Neo-Sensitab纸片扩散法与NCCL SM27-A微量稀释法测定97株酵母对抗真菌药物敏感性的比较

目的比较Neo-Sensitab纸片扩散法和NCCLS微量稀释法的一致性,评价该商品化方案的稳定性。方法同时采用NCCLSM27-A微量稀释法和Neo-Sensitab纸片扩散法测定临床分离的97株酵母对两性霉素B(AMB)、氟康唑(FCZ)、5-氟胞嘧啶(5-FC)、酮康唑(KCZ)和伊曲康唑(ITC)等五种常用抗真菌药物的敏感性。结果两种方法的药敏结果一致率分别为AMB100%,FCZ94.8%,5-FC93.8%,KCZ75.3%和ITC84.5%。结论纸片扩散法和微量稀释法药敏测试结果一致率较高,以FCZ、AMB和5-FC最佳,该方法检测敏感株的准确率较高,而在区分耐药株和中介株方面有所不足。

纸片扩散法检测淋病奈瑟菌的药物敏感性

目的探讨纸片扩散法检测淋病奈瑟菌对7种监测药物敏感性的准确性。方法以琼脂稀释法作为参考方法,采用纸片扩散法(K-B法)配对检测60株临床淋病奈瑟菌对头孢曲松、头孢克肟、大观霉素、阿奇霉素、环丙沙星、四环素和青霉素的敏感性,比较两种方法药敏结果的分类一致性、小误差、重大误差和极重大误差。结果与琼脂稀释法比较,K-B法检测头孢曲松、头孢克肟、大观霉素、阿奇霉素、环丙沙星、四环素和青霉素的分类一致性分别为95.0%、76.7%、100%、80.0%、93.3%、63.3%和90.0%;所检测药物中头孢曲松、头孢克肟、环丙沙星、四环素和青霉素有小误差,分别为5.0%、23.3%、6.7%、30.0%和10.0%;对阿奇霉素和四环素的极重大误差率分别为20.0%和6.7%。结论淋病奈瑟菌监测药物除头孢克肟、阿奇霉素和四环素外,K-B法药敏试验结果的准确性较高。

纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测鲍曼不动杆菌对替加环素体外敏感性的比较

目的比较微量肉汤稀释法和纸片扩散法对耐药饱曼不动杆菌替加环素敏感性试验检测结果。方法收集临床分离的非重复鲍曼不动杆菌42株,其中MDR菌株11株,XDR菌株31株,采用微量肉汤稀释法和纸片扩散法进行替加环素药物敏感性试验,比较检测结果的符合性。结果微量肉汤稀释法检测替加环素的敏感率、中介率和耐药率分别为97.6%、2.4%和0%,MIC500.5μg/mL,MIC902μg/mL。纸片扩散法药敏检测,不同药敏折点替加环素的敏感率从高到低依次为:Jones标准为28.6%,Kulah C标准为16.7%,FDA标准为2.4%,3种折点标准的中介率都很高,在45.2%～61.9%之间。与微量肉汤稀释法比较,不同药敏折点标准的总误差分别为Jones标准71.4%,Kulah C标准83.3%,FDA标准97.6%。以抑菌环直径≥12 mm作为敏感折点时总误差最小。结论耐药鲍曼不动杆菌的替加环素药敏检测中,纸片扩散法与微量肉汤稀释法之间存在差异,稀释法仍是首选检测手段,如只能行纸片法检测,建议以抑菌环直径≥12 mm判定为敏感。

