新霉素A、B及其衍生物抗HIV作用的研究

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)自20世纪80年代被发现以来在全世界范围内迅速蔓延,严重地威胁到人类的健康,故研制高效、低毒的抗HIV药物迫在眉睫。本文综述了新霉素A、B及其衍生物作用于HIV的3个不同途径,包括:(1)与HIV RNA上的TAR和RRE结合;(2)与gp120-gp41竞争性地和CD4,CXCR4\CCR5结合;(3)作用于HIV的171-merψ-RNA。此外,还针对这3个不同途径分别阐述了其相应的作用机制。新霉素及其衍生物抗HIV作用的研究结果为抗HIV药物的研究提供了更多的研究方向及可借鉴的研究方法。

高效液相色谱-脉冲安培检测法测定发酵液中新霉素B组分含量

目的建立快速准确测定发酵液中新霉素B组分含量的HPLC-ECD方法。方法采用高效液相色谱-脉冲安培检测法,Agilent zorbax-SB C18（5μm,4.6×250mm）色谱柱,以25mL.L-1TFA＋6mL.L-1NaOH（50%,W/W）作为流动相,流速0.7mL.min-1;柱后衍生液0.5MNaOH溶液,流速1mL.min-1;电化学参数,E1=＋0.1V,E2=＋0.8V,E3=-0.6V。结果新霉素B在进样量0.1~2.0μg的范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9998）,平均加样回收率1.01（RSD=2.09%,n=9）。结论方法操作简便,经济快速,结果准确,可用于新霉素发酵过程的含量测定。

抗菌肽与抗生素对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的体外协同抗菌效果研究

本试验旨在研究抗菌肽与抗生素联合使用对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的作用效果。通过最小抑菌浓度(mini muminhibitory concentration,MIC)测定,联合药敏试验,研究牛乳铁蛋白肽(Lactoferricin B,LFcin B)、天蚕素A(Cecropin A)及金霉素、新霉素对大肠杆菌(Escherichia coliATCC25922)、金黄色葡萄球菌(Staphylo-coccus aureus ATCC25923)、猪霍乱沙门氏菌(Sal monella choleraesuis CMCC50013)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa CMCC10014)的体外协同抗菌效应。结果表明:Cecropin A与LFcin B联合使用对所试革兰氏阴性菌均表现为协同作用,两者联用时的MIC分别是单用时的1/4和1/8～1/4;金霉素与LFcin B联合使用对革兰氏阴性菌和阳性菌表现为协同作用,两者联用时的MIC是单用时的1/8～1/4;另外,Cecropin A与金霉素联合使用对革兰氏阴性菌也表现为协同作用。4种药物的两两合用对受试菌株均不表现拮抗作用。结果提示,LFcin B、Cecropin A及金霉素联合使用对革兰氏阴性菌及阳性菌具有协同作用。

硫酸新霉素及相关物质体外抗菌活性与毒性的研究

目的:研究硫酸新霉素及相关物质体外抗菌活性及毒性,探索可能影响硫酸新霉素安全性及有效性的因子,为合理制定有关物质限度提供依据。方法:采用常量肉汤稀释法和纸片扩散法考察硫酸新霉素及相关物质的抗菌活性;用豚鼠和斑马鱼模型评价硫酸新霉素及其成分B、C的毒性。结果:硫酸新霉素及相关物质的体外抗菌活性顺序均为:硫酸新霉素B>硫酸新霉素>硫酸新霉素C>硫酸核糖霉素>巴龙霉素>新霉胺;对豚鼠听力损伤大小排序为:硫酸新霉素>硫酸新霉素B>硫酸新霉素C;药物对斑马鱼致死率及器官毒性排序均为:硫酸新霉素>硫酸新霉素B>硫酸新霉素C。结论:硫酸新霉素及相关物质抗菌活性和毒性存在较大差异,建议在硫酸新霉素质量标准中增加对有关物质的控制,明确新霉素C、新霉胺、单杂及总杂限度,提高该药质量。

硫酸新霉素溶液对热稳定性预测

1%硫酸新霉素溶液在临床应用广泛,但其稳定性较差,降解产物无活性。本丈通过实验,确定了1%硫酸新霉素溶液宜在低于10℃的条件下保管,应在100℃常压蒸汽灭菌30min。

RNA适配体作为类抗性基因的可行性

【背景】抗性基因(ResistanceGene)在分子生物学研究中具有重要作用,但其基因片段较大,限制了载体中插入目的序列的长度。【目的】探究分子量较小的RNA适配体的类抗性基因作用,用于优化载体载量和扩展目的基因片段。【方法】基于tRNA支架在体内富集表达RNA适配体,筛选验证氨基糖苷类抗生素新霉素B的RNA适配体的抗性作用。【结果】构建tRNA支架重组RNA表达载体并进行体内筛选,得到A Site和Avirus这2个RNA适配体分子,能够耐受新霉素B浓度为19μg/mL(固体培养基)和30μg/mL(液体培养基)。【结论】RNA适配体可发挥类抗性基因的功能,本文策略有望用于抗性基因的优化,缩小质粒载体载量,为分子克隆技术提供新的手段。