建 被引量:1
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作者 潘求真 陆泉枝 +5 位作者 孙书锋 王海 连正兴 杨宁 谭景和 吴常信 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2006年第10期10-13,共4页
根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列设计引物,通过PCR方法扩增了猪Myostatin基因的3′臂、5′臂,其长度分别为1.4 kb、4.4 kb。将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已发表的Myostatin序列进行同源性比较,同源性为100%... 根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列设计引物,通过PCR方法扩增了猪Myostatin基因的3′臂、5′臂,其长度分别为1.4 kb、4.4 kb。将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已发表的Myostatin序列进行同源性比较,同源性为100%;对目的片段与载体进行酶切后定向连接形成转基因结构,经序列测定后,证明其插入方向和位置完全正确,构建了猪的Myostatin表达Neor、Tk基因的双标记转基因载体。 展开更多
关键词 neo^r基因 TK基因 ploxP质粒 聚合酶链式反应
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电脉冲介导基因在小鼠杂交瘤细胞的高效转移 被引量:1
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作者 王建安 郑建强 +1 位作者 陈勇 白炎 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1991年第4期41-44,共4页
本文应用电脉冲介导基因转移法,获得pSV2-neo基因在小鼠杂交瘤细胞(B889)中的高效转移和稳定表达。研究了电场强度、脉冲宽度、脉冲次数等电场参数对基因转化频率的影响和小鼠杂交瘤细胞最适电转移条件。
关键词 电脉冲 基因转移 杂交瘤细胞
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通用型动物转基因载体的构建及验证 被引量:1
11
作者 丰秀静 田石 +3 位作者 蒋进 孟春花 茆达干 曹少先 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期1083-1087,共5页
为了构建通用型动物转基因载体,以pBluescriptⅡKS+为基础,根据标记基因所含酶切位点,设计改造多克隆位点,插入从pTARGET载体中扩增的SV40启动子及新霉素磷酸转移酶基因(Neo),其下游插入共表达序列、增强型绿色荧光蛋白质基因(EGFP)及SV... 为了构建通用型动物转基因载体,以pBluescriptⅡKS+为基础,根据标记基因所含酶切位点,设计改造多克隆位点,插入从pTARGET载体中扩增的SV40启动子及新霉素磷酸转移酶基因(Neo),其下游插入共表达序列、增强型绿色荧光蛋白质基因(EGFP)及SV40 poly A,并在SV40启动子上游和SV40 poly A下游各添加一个同向的LoxP位点,构建成通用载体pNIGFP,标记基因上游拥有Xho I、Sal I、SacⅡ多克隆位点,下游拥有Nhe I、Cla I、Sac I位点。酶切鉴定和测序表明pNIGFP构建正确。pNIGFP脂质体法转染山羊胎儿成纤维细胞,荧光显微镜下观察到EGFP高表达。遗传霉素(G418)筛选表明,Neo基因表达正常,山羊胎儿成纤维细胞的最适筛选浓度为600"g/ml。pNIGFP可利用G418进行抗性筛选,还可通过EGFP表达对外源基因的整合进行实时跟踪,另外,该载体具有LoxP位点,外源基因整合后可用Cre重组酶去除标记基因,具有高效、方便、安全的特点。 展开更多
关键词 转基因通用载体 共表达序列 新霉素磷酸转移酶基因 增强型绿色荧光蛋白质基因 LOXP
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四膜虫基因打靶载体的构建及其在虫体内的转化
12
作者 杨秋峰 蒋蔚 +1 位作者 刘永杰 陆承平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2876-2881,共6页