真菌药敏纸片扩散法实验与应用研究

目的评价氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、酮康唑4种抗真菌药物在萄萄糖美蓝M-H琼脂培养基上进行K-B纸片扩散法药敏试验的可行性。方法应用NCCLS认可的氟康唑纸片扩散法和NCCLS M27-A肉汤稀释法检测氟康唑(FLC)、两性霉素B(AMB)、伊曲康唑(ITC)、酮康唑(KTC)对131株假丝酵母菌的敏感性;用纸片扩散法同时检测2种氟康唑(FLC1:25μg/片;FLC2:15μg/片)纸片的敏感性,对其结果进行比较。结果纸片扩散法中:FLC1与肉汤稀释法符合率为97.71%(128/131);FLC2与肉汤稀释法符合率为96.95%(127/131);AMB、ITC、KTC分别与肉汤稀释法符合率为98.47%(129/131)、98.47%(129/131)、97.71%(128/131)。经Kappa检验,K值分别为:0.8952、0.8681、0.8118、0.8509、0.7190;FLC1、FLC2、AMB、ITC 2种方法一致性优,KTC 2种方法一致性良好。结论葡萄糖美蓝M-H琼脂可代替Shadomy琼脂,适用于常规纸片扩散法真菌药敏试验。

CLSI推荐的琼脂稀释法与纸片扩散法对不动杆菌药敏检测的比较

目的比较美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的不动杆菌抗生素敏感性试验琼脂稀释法和纸片扩散法检测结果。方法收集2005年1月至2006年10月临床分离的非重复不动杆菌234株,采用琼脂稀释法和纸片扩散法对临床常用的12种抗生素进行敏感性试验,比较2种检测结果的符合性。结果环丙沙星[极严重错误率(VME)0.43%]、庆大霉素[VME 1.28%,一般错误率(MIE)2.14%]、阿米卡星[VME 0.43%,严重错误率(ME)1.71%,MIE 4.27%]、四环素(VME 0.43%,MIE 8.97%)、复方磺胺甲唑(VME 0.85%,ME0.43%,MIE 1.28%)、亚胺培南(VME 0.85%,ME 0.85%,MIE 2.99%),2种方法差异在可接受范围,符合性较好。青霉素和头孢菌素类药物,除哌拉西林(VME 0.43%,MIE 5.98%)外,头孢他啶(VME 0.43%,MIE10.68%)、头孢曲松(MIE 18.38%)、头孢吡肟(VME 0.85%,ME 2.56%,MIE 25.64%)、氨苄西林-舒巴坦(VME 0.85%,MIE 38.03%)、头孢哌酮-舒巴坦(VME 6.84%,MIE 45.73%)符合性较差。结论CLSI推荐的不动杆菌抗生素敏感性试验琼脂稀释法和纸片扩散法检测青霉素类和头孢菌素类药物结果存在差异,应引起临床实验室关注。

纸片扩散确认法与聚合酶链式反应检测超广谱β-內酰胺酶的比较

【目的】分析纸片扩散确认法与聚合酶链式反应(PCR)检测超广谱β-內酰胺酶(ESBL)检出率。【方法】以分离保存的30株多重耐药(MDR),对3种以上实验所用抗生素耐药)且β-内酰胺酶阳性鲍曼不动杆菌(AB)菌株作为研究对象,对其中15株经纸片扩散确认ESBL+AB和15株ESBL-AB菌株的分布、药敏、质粒谱及基因型作了比较分析,并对两种方法检出ESBL的阳性率进行比较。【结果】通过纸片扩散确认法检出的ESBL+AB和ESBL-AB在不同科室间的分布(P>0.05)、不同标本间的分布(P>0.05)、对不同抗生素的耐药情况(P>0.05)及质粒谱都无明显差异,且用聚合酶链式反应在ESBL-AB质粒上也分离到了相同的3种耐药基因,PCR法检测ESBL的阳性率高于纸片扩散确认法(P<0.001)。【结论】用PCR法检测ESBL更快更敏感,对指导临床合理使用抗生素和降低医院感染率和病死率有重要意义。