【目的】构建一个适于嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)的基因打靶载体,并分析转化四膜虫的特性。【方法】以嗜热四膜虫组蛋白H4-I基因作为启动子,利用H4-I基因的5′和3′侧翼区作为同源臂,并且保留H4-I基因编码区的起始密码子ATG... 【目的】构建一个适于嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)的基因打靶载体,并分析转化四膜虫的特性。【方法】以嗜热四膜虫组蛋白H4-I基因作为启动子,利用H4-I基因的5′和3′侧翼区作为同源臂,并且保留H4-I基因编码区的起始密码子ATG和终止密码子TGA,中间嵌入巴龙霉素抗性标记基因neo,从而构建一个基因打靶载体。将该载体电击转化到嗜热四膜虫接合株体内,使其同源重组到四膜虫H4-I基因上。通过巴龙霉素抗性筛选、PCR扩增目的基因对抗性虫株进行鉴定。光学和电子显微镜观察抗性虫株形态变化。【结果】成功构建了一个适于嗜热四膜虫的基因打靶载体,将其电击转化到四膜虫体内,抗性虫株的生长速度明显高于普通四膜虫,显微镜观察抗性虫株形态变小,大约是正常形态的1/20~1/30,抗性虫株表面光滑,未见纤毛。【结论】利用基因打靶载体将neo基因定向整合到四膜虫H4-Ⅰ基因内部,为今后在嗜热四膜虫体内表达外源蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 嗜热四膜虫 基因打靶载体 H4-Ⅰ neo 同源重组
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贝伐珠单抗联合腹腔热灌注化疗对卵巢癌患者APE1/Ref-1基因表达的影响 被引量:6
13
作者 李少星 《医学临床研究》 CAS 2017年第3期453-455,458,共4页
[目的]探讨贝伐珠单抗联合腹腔热灌注化疗治疗卵巢癌患者的疗效及对APE1/Ref-1基因表达的影响。[方法]取卵巢癌患者80例,根据治疗方法不同分为对照纽和观察组,每组40例。两组患者均给予紫杉醇联合卡铂化疗,对照组采用腹腔热灌注化... [目的]探讨贝伐珠单抗联合腹腔热灌注化疗治疗卵巢癌患者的疗效及对APE1/Ref-1基因表达的影响。[方法]取卵巢癌患者80例,根据治疗方法不同分为对照纽和观察组,每组40例。两组患者均给予紫杉醇联合卡铂化疗,对照组采用腹腔热灌注化疗治疗,观察组在对照组基础上联合腹腔内贝伐珠单抗治疗,比较两组临床疗效及对APE1/Ref-1基因表达的影响。[结果]观察组有效率为90.00%(36/40),明显高于对照组67.50%(27/40),其差异有统计学意义(P〈0.05);观察组患者治疗4周后不良反应发生率为15.00%(6/40),与对照组17.50%(7/40)比较差异无统计学意义(P〉0.05);Western blot结果显示:观察组治疗后APE1/Ref-1基因表达量显著增高,显著高于对照组APEl/Ref-1基因表达量(P〈0.05)。[结论]贝伐珠单抗合并用于腹腔热灌注化疗治疗卵巢癌患者,疗效满意,治疗时APE1/Ref-1基因表达明显增强,有助于提高化疗敏感性,值得推广应用。 展开更多
关键词 抗体 单克隆 高温 诱发 腹腔 卵巢肿瘤/治疗 基因表达
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腺相关病毒末端反向重复顺序折叠结构在真核细胞染色体基因组上的整合作用
14
作者 郭葆玉 胡宗林 +2 位作者 徐惠敏 孔宪涛 陆德如 《第二军医大学学报》 CSCD 北大核心 1994年第5期423-427,共5页
腺相关病毒(Adeno-associatedvirus,AAV)是一类线状单股DNA(SS-DNA)的微小病毒。依据Cavalier-Smith的SS-DNA病毒复制模型原理,将其末端反向重复顺序(ITRs)分离,变... 腺相关病毒(Adeno-associatedvirus,AAV)是一类线状单股DNA(SS-DNA)的微小病毒。依据Cavalier-Smith的SS-DNA病毒复制模型原理,将其末端反向重复顺序(ITRs)分离,变为折叠十字架结构,再以其发夹中的3'-OH为引物合成另一股姊妹染色体DNA,然后共价连接到亲代分子上,与辅助病毒Ad2和PAAV/Ad共转染真核生物细胞。Southern印迹分子杂交结果表明:插入这一折叠结构中由SV40早期启动子控制的报告基因-新霉素抗性基因拷贝已整合到细胞基因组染色体上,这种以无细菌DNA分子为支架的折叠结构不仅证明了Cavalier-Smith的理论,而且可望为外源基因导入真核细胞提供新的又一系统。 展开更多
关键词 腺相关病毒 折叠结构 新霉素抗性基因 基因转导
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肺纤维化模型鼠MMP/TIMP基因表达异常及复方甘草酸苷的调控机制研究 被引量:3
15
作者 何燕 丁维俊 +1 位作者 邓国忠 高天 《现代中西医结合杂志》 CAS 2008年第30期4681-4684,共4页
目的研究复方甘草酸苷(SNMC)对博莱霉素造模肺纤维化大鼠之基质金属蛋白酶(MMP)活性及其基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)基因表达的调控机制。方法SPF级SD成年大鼠174只,随机分成SNMC大、中、小剂量组,模型组,阳性组及正常组。采用博... 目的研究复方甘草酸苷(SNMC)对博莱霉素造模肺纤维化大鼠之基质金属蛋白酶(MMP)活性及其基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)基因表达的调控机制。方法SPF级SD成年大鼠174只,随机分成SNMC大、中、小剂量组,模型组,阳性组及正常组。采用博莱霉素造模肺纤维化大鼠,然后分别腹腔注射SNMC、阳性药物醋酸泼尼松龙或生理盐水;每日1次,至处死前1 d。收集肺组织标本,提取总RNA,采用RT-PCR法检测MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2等基因的相对表达水平。结果SNMC促进纤维化模型大鼠体质量明显下降、肺脏器系数明显上升(P<0.05或0.01)。MMP2/9基因表达在造模12 d后达最高值,随后有较大程度回落。SNMC能够显著性抑制MMP2/9基因表达的异常亢进,且呈一定程度剂量依赖性。TIMP1/2在造模后持续呈显著上升状态,SNMC能够显著性抑制TIMP1/2基因不断升级的异常亢进表达。结论SNMC通过对MMP2/9以及TIMP1/2的系统调控,阻止了肺泡胞外基质的过度增生与异常沉积,促进胞外基质降解,从而拮抗肺纤维化进程。 展开更多
关键词 复方甘草酸苷 肺纤维化 基因表达调控 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制因子
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乳腺癌新辅助化疗对ERCC1基因表达的影响 被引量:8
16
作者 傅建民 周颉 +1 位作者 谢建生 李辉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期603-605,共3页
目的探讨核苷酸切除修复基因家族成员ERCC1基因在乳腺癌中的表达情况和新辅助化疗对它的影响及临床意义。方法RT-PCR检测40例常规手术切除的乳腺癌标本和14例术前曾接受新辅助化疗的乳腺癌标本中ERCC1基因的表达。结果乳腺癌中ERCC1基... 目的探讨核苷酸切除修复基因家族成员ERCC1基因在乳腺癌中的表达情况和新辅助化疗对它的影响及临床意义。方法RT-PCR检测40例常规手术切除的乳腺癌标本和14例术前曾接受新辅助化疗的乳腺癌标本中ERCC1基因的表达。结果乳腺癌中ERCC1基因阳性表达率为35.0%,其表达水平与患者的年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、病理分型、组织学分级、ER、PR和HER-2均无明显相关性(P>0.05)。新辅助化疗组ERCC1基因的表达水平明显高于无化疗组(P<0.05)。结论ERCC1基因的表达不影响乳腺癌的临床病理特征,新辅助化疗可以上调ERCC1基因的表达水平,在临床后续化疗中应予重视。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 新辅助化疗 核苷酸切除修复 ERCC1基因
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鼻咽癌组织DNA聚合酶β基因突变与EBV感染相关
17
作者 郑红 李明善 +2 位作者 赵国强 董子明 宋宝义 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2005年第19期1790-1791,共2页
目的:研究探讨鼻咽癌中DNA聚合酶β(DNA pol-ym erase,βpolβ)的变异情况及与EBV感染有无相关关系.方法:采用RT-PCR法(逆转录-DNA聚合酶链反应)、PCR-SSCP(聚合酶链-单链构象多态性分析)、DNA序列分析法对26例鼻咽癌组织及癌旁组织标... 目的:研究探讨鼻咽癌中DNA聚合酶β(DNA pol-ym erase,βpolβ)的变异情况及与EBV感染有无相关关系.方法:采用RT-PCR法(逆转录-DNA聚合酶链反应)、PCR-SSCP(聚合酶链-单链构象多态性分析)、DNA序列分析法对26例鼻咽癌组织及癌旁组织标本进行polβ基因突变研究.用特异性EBV引物PCR扩增法检测EB病毒,分析出现EBV-PCR阳性与polβ突变及鼻咽癌发生之间的相关性.结果:polβ-SSCP结果显示癌旁组织标本中polβ无突变;26例鼻咽癌组织标本中存在polβ基因变异的有8例,突变率为30.8%.polβ基因变异的鼻咽癌标本测序结果显示:核苷酸序列有多种形式的改变.提取DNA用EBV引物进行扩增,26例鼻咽癌标本中出现阳性的有24例,阳性率为92.3%.结论:首次发现在鼻咽癌中存在多种形式的polβ突变,有polβ突变的病例均有EBV感染. 展开更多