头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林葡萄球菌

目的:评价头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的方法。方法:采用2004年NCCLS推荐的30μg/片头孢西丁纸片法检测MRS,以PCR方法检测mecA基因为"金标准"。结果:在60株临床分离的葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌36株,凝固酶阴性葡萄球菌24株。用PCR方法检测mecA基因阳性43株(金黄色葡萄球菌25株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),阴性17株(金黄色葡萄球菌11株,凝固酶阴性葡萄球菌6株);用头孢西丁纸片法筛查MRS耐药(+)41株(金黄色葡萄球菌23株,凝固酶阴性葡萄球菌18株),敏感(-)19株(金黄色葡萄球菌13株,凝固酶阴性葡萄球菌6株)。以PCR检测mecA基因法为"金标准",头孢西丁纸片法的敏感度和特异度分别为95.3%(41/43)、100%(17/17)。准确度为96.7%(58/60)。结论:头孢西丁纸片法筛查MRS与mecA基因检测法具有很好的一致性,该方法适合在临床微生物实验室中推广使用。

纸片扩散法比较BioPure MTAD等冲洗液抑制根管内常见菌株性能的试验研究

目的用纸片扩散法检测不同根管冲洗液对多种根管内常见菌株的抑菌圈,比较其体外抑菌能力。方法固体培养基上涂布菌悬液,放无菌滤纸片,纸片上滴加0.005mL试验液体或蒸馏水作阴性对照。适宜条件培养后观察并测定抑菌圈大小。结果BioPure MTAD对多种试验菌株的抑菌圈最大,而质量分数为1.3%的次氯酸钠对多种试验菌株的抑菌圈最小,两者间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在纸片扩散法中,BioPure MTAD对多种试验菌株均显示了良好的抑菌性能。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法 用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果 mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论 头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的可靠性和临床实用性进行评估。方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、m ecA基因的检测结果进行比较。结果m ecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100%和98.9%,特异性均为100%,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97.8%、98.9%和97.8%,特异性均为100%。结论头孢西丁纸片扩散法与m ecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法。

纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测念珠菌氟康唑和伏立康唑药物敏感性的比较

目的评价纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑药物敏感性的一致率。方法针对218株侵袭性真菌感染部位分离的念珠菌,分别采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)M44-A2纸片扩散法和CLSIM27微量肉汤稀释法进行药物敏感性检测。依据2018年颁布的CLSIM60新的纸片扩散法判定折点,以微量肉汤稀释法为标准评估纸片扩散法测定结果的分类一致率和错误率。结果2种方法检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和光滑念珠菌氟康唑药物敏感性的一致率分别为97.6%、95.1%、97.4%和90.5%。2种方法在检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌伏立康唑敏感性的一致率分别为97.6%、90.2%、97.4%和81.2%。结论纸片扩散法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的药物敏感性与微量肉汤稀释法一致率较高,是念珠菌药物敏感性测定简便且准确性较高的检测方法,推荐在真菌实验室常规检测或耐药监测网使用。

安妥沙星纸片扩散法外抗菌活性测定折点初步研究

目的:确定安妥沙星对葡萄球菌属、肠杆菌科、非发酵菌及嗜血杆菌属的纸片扩散法体外抗菌活性测定折点。方法:采用标准琼脂二倍稀释法与纸片扩散法(5μg和10μg)测定安妥沙星对临床常见致病菌的敏感性,并与临床常用的氟喹诺酮类药物相比较分析,结合人体药代动力学参数,利用MIC与抑菌圈直径散点图,初步确定安妥沙星纸片扩散法对常见细菌的折点。结果:安妥沙星的体外抗菌作用与左氧氟沙星接近且相关性最好,根据安妥沙星琼脂稀释法体外抗菌活性测定的临界浓度(嗜血杆菌敏感临界浓度为≤1mg/L,其他细菌敏感、中介与耐药临界浓度分别为≤2、4、≥8mg/L),利用MIC与抑菌圈直径散点图初步确定安妥沙星(10μg)纸片对嗜血杆菌抑菌圈直径≥21mm为敏感,其它菌种耐药、中介与敏感的抑菌圈直径分别为≤14mm、15～17mm和≥18mm。标准菌株质控范围分别为大肠埃希菌ATCC2592224～31mm,铜绿假单胞菌ATCC2785322～26mm,金黄色葡萄球菌ATCC2592322～28mm。结论:通过体外抗菌活性比较,利用MIC与抑菌圈直径散点图,初步确定了安妥沙星纸片扩散法体外抗菌活性测定对常见细菌的折点,供临床应用参考与验证。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌

目的以PCR方法检测溶血葡萄球菌mecA基因为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcushaemolyticus,MRSH)的敏感度和特异性。方法用PCR扩增临床分离的114株溶血葡萄球菌,检测特异性的mecA基因片段;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测溶血葡萄球菌中耐甲氧西林的溶血葡萄球菌。结果114株溶血葡萄球菌经PCR法检测,MRSH有97株,占85.1%;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测MRSH分别有92、65、93株,与mecA基因法结果比较,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法敏感性分别为94.8%(92/97)、67.0%(65/97)、93.8%(91/97);特异性分别为100%(17/17)、100%(17/17)、88.2%(15/17)。χ2检验,头孢西丁纸片扩散法和mecA基因法差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSH具有很高敏感度和特异性,是筛选和确认MRSH的一种可靠方法。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性。方法 PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准K B(Kirby Bauer)法进行。结果 在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138 株,表皮葡萄球菌30株,溶血葡萄球菌22株,经PCR法检测mecA基因,金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2%(112/138)、96.1%(50/52)。头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2%(112/138)、94.2%(49/52),与mecA基因法结果相比较,头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99.4%(161/162)、100.0%(28/28), 两者符合率为99.5%(189/190),2种方法所获得的结果经统计学处理,两者差异无显著性。结论 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度,适合在临床微生物实验室中进行推广。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究

目的评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的准确性。方法头孢西丁、苯唑西林药敏纸片分别采用KB法检测156株金黄色葡萄球菌临床分离株,同时采用PCR扩增mecA基因方法为检测MRSA的标准方法,比较两种方法的准确性。结果95株mecA基因阳性,61株mecA基因阴性;头孢西丁、苯唑西林药敏纸片KB法的敏感性分别为98.9%和96.7%,特异性分别为98.4%和93.4%;头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性高于苯唑西林纸片扩散法。结论头孢西丁纸片扩散法是检测MRSA的可靠方法。

微生物分析仪法与常规纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的比较

为了比较VITEK 2Compact微生物分析仪法和常规纸片扩散法在细菌耐药表型检测中的差异,随机选取我院细菌室2012年7月至2013年6月分离保存的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌各100株,分别以常规纸片扩散法和VITEK 2Compact微生物分析仪检测其耐药表型,并分析比较结果。检测结果显示,VITEK 2Compact检测耐药表型结果与常规纸片扩散法检测结果无显著性差异(p>0.05)。本研究表明VITEK 2Compact微生物分析仪能对致病菌的耐药表型进行快速、准确地测定,且灵敏度、特异度较高,能够及时、准确地为临床提供药敏结果,大大提高抗感染治疗的疗效。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用

目的以PCR检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）mecA基因为金标准，评价头孢西丁纸片扩散法检测MRS的临床应用。方法收集各种细菌感染性标本分离到的葡萄球菌，细菌的鉴定采用法国梅里埃全自动微生物分析系Vitek-60，分别采用PCR扩增mecA法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和抗青霉素结合蛋白2a（抗PBP2a）胶乳凝集法检测葡萄球菌中MRS。结果经PCR检测mecA证实西安地区SA中MRSA的发生率为69．2％（54／78），CNS中MRCNS的发生率为67．7％（65／96）；其余三种方法检测SA中的MRSA发生率分别为67．9％，57．7％，66．7％，CNS中MRCNS的发生率分别为64．6％，58．3％，63．5％。头孢西丁纸片扩散法与mecA基因法结果相比较检测MRSA，其灵敏度和特异度分别为98．1％和100．0％，两者符合率为98．7％；MRSCoN的灵敏度和特异度分别为95．4％扣100．0％，两者符合率为96．9％。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感度和特异度高于苯唑西林纸片扩散法，与PCR检测mecA法具有较好的一致性，可作为临床实验室常规检测MRS的常规方法。