关键词 DNA聚合酶Β 鼻咽肿瘤 基因 突变 EB病毒
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带新霉素抗性的萤光素酶报告载体的构建
18
作者 马云云 冯龙 +4 位作者 卫艳萍 李月白 何婷玉 董子明 赵国强 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第3期533-536,共4页
目的:构建带新霉素抗性的萤光素酶报告载体。方法:设计扩增新霉素抗性基因neo,克隆入萤光素酶报告载体pGL3,得到pGL3-neo。分别比较pGL3、pGL3-CMV promoter瞬时转染组和经G418筛选的pGL3-neo、pGL3-neo-CMV promoter稳定转染组细胞萤... 目的:构建带新霉素抗性的萤光素酶报告载体。方法:设计扩增新霉素抗性基因neo,克隆入萤光素酶报告载体pGL3,得到pGL3-neo。分别比较pGL3、pGL3-CMV promoter瞬时转染组和经G418筛选的pGL3-neo、pGL3-neo-CMV promoter稳定转染组细胞萤光素酶活性。结果:PCR扩增出neo表达单元;酶切和DNA测序分析鉴定得到带新霉素抗性的萤光素酶报告质粒pGL3-neo。G418筛选可获得稳定转染pGL3-neo细胞株和稳定转染pGL3-neo-CMV promoter的细胞株。荧光检测显示:瞬时转染pGL3组、pGL3-CMVpromoter组及稳定转染pGL3-neo组、pGL3-neo-CMVpromoter组萤光素酶活性值分别为1047±86、1504±107和34819±1479、456109±15791,稳定转染组萤光素酶活性均高于瞬时转染组,P<0.05。结论:成功构建了带新霉素抗性的萤光素酶报告基因载体,使报告基因检测数据的敏感性和可靠性显著提高。 展开更多
关键词 萤光素酶报告载体pGL3 新霉素抗性基因neo 克隆
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肺癌综合治疗的进展 被引量:5
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作者 孙燕 《当代医学》 2001年第6期52-58,共7页
根据肺癌的病理类型、 TNM分期和病人的一般状况,合理有计划地综合应用手术、放疗、化疗和生物基因治疗,已经在一定程度上提高了肺癌的治愈率。本文对综合治疗的原则、模式和各期肺癌的具体治疗和结果作了概括介绍,特别对发展方向作了... 根据肺癌的病理类型、 TNM分期和病人的一般状况,合理有计划地综合应用手术、放疗、化疗和生物基因治疗,已经在一定程度上提高了肺癌的治愈率。本文对综合治疗的原则、模式和各期肺癌的具体治疗和结果作了概括介绍,特别对发展方向作了讨论。 展开更多
关键词 综合治疗 肺癌 辅助化疗 放射治疗 生物治疗 基因治疗
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饮酒增加广西乙醛脱氢酶2基因变异基因型携带者发生肝癌的危险性 被引量:2
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作者 叶新平 彭涛 +3 位作者 苏智雄 肖开银 尚丽明 黎乐群 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期793-795,共3页
目的研究乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与饮酒因素交互作用在广西原发性肝癌发生中的作用。方法对广西壮族自治区300例肝癌患者和292例正常对照人群进行流行病学调查研究,并用PCR-RFLP方法检测ALDH2基因型。结果肝癌组和对照组中ALDH... 目的研究乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与饮酒因素交互作用在广西原发性肝癌发生中的作用。方法对广西壮族自治区300例肝癌患者和292例正常对照人群进行流行病学调查研究,并用PCR-RFLP方法检测ALDH2基因型。结果肝癌组和对照组中ALDH2变异基因型携带者分别占50.33%和47.95%(P=0.561)。肝癌人群ALDH2基因型不存在区域和民族差异(P〉0.05)。饮酒频度每周≥3次的ALDH2*2携带者发生肝癌的危险性是饮酒频度每周〈3次的ALDH2*1携带者的3、34倍(95%CI1.75~6.41)。HBsAg阳性者发生肝癌的危险性明显高于HbsAg阴性者(P〈0.001)。结论ALDH2基因型不构成壮汉族间肝癌发病差异的基础,频繁饮酒可能是ALDH2基因变异基因型携带者发生肝癌的危险因素。 展开更多
关键词 乙醛脱氢酶2(ALDH2) 基因多态性 饮酒 肝肿瘤 HBV
